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时间:2018-05-03
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1、江苏连钱草高效液相色谱指纹图谱研究作者:朱玲英,钱大玮,段金廒,钱士辉【摘要】 目的研究建立连钱草高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法,为其质量控制和药材鉴别提供依据。方法利用高效液相色谱法,采用反相SymmetryC18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈和0.4%磷酸溶液(梯度洗脱);检测波长327nm;柱温30℃;流速1.0ml/min。进样体积20μl。结果在选定的色谱条件下确定18个峰构成连钱草药材的指纹特征,各批次药材均具有上述特征,但特征峰的相对含量分布差异导致色谱概貌存
2、在一定差异。确定了连钱草药材HPLC中绿原酸、木犀草素二个黄酮成分所对应的保留时间一致;10个批次的连钱草药材HPLC指纹图谱相似度均大于0.93。结论该方法准确、简单、稳定,其色谱指纹图谱可用于连钱草的鉴别和质量控制。【关键词】 Abstract:ObjectiveToestablishanHPLCfingerprintofHerbaGlechomae.MethodsTheHPLCmethodatographyconditionsmetryC18column(250mm×4.6mm,5μm)obile
3、phaseofacetonitrile--0.4%phosphoricaciddihydrogenphosphatesolutionofandcolumntemperaturel/min;theinjectionvolumeatographycondition,Eighteenpeaksae.AllsamplestestedcontainedthesameEIghteenpeaks,butthecontentofeachpeakshoongthesamples,atograms.Theretentiont
4、imeofCaffeotannicacidandluteolininHerbaGlechomaeined.Thefingerprintshoilarityinsamplesfromdifferenthabitats.ConclusionThemethodisexact,simpleandaccurate,andcanbeusedfortheidentificationandqualitycontrolofHerbaGlechomae. Keyae;Fingerprint;HPLC 连钱草为唇形科活血丹
5、属植物活血丹Glechomalongituba(NaKai)Kupr.的干燥地上部分,为《中国药典》(2005年版)Ⅰ部收载品种。该植物除西北部地区外,我国大部分地区有分布,尤以江苏产量大,质量优,为江苏产地道药材。因其具有利湿通淋、清热解毒、散淤消肿之功效,用于热淋、石淋、湿热黄疸等疾病的治疗[1],习称为“苏金钱”“金钱草”,入药配方或作为中药制药的原料。 3.2精密度实验精密称取连钱草1号样品细粉2.5g,按供试品溶液制备方法制得供试品溶液,连续重复进样6次,记录指纹图谱。考察各共有峰相对保留时间
6、及相对峰面积比值的一致性,结果显示各共有峰相对保留时间RSD为0.01%~0.35%,相对峰面积的RSD为0.36%~2.49%,符合指纹图谱研究技术的要求[5]。 3.3重复性实验精密称取连钱草2号样品细粉6份,按供试品溶液制备方法制得供试品溶液,进行测定,考察各共有峰相对保留时间及相对峰面积比值的一致性,各共有峰相对保留时间的RSD为0.01%~0.14%,相对峰面积的RSD为0.28%~2.83%,符合指纹图谱研究技术的要求[6]。 3.4样品指纹图谱测定分别取不同批次连钱草样品10个,按供试品
7、溶液的制备方法获得供试溶液,测定,通过10批连钱草样品的指纹图谱的测定,比较其色谱图,确定共有峰18个,相对保留时间、相对峰面积见表1~2。色谱图结果见图1~2(峰4为绿原酸峰,15号峰为木犀草素)。 表1样品相对保留时间(略) 表2样品相对峰面积(略) 图1连钱草样品HPLC指纹图谱(略) 图210批连钱草药材指纹图谱(略) 3.5相似度计算运用国家药典委员会开发的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版对10批连钱草药材的指纹图谱进行相似度分析,首先将色谱工作站数据导入中药指纹图谱相似度计
8、算软件,选定上述18个特征峰进行谱峰匹配,通过中位数矢量计算得出连钱草样品指纹图谱的共有模式,并以此共有模式为标准,进行整体相似度评价,相似度评价结果均大于0.92,说明这10批连钱草药材的化学成分一致性较好。结果见表3。 表3样品指纹图谱相似度分析结果(略) 4讨论 4.1提取溶剂与提取方法的选择在供试品溶液制备条件选择上,脱脂溶剂曾采用乙醚、氯仿、等溶剂进行脱脂,以乙醚溶液脱脂效果较好,在提取溶剂选择上,比较了甲醇、
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