妊娠滋养细胞疾病组织中端粒酶逆转录酶表达的研究论文

《妊娠滋养细胞疾病组织中端粒酶逆转录酶表达的研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、妊娠滋养细胞疾病组织中端粒酶逆转录酶表达的研究论文.freelantelomerasereversetranscriptase（hTERT）ingestationaltro-phoblasticdiseasesanditsclinicalsignificance.MethodsIn29gestationaltropholbastictumors（GTT），18hydatidiformmolesand20normalearlyembryonicvilli，theexpressionofhTERTmunocytochemicalstainingandimageana

2、lysistechnique.ResultsThehTERT，anditsaveragegreylevelmolesandearlyembryonicvillirespectively.TheexpressionofhTERTmolesandearlyembryonicvilli（P0.01），andshomolesandearlyembryonicvilli（P0.05）.ConclusionTelomeraseactivationmayplayanimportantroleinthegenesisoftrophoblastictumors.Detection

3、oftelomeraseactivityisofpotentialvalueinmakingtheprognosisofhyda-tidiformmoles.Keyantelomerasereversetranscriptase;immunohistochemistry端粒是位于染色体末端的一段DNA的重复序列。其长度决定细胞的寿命。随着细胞分裂端粒不断缩短，当端粒缩短到一定程度时，细胞会发生衰老和死亡。端粒酶可维持端粒的长度使细胞处于一种永生化状态。而永生化是细胞恶变的必经步骤，因此端粒酶的激活可能与恶性肿瘤的形成和发展密切相关。妊娠滋养细胞疾病主要包括葡萄胎

4、、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌。其中葡萄胎可恶变为侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌。本研究通过对妊娠滋养细胞疾病和正常早孕绒毛组织中人端粒酶逆转录酶（humantelomerasereversetranscriptase，hTERT）表达水平进行检测，以探讨其在妊娠滋养细胞疾病组织中的表达情况及其临床意义。1资料和方法1.1标本来源标本为我院病理科存档的47例妊娠滋养细胞疾病石蜡标本。其中绒毛膜癌和侵蚀性葡萄胎标本29例（滋养细胞肿瘤组），完全性葡萄胎标本18例（葡萄胎组）。另取20例孕60天以内人工流产的早孕绒毛组织（早孕绒毛组）作为对照。所有标本均经甲醛固定、石蜡包埋，制成

5、4μm切片待用。1.2免疫组织化学染色方法采用SABC法进行免疫组织化学染色。兔抗人端粒酶逆转录酶抗体和SABC试剂盒均由武汉博士德生物工程公司提供。免疫组织化学主要步骤为:石蜡切片常规脱蜡至水。3%H2O2封闭5min，应用热修复抗原方法暴露抗原。正常山羊血清室温封闭20min;第一抗体（兔抗人抗体）稀释度1∶100，于4℃过夜;羊抗兔IgG，37℃20min。SABC复合物37℃20min。DAB显色。苏木素轻度复染。树胶封片。1.3图像分析和数据处理每张切片在高倍镜（10×40）下随机选取5个视野，利用LeicaQante-lomeraseRNA，hTR）

6、、hTERT和端粒酶结合蛋白。人体正常组织细胞中广泛表达hTR，但无端粒酶活性。hTERT具有逆转录酶的主要特性，在大多数端粒酶阳性的组织、肿瘤组织和永生化细胞系中，hTERT的表达与端粒酶活性的表达一致［1］。陈学军等［2］用hTERT基因反义寡核苷酸作用于子宫内膜癌HEC-1A细胞，发现能够下调hTERT蛋白的表达，抑制端粒酶的活性，抑制细胞的生长。证明hTERT为端粒酶激活的限速酶。目前，端粒酶活性检测技术报道较多的为TRAP法及其改良的方法，由于需用新鲜组织，标本采集困难，测定过程中易有RNA酶的污染，操作烦琐，这些均限制了其临床应用。我们采用兔抗人端粒

7、酶逆转录酶抗体进行免疫组织化学检测，可以直接测定具有端粒酶活性的催化亚单位，石蜡标本来源方便，操作方法简单，还可以对hTERT在细胞内的表达进行定位观察。采用图像分析系统对hTERT阳性细胞进行灰度扫描分析，结果比目测观察更为客观和灵敏。本研究结果显示:hTERT在正常早孕绒毛和妊娠滋养细胞疾病中均有表达。绒毛膜癌和侵蚀性葡萄胎中hTERT的表达显著高于葡萄胎组织和正常早孕绒毛，统计学分析有显著性差异。而hTERT在葡萄胎和早孕绒毛中的表达无明显差异。妊娠滋养细胞疾病是一类组织来源和生物学行为有其特殊性的疾病。滋养细胞本身具有与肿瘤细胞相似的生物学特性，在妊娠早

8、期滋养细胞增殖旺盛，具有