聪灵胶囊对血管性痴呆模型大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶的影响

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1、聪灵胶囊对血管性痴呆模型大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶的影响作者：黄新武，李国春，李华，秦大莲，肖顺汉，李作孝【摘要】目的观察聪灵胶囊对血管性痴呆模型大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶（AchE）的影响，分析聪灵胶囊改善血管性痴呆学习记忆能力的作用机制。方法采用永久性结扎双侧颈总动脉法复制大鼠血管性痴呆模型，聪灵胶囊大、中、小3个剂量组灌胃给药30d观察学习记忆能力后，测定脑组织AchE活性。结果聪灵胶囊大剂量组可改善AchE活性，与模型组比较显著性降低。结论聪灵胶囊可通过改善AchE活性，从而改善血管性痴呆学习记忆能力。【关键词】聪灵胶囊；血管性痴呆；乙酰胆碱酯酶Abstract：Objective

2、TostudytheeffectofConglingCapsule（CLC）onacetylcholinesterase(AchE)activityaftercerebralischemiainrats.MethodsTheanimalmodelofvosenlardementia(VD)anentocclusionofbilateralmoncarotidarteriesofrats.Three-differentdosesofthedrugentalratsfor30days,respectively.ChangesoftheactivityofAchEincortexandh

3、ippocampuseansofspectrophotometry.ResultsCLCcouldreduceAchEactivityincortexandhippocampus.ConclusionCLCcanimprovetheabilityoflearningandmemoryofratsoducetingtheactivityofAchE.Keyia；Acetylcholinesterase(AchE)聪灵胶囊（CongLingCapsule，CLC）以川芎、石菖蒲、远志等作为协定处方，采用先进工艺制成胶囊。全方合用，共奏补益肝肾、祛痰化瘀、安神强志的作用。临床上主要用于血

4、管性痴呆的治疗。本实验采用永久性结扎双侧颈总动脉法复制大鼠血管性痴呆模型，采用Morris水迷宫法观察聪灵胶囊对模型大鼠有较好改善学习记忆的作用［1］，说明该药对血管性痴呆大鼠有有效治疗作用。与此同时，观察了该药对AchE(乙酰胆碱酯酶)活性，探讨聪灵胶囊改善学习记忆能力的作用机制，现报道如下。1材料与仪器1.1动物12～24月龄健康SD大鼠，雌雄各半，体重280～320g。动物由泸州医学院实验动物科提供，为1级合格动物，动物合格证号：2401115。1.2药品与试剂聪灵胶囊，将原药通过水蒸气蒸法、以纯渗滤法提取有效物质经浓缩而成，0.4g/粒，每克粉末相当于原生药16g，由泸州医

5、学院附属医院提供；喜得镇，由天津华津制药厂与北京诺华制药厂合作生产，批号：031057。乙酰胆碱酯酶（AchE）测定试剂盒，考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒，均由南京建成生物工程研究所提供。1.3仪器400R低温离心机，德国Heraeus产品；722分光光度计，上海精密仪器有限公司仪器总厂生产。2方法2.1分组给药将大鼠数只，以Morris水迷宫实验筛选学习记忆良好的大鼠，随机分为6组：CLC大剂量组0.8g/kg，中剂量组0.4g/kg，小剂量组0.2g/kg，阳性对照组喜得镇4×10－4g/kg，模型组及假手术组。模型组18只，各用药组每组15只,假手术组12只。CLC大、中、小剂量分

6、别相当于成人用量的10，5，2.5倍剂量。造模第2天开始连续灌胃等容积给药30d，给药容积均为1ml/100g，模型组和假手术组给生理盐水。除死亡的动物，最后每组10只大鼠进行实验。2.2模型制备采用永久性结扎双侧颈总动脉法［2］复制血管性痴呆模型大鼠。用1%戊巴比妥钠（3ml/kg体重）腹腔注射麻醉大鼠，取颈正中切口，分离双侧颈总动脉并结扎，缝合伤口。假手术对照组除不结扎双侧颈总动脉外，其余处理与永久性结扎双侧颈总动脉组相同。术后注射青霉素(1600U/100g)和庆大霉素(800U/100g)预防感染。2.3标本收集给药30d后，处死大鼠，断头取脑，分离皮质和海马，各取0.5g

7、组织，加入5ml生理盐水中，置于冰块内碾磨，分别制备10％组织匀浆，低温离心机离心(3000r／min，离心10min),取上清液置-20℃冰箱保存待测。2.4指标的检测［3］皮质和海马AchE活性测定采用化学比色法；皮质和海马蛋白质含量测定采用考马斯亮蓝法（用于计算组织中指标含量）。具体操作按试剂盒说明书进行。2.5统计方法实验结果以±S表示，进行单因素方差分析，组间两两比较，采用SNK法，由SPSS11.0软件完成。3结果实验结果显示，模型组AchE显著性升高，与