剖宫产术后肠球菌感染分布及体外耐药性监测

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1、剖宫产术后肠球菌感染分布及体外耐药性监测作者：刘亚萍，张荻华，陆平芳，张莉【摘要】目的了解剖宫产术后患者肠球菌感染菌种的分布及体外耐药特性。方法对手术切口及阴道分泌物分离出的46株肠球菌感染标本按全国临床检验操作规程进行分离鉴定并以K-B法进行药敏试验。结果在临床分离的肠球菌以粪肠球菌为主，占84.78%，其次为屎肠球菌和鸟肠球菌，有合并感染和定植感染的特性；对常用抗菌药物青霉素、氨苄西林、红霉素的耐药性，屎肠球菌明显高于粪肠球菌。结论肠球菌感染以粪肠球菌为主，各菌种对抗菌药物的耐药谱有明显差异，

2、微生物室必须准确鉴定菌种及做好药敏试验，指导临床合理选择抗菌药物；应强化手术规范化操作，提高细菌送检率，对控制院内感染有重要意义。【关键词】剖宫产术；肠球菌属；交叉感染；抗药性；微生物敏感性试验　　有研究显示［1］，肠球菌是引起院内感染的第二大病原菌；高水平耐氨基糖苷类肠球菌和耐万古霉素肠球菌的出现，使得耐药肠球菌的感染成为临床治疗的难点。为了解我院剖宫产术后肠球菌感染和耐药情况，我们对2003年1月～2006年10月我院剖宫产术后肠球菌感染进行调查，并对耐药性进行回顾性分析。　　1资料与方法　　

3、1.1临床资料患者系我院产科病房2003年1月～2006年10月行剖宫产术后临床疑为细菌感染的病人，从切口分泌物和阴道分泌物中分离出46株标本。　　1.2标本采集伤口常规消毒后以无菌棉拭子蘸取炎症分泌物，置于干燥无菌试管内，立即送检。　　1.3菌株分离鉴定按《全国临床检验操作规程》Fackam＆collins生化鉴定表进行菌株的分离鉴定［1］。　　根据革兰阳性菌，触酶试验阴性，在含40%胆汁中可水解七叶苷，在65g/L氯化钠肉汤中和45℃中生长，吡咯烷酮芳基酰胺酶（PYR）试验阳性，葡萄糖不产气而

4、归于肠球菌属，根据4个关键表型特性试验进行分群，然后根据各群内鉴别试验鉴定到种。肠球菌属鉴定的4个关键性试验为甘露醇、山梨醇、山梨糖和精氨酸脱氨基试验，分解甘露醇、山梨醇、山梨糖，精氨酸水解酶阴性的菌株归入Ⅰ群，不分解甘露醇、山梨醇、山梨糖，精氨酸水解酶阳性菌株归入Ⅲ群，发酵甘露醇、水解精氨酸；不分解山梨糖，山梨醇不定的菌株归属Ⅱ群。再根据阿拉伯糖、棉子糖、乳糖、蔗糖、动力、色素、丙酮酸盐等生化试验鉴定到种。　　1.4药敏试验①采用纸片扩散法（K-B法），药敏纸片采用北京天坛药物生物技术开发公司产

5、品。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923、粪肠球菌ATCC29212，购自卫生部临床检验中心。操作及结果判读严格按照美国临床实验室标准委员会（NCCLS）制定的最新标准进行。②耐万古霉素肠球菌（VRE）的测定：用含量为30μg/片万古霉素药敏纸片进行药敏试验，抑菌环直径≤14mm判定为耐万古霉素肠球菌。③高耐氨基糖苷类（HLAR）肠球菌的筛选：采用M-H琼脂平板筛选法，应用含有120μg/片庆大霉素和300μg/片链霉素药敏纸片对试验菌株进行药敏试验，如果抑菌环直径≤6mm判定为HLAR株，

6、抑菌环直径≥10mm判定为敏感株。④β-内酰胺酶测定采用硝噻吩纸片显色法进行检测，颜色变红为阳性。　　2结果　　2.1试验菌株菌种分布临床标本共分离46株肠球菌，其中粪肠球菌（Ⅱ群）39株（84.78%），屎肠球菌（Ⅱ群）6株(13.04%)，鸟肠球菌（Ⅰ群）1株(2.17%)。　　2.2合并感染46例患者中8例（17.39%）合并或继发于其他细菌感染，以大肠埃希氏菌最多（7株），易变微球菌1株。　　2.3肠球菌对抗菌药物的耐药率比较粪肠球菌和屎肠球菌对11种抗菌药物的耐药性，结果见表1。屎肠球菌

7、对抗菌药物的耐药性普遍高于粪肠球菌，特别对氨苄西林和青霉素，耐药率分别为83.33%和100%，明显高于粪肠球菌的38.46%和35.90%。对红霉素、环丙沙星、头孢曲松，两种肠球菌的耐药率均保持在较高水平，占60%以上；对呋喃妥因有较高的敏感性；对万古霉素两种肠球菌均表现出良好的敏感性，均在97.44%以上。对左氧氟沙星、氯霉素粪肠球菌的耐药率在中等水平以下，而屎肠球菌的耐药率较低。　　2.4VRE的分离率对万古霉素耐药的菌株进一步验证，结果抑菌环的直径≤14mm。VRE中粪肠球菌占2.17%（

8、1/46），其他肠球菌未发现耐药菌株。　　2.5HLGR情况粪肠球菌中高浓度庆大霉素耐药株（HLGR）占46.15%（18株）、高浓度链霉素耐药株（HLSR）占41.02%(16株)。屎肠球菌中因菌株较少，HLGR和HLSR均占66.67%(各4株)。　　2.6对46株肠球菌β-内酰胺酶的测定通过对46株肠球菌β-内酰胺酶的测定，未检出阳性菌株（0/46）。　　表1粪肠球菌及屎肠球菌对11种抗生素的耐药性比较（略）　　3讨论　　3.1肠球菌主要有三种鉴定方法分别为：Fackam＆c