重组人生长激素对裸鼠人胃癌移植瘤细胞周期的影响

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1、重组人生长激素对裸鼠人胃癌移植瘤细胞周期的影响作者：梁道明　张毅　张荧荧　袁勇　周东　陈嘉勇【摘要】目的：研究重组人生长激素（rebinanthumangroone,rhGH）对裸鼠人胃癌移植瘤细胞周期的影响。方法：将24只实验裸鼠随机分为对照组、顺铂（DDP）组、rhGH组和DDP+rhGH组，每组6只，将体外培养的人胃癌细胞MKN45接种于裸鼠右臀部皮下，裸鼠胃癌移植瘤模型成功建立后开始连续给药6d，给药结束后处死裸鼠。取出移植瘤，用流式细胞仪检测细胞周期，并分析细胞周期、细胞增殖指数（PI）及DNA抑制率。结果：给药结束后DDP+rhGH组和DD

2、P组S期细胞明显减少，而rhGH组和对照组比较增多（P<0.05）；G0-G1期、G2-M期的细胞增殖指数（PI）和DNA抑制率各组间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。rhGH组细胞凋亡率增加而对照组、DDP组和DDP+rhGH组减少（P<0.05）。结论：未发现rhGH对裸鼠人胃癌移植瘤细胞有明显促进分裂增殖作用。【关键词】重组人生长激素·裸鼠·胃肿瘤·细胞周期Effectsofrebinanthumangrooneoncellcycleofhumangastriccarcinomaxenograftinnudemice【AB

3、STRACT】Objective:Tostudytheeffectsofrebinanthumangroone（rhGH）oncellcycleofhumangastriccarcinomaxenograftinnudemice.Methods:ThenudemiceofthisexperimentangastriccarcinomacellsMKN45iceandcarcinomaxenograftmodeliceinthefolloalsentorinhibitionrateeasuringtumorvolume.Cellcycleofhumang

4、astriccancerMKN45,cellproliferationindex（PI）andDNAinhibitionalrateetry（FCM）.Results:ThecellsinSphaseofDDP+rhGHgroupandDDPgroupdecreasedobviouslyparedongcellsinG0-G1phase,G2-Mphase,PIandDNAinhibitionrate.TheapoptosiscellsinrhGHgroupincreasedremarkably（P<0.05）.　　近年来，生长激素（groone

5、,GH）作为一种与合成代谢有关的物质已受到广泛的关注，临床应用GH可纠正手术及创伤后的负氮平衡状态，能显著改善患者的营养状况,促进胃肠道管壁细胞的增殖和修复。已有研究证实GH在氮平衡时水平升高，而在伤口感染及术后下降［1］。但术后应用GH在促进机体恢复的同时是否会促进肿瘤细胞的增殖，目前仍缺乏实验依据。本研究通过在裸鼠体内建立移植瘤模型来研究重组人生长激素（rebinanthumangroone,rhGH）对人胃癌细胞是否具有增殖作用，为临床胃癌患者术后是否能应用rhGH提供实验依据。1　材料与方法1.1　实验材料　6周龄Nunu裸鼠，均为雌性，体质量

6、13～22g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，在昆明医学院天然药物药理重点实验室SPF级条件下饲养；人低分化胃癌细胞株MKN45，购于中科院上海细胞生物所细胞库；rhGH为安徽安科生物工程（集团）股份有限公司产品；顺铂（DDP）为云南个旧生物药业有限公司产品；碘化丙啶由上海求德生物化工有限公司生产；流式细胞仪由COULTER公司生产，EPICXP型。1.2　实验方法1.2.1　肿瘤模型制作　取培养的对数生长期人胃癌细胞MKN45，用0.25%胰蛋白酶消化，锥虫蓝染色计数细胞，细胞活力100%，用10%小牛血清1640液配成密度为2.0×107mL

7、-1的细胞悬液。随机选取2只裸鼠，以每只0.2mL将细胞悬液接种于裸鼠的右侧臀部皮下组织，3d后形成绿豆大小的肿块。裸鼠胃癌移植瘤体内传代：裸鼠胃癌移植瘤生长至直径约0.5cm，处死裸鼠，消毒皮肤，取出移植瘤，未见瘤体坏死，将瘤体切取成2mm×2mm×2mm的包块，接种于臀部，按此方法瘤体在裸鼠体内传2代。然后，将包块接种于24只裸鼠臀部，术后全部存活，无不良反应。7d后肿瘤形成，成瘤率100%，成功建立裸鼠胃癌移植瘤模型，裸鼠臀部均形成绿豆大小肿块。1.2.2　实验分组及给药方法　测量裸鼠的体重和胃癌移植瘤长短径，待移植瘤生长至0.5cm3左右，随机

8、分为对照组、顺铂组（DDP）、rhGH组和DDP+rhGH组，每组6只。分组后连续给药6d：对