柴胡皂苷d对酒精性肝纤维化大鼠星形细胞活化的影响

柴胡皂苷d对酒精性肝纤维化大鼠星形细胞活化的影响

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1、柴胡皂苷d对酒精性肝纤维化大鼠星形细胞活化的影响作者:李素婷,杨鹤梅,齐洁敏,梅立新【摘要】  目的研究柴胡皂苷d(SSd)对酒精性肝纤维化大鼠星形细胞(HSC)活化的影响,以探讨SSd抗肝纤维化的作用机制。方法SD大鼠随机分为3组:酒精组、SS-d保护组、正常对照组。利用白酒灌胃辅以高脂饲料方法建立大鼠肝纤维化模型,同时给予SSd保护,12周末处死大鼠。免疫组化检测肝组织α平滑肌肌动蛋白(αSMA)的表达,H.E染色和VanGieson染色观察肝组织病理改变和纤维组织增生,常规生化方法检测肝功能。结果和模型组

2、比较,SSd明显减少肝组织中αSMA的表达;降低血清ALT,AST活性和肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;肝组织病理改变明显好转,纤维组织增生明显减少。结论SSd通过降低αSAM表达,抑制肝HSC的活化达到抗肝纤维化作用。【关键词】柴胡皂苷d肝纤维化肝星形细胞α平滑肌肌动蛋白  Abstract:ObjectiveTostudytheeffectsofsaikosaponin-d(SSd)ontheactivationofHepaticStellateCells(HSC)andtoinvestigatethemainm

3、echanismofSS-dinprotectionofliverfibrosis.MethodsSDratslydividedinto3groups:normalgroup,ethanol-fedgroup,SSdinterventionalgroup.56%distilledalcoholandhighfatdietg·kg-1oncedaily.Ratsoothmuscleactin(αSMA)munohistochemistrymethod.Pathologicalchangeinlivertissueicros

4、copebyH.EandVan-Giesonstaining;thecontentoflivertissuehydroxyproline(Hyp)andliverhistopathologyinedbykivchemistry.Resultsparedodelgroup,SSdcouldreducetheexpressionofαSMAmarkedly,improvethepathologicalchangesoflivertissueanddecreasetheproductionoffiberssignificant

5、ly,decreasethelevelsofserumalaninetransaminase(ALT),aspartatetransaminase(AST)andthecontentsofliverHypsignificantly.ConclusionSSdcaninhibithepaticfibrosisthroughinhibitingtheexpressionofαSMAinHSC.  Keypus光学显微镜和摄像显微镜,德国LEica公司产品。  2方法  2.1动物分组及模型的建立  参考  2.5统计学处理 

6、 数据以±s表示,用SPSS计算机软件进行统计学分析,组间比较采用t检验。  3结果  3.1肝功能及Hyp含量的测定如表1所示,酒精组血清ALT,AST活性明显升高,肝组织Hyp含量亦明显升高;给予SSd保护后,血清ALT,AST活性和肝组织Hyp含量明显降低(P<0.01);表明SSd有保护肝细胞,拮抗肝纤维化形成的作用。表1SSd对血清ALT,AST活性和肝脏Hyp含量的影响(略)  3.2肝纤维化病理学观察H.E染色:正常组肝组织结构正常,肝细胞排列整齐,肝小叶结构完整,无肝细胞脂肪变性坏死;酒精组大鼠肝组织病

7、理损伤严重,肝小叶结构紊乱,肝细胞呈气球样变及脂肪变性,肝细胞肿胀,胞质疏松,可见较大脂滴;汇管区有炎症细胞浸润,胶原纤维沿汇管区及中央静脉周围向肝小叶内延伸,肝小叶失去正常的结构特点;SS-d保护组上述症状明显减轻,肝细胞有轻度空泡样变性,纤维组织增生明显减少。V-G染色:正常组无明显胶原纤维,酒精组有大量胶原纤维伸入肝小叶,有部分假小叶形成,SS-d组胶原纤维明显减少,纤维隔较薄,无假小叶形成。肝纤维化积分:与酒精组相比,SS-d保护组病理学分期有明显改善(P<0.01)。见表2。表2SS-d对大鼠肝纤维化积分及α-SM

8、A表达量化结果的影响(略)  3.3肝组织α-SMA的表达及量化结果肝组织切片免疫组化染色显示:正常组肝组织α-SMA主要表达于汇管区动、静脉壁,而酒精组α-SMA在汇管区、纤维间隔和肝血窦处均呈阳性表达;SS-d保护组α-SMA表达较模型组有明显减弱,仅在汇管区和纤维间隔内有少量阳性细胞

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