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1、大叶蛇葡萄有效部位高效液相色谱指纹图谱研究作者:沈伟,陈树和,张秀桥,刘焱文【摘要】 目的建立大叶蛇葡萄AmpelopsismegalophyllaDielset.Gilg有效部位的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,以便完整地反映大叶蛇葡萄有效部位的内在化学信息,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法利用HPLC-DAD方法,梯度洗脱,测定了10批大叶蛇葡萄药材有效部位的样品。色谱条件为:AgilentTCC18分析柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温为30℃;流动相:乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱,流速为1.0ml/min;检测波长
2、为:250nm。结果建立了大叶蛇葡萄有效部位的HPLC指纹图谱,对10批不同采收时间的大叶蛇葡萄有效部位的样品进行了指纹图谱分析,标定了10个共有指纹峰,通过与对照品的保留时间及紫外光谱比较,1,5,6,9,10号峰分别鉴定为蛇葡萄素、花旗松素、槲皮苷、槲皮素、杨梅素。结论建立的HPLC指纹图谱能科学全面地反映大叶蛇葡萄的有效部位,可用于大叶蛇葡萄的质量控制。【关键词】大叶蛇葡萄有效部位高效液相色谱指纹图谱花旗松素 Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCfingerprintsoftheeffectiveparto
3、fAmpelopsismegalophyllaDielset.GilgforreflectingtheinternalchemicalinformationandevaluatingitsqualityinascientificandeffectiveethodentofAmpelopsismegalophyllaDielset.Gilg.Thepreparationofsample,theHPLCcolumn,mobilephase,elutionmode(isocraticandgradient)andgradientprogramizedin
4、ordertoobtainhighqualifiedHPLCprofile.TheHPLCsystemconsistedofapanda2996photodiode-arraydetector(DAD).DatapoedonanAgilentTCC18column(250mm×4.6mm,5μm)ixtureofacetonitrileand0.1%phosphoricacidaqueoussolutionasthemobilephaseingradientmode.Thecolumntemperaturel/min,andthedetection
5、.ResultsTheHPLCfingerprintsoftheeffectivepartofAmpelopsismegalophyllaDielset.Gilgshoonpeaksin10batchesofsamplescollectedatdifferenttime.Byparisonoftheretentiontimeandtheon-lineUVspectraofchemicalstandards,peak1,5,6,9and10pelosin,taxifolin,quercitrin,quercetinandmyricetin,respe
6、ctively.ConclusionTheHPLCfingerprintoftheeffectivepartofAmpelopsis.megalophyllaDielset.Gilgpelopsismegalophylla;Effectivepart;HPLCfingerprint;Taxifolin 大叶蛇葡萄A.megalophyllaDielset.Gilg为葡萄科蛇葡萄属植物,味酸涩,性平,具有清热利湿、活血化淤的功能,用于高血压病、痢疾、泄泻、小便淋痛、头昏目胀等治疗[1]。在我国主要分布于湖北、陕西、甘肃、福建、四川、贵州、云南等
7、地[2]。张汉萍等[3]从大叶蛇葡萄中分离出蛇葡萄素,并进行了初步药效学研究,结果表明蛇葡萄素对脱氧皮质酮盐性等高血压模型大鼠有降压作用。为了更好地开发大叶蛇葡萄这一具有湖北地方特色的药材,本课题组对大叶蛇葡萄进行了一系列的研究工作,首先对其进行提取并分别用石油醚、醋酸乙酯萃取,接着通过药理筛选实验发现醋酸乙酯部位提取物具有抗高血压的作用,并首次从中分离并鉴定了一系列黄酮类成分。药理筛选实验及该类化合物的分离鉴定将另文报道。本实验采用RP-HPLC对大叶蛇葡萄的有效部位进行了指纹图谱研究,以期为全面、准确的评价其内在质量,建立质量控制方法提供科学依
8、据。 1仪器与试药 1.1仪器po水系滤膜过滤);其余试剂均为分析纯。 1.3对照品蛇葡萄素、花旗松素、槲皮苷、槲皮