芒果叶不同组织部位高效液相色谱指纹图谱比较

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1、芒果叶不同组织部位高效液相色谱指纹图谱比较作者：冯旭，邓家刚，覃洁萍*，汪锌华，张炜【摘要】目的通过考察3个品种芒果叶不同组织部位甲醇提取物的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱，并对其HPLC指纹图谱进行比较，为研究和测定芒果叶等叶类药材的HPLC指纹图谱提供方法指导和实验依据。方法angiferaindicaL.invariousspeciesandmakeaparisonamongthem.Sotoprovidemethodguidelineandexperimentalbasisforstudyin

2、gandestablishmentofHPLCFingerprintphotometryofCaulisHerbslikeleavesofMangiferaindicaL..MethodsangiferaindicaL.indifferenttissuesshoogenEityshouldbetakenintoconsiderationetryofCaulisHerbs.　　Keyetry；Gradientelution；HPLC　　芒果叶系漆树科植物芒果MangiferaindicaL.的干燥叶，性味

3、酸、甘、凉、平，具有行气疏滞，祛疳积的功能，用于热滞腹痛，气胀，小儿疳积，消渴等证［1］，民间用于治疗咳嗽，临床证明对支气管炎所致咳嗽、咯痰有效，并有一定的平喘作用［2］。芒果叶含抗坏血酸、鞣质、芒果苷及鞣花酸、α儿茶精、莽草精、奎尼酸、山柰醇、ια侧柏烯等多种成分［3］，其中芒果苷是芒果叶的主要有效成分。芒果苷(mangiferin)是一种四羟基吡酮的碳糖苷，属双苯吡酮类化合物，研究表明，芒果苷是芒果叶止咳、化痰的主要活性成分［4］。芒果叶为广西地方习用药材，收载于《广西中药材标准》1990年版

4、［1］，标准中只建立了“性状”项，尚未建立鉴别、含量测定和指纹图谱标准。曾有　　2.6参照色谱峰的确定在“2.3”色谱条件下，取芒果苷对照品溶液进样，得到芒果苷对照品的色谱图（见图1），由于在各个芒果叶样品图谱中均出现保留时间、紫外光谱与芒果苷对照品一致的色谱峰（6号峰），并且该峰与相邻峰分离良好，保留时间适中（20.609min），经对照实验，确定其为芒果苷的色谱峰，因此本实验选择芒果苷色谱峰（S）作为参照峰，用以计算各峰的相对保留时间和相对峰面积比值。　　图1芒果苷对照品色谱图（略）　　图2芒果叶药

5、材HPLC色谱图（略）　　3结果　　3.1方法学考察　　3.1.1精密度试验取同一芒果叶供试品溶液，连续进样5次，考察仪器的精密度。结果表明，主要共有峰1～7号峰相对保留时间的RSD为0.03～0.14%，相对峰面积的RSD为0.31%～1.84%，说明仪器精密度良好。　　3.1.2稳定性试验取同一芒果叶供试品溶液,在0，2，6，12，24h连续进样5次，检测色谱图，测定主要共有峰的相对保留时间和相对峰面积，结果主要共有峰1～7号峰相对保留时间的RSD为0.07%～0.38％，相对峰面积的RSD为0.6

6、0%～2.56％，结果表明：供试品溶液常温下0～24h之间可保持稳定,并且仪器精密度和稳定性很好。　　3.1.3重现性试验取同一批号的芒果叶样品5份，分别按供试品溶液制备方法制备供试品溶液,并分别测定其色谱图，结果其相对保留时间稳定，主要共有峰1～7号峰相对保留时间的RSD为0.05%～0.12％，相对峰面积的RSD为1.88%～2.20％，符合指纹图谱要求(RSD≤3％)。说明本方法重现性较好。　　3.2样品测定分别取不同品种芒果叶叶肉和叶脉，按“2.5”项制成供试品溶液，精密吸取各供试品溶液10μl

7、，注入液相色谱仪，在相同色谱条件下采集60min色谱图。色谱图见图3～8。　　3.3结果分析　　3.3.1由于各样品HPLC图谱中单峰面积大于总峰面积10%的色谱峰数目只有1～3个，为了能有较多的信息说明实验结果，本实验对大于总峰面积1%的峰都进行了分析说明，测得的样品HPLC指纹图谱共有6张，发现有7个共有色谱峰，各样品HPLC指纹图谱共有峰的相对保留时间见表1。每个样品的指纹图谱均可分为3个部分：（1）保留时间0～5min，有3个共有峰及一些不能分离的小杂峰；（2）保留时间5～30min，为特征峰区

8、，有3个共有峰，各个样品特征峰数目、峰面积及保留时间均存在较大差异；（3）保留时间30～60min，有1个共有峰，且峰强度很强，其余部分为不能分离的小杂蜂，但从其整体上看有较强的特征性。　　表16份芒果叶样品HPLC指纹图谱的各主要共有峰的相对保留时间（略）　　3.3.2红象牙叶肉与叶脉的HPLC指纹图谱比较从图可知，两者HPLC指纹图谱差异明显，见图3～4，两者在峰数目、峰形及各主要共有峰峰面积比值（见表2）差别显著。经对比发现，叶肉的4