聪灵胶囊对血管性痴呆模型大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶的影响论文

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1、聪灵胶囊对血管性痴呆模型大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶的影响论文黄新武，李国春，李华，秦大莲，肖顺汉，李作孝【摘要】目的观察聪灵胶囊对血管性痴呆模型大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶（AchE）的影响，分析聪灵胶囊改善血管性痴呆学习记忆能力的作用机制。方法采用永久性结扎双侧颈总动脉法复制大鼠血管性痴呆模型，聪灵胶囊大、中、小3个剂量组灌胃给药30d观察学习记忆能力后.freeliainrats.MethodsTheanimalmodelofvosenlardementia(VD)anentocclusionofbilateralmoncarotidarteriesofrats.Three-differe

2、ntdosesofthedrugentalratsfor30days,respectively.ChangesoftheactivityofAchEincortexandhippocampuseansofspectrophotometry.ResultsCLCcouldreduceAchEactivityincortexandhippocampus.ConclusionCLCcanimprovetheabilityoflearningandmemoryofratsoducetingtheactivityofAchE.Keyia；Acetylcholinesterase(AchE)聪灵

3、胶囊（CongLingCapsule，CLC）以川芎、石菖蒲、远志等作为协定处方，采用先进工艺制成胶囊。全方合用，共奏补益肝肾、祛痰化瘀、安神强志的作用。临床上主要用于血管性痴呆的治疗。本实验采用永久性结扎双侧颈总动脉法复制大鼠血管性痴呆模型，采用Morris水迷宫法观察聪灵胶囊对模型大鼠有较好改善学习记忆的作用［1］，说明该药对血管性痴呆大鼠有有效治疗作用。与此同时，观察了该药对AchE(乙酰胆碱酯酶)活性，探讨聪灵胶囊改善学习记忆能力的作用机制，现报道如下。1材料与仪器1.1动物12～24月龄健康SD大鼠，雌雄各半，体重280～320g。动物由泸州医学院实验动物科提供，为1级合格

4、动物，动物合格证号：2401115。1.2药品与试剂聪灵胶囊，将原药通过水蒸气蒸法、以纯渗滤法提取有效物质经浓缩而成，0.4g/粒，每克粉末相当于原生药16g，由泸州医学院附属医院提供；喜得镇，由天津华津制药厂与北京诺华制药厂合作生产，批号：031057。乙酰胆碱酯酶（AchE）测定试剂盒，考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒，均由南京建成生物工程研究所提供。1.3仪器400R低温离心机，德国Heraeus产品；722分光光度计，上海精密仪器有限公司仪器总厂生产。2方法2.1分组给药将大鼠数只，以Morris水迷宫实验筛选学习记忆良好的大鼠，随机分为6组：CLC大剂量组0.8g/kg，中剂量组0

5、.4g/kg，小剂量组0.2g/kg，阳性对照组喜得镇4×10－4g/kg，模型组及假手术组。模型组18只，各用药组每组15只,假手术组12只。CLC大、中、小剂量分别相当于成人用量的10，5，2.5倍剂量。造模第2天开始连续灌胃等容积给药30d，给药容积均为1ml/100g，模型组和假手术组给生理盐水。除死亡的动物，最后每组10只大鼠进行实验。2.2模型制备采用永久性结扎双侧颈总动脉法［2］复制血管性痴呆模型大鼠。用1%戊巴比妥钠（3ml/kg体重）腹腔注射麻醉大鼠，取颈正中切口，分离双侧颈总动脉并结扎，缝合伤口。假手术对照组除不结扎双侧颈总动脉外，其余处理与永久性结扎双侧颈总动脉

6、组相同。术后注射青霉素(1600U/100g)和庆大霉素(800U/100g)预防感染。2.3标本收集给药30d后，处死大鼠，断头取脑，分离皮质和海马，各取0.5g组织，加入5ml生理盐水中，置于冰块内碾磨，分别制备10％组织匀浆，低温离心机离心(3000r／min，离心10min),取上清液置-20℃冰箱保存待测。2.4指标的检测［3］皮质和海马AchE活性测定采用化学比色法；皮质和海马蛋白质含量测定采用考马斯亮蓝法（用于计算组织中指标含量）。具体操作按试剂盒说明书进行。2.5统计方法实验结果以±S表示，进行单因素方差分析，组间两两比较，采用SNK法，由SPSS11.0软件完成。3

7、结果实验结果显示，模型组AchE显著性升高，与假手术组比较有统计学意义（P0.05或P0.01），聪灵胶囊高剂量组及阳性对照组有明显改善作用，与模型组比较显著性降低（P0.05）；聪灵胶囊中、低剂量组无显著性差异（P0.05）。见表1。表1聪灵胶囊对大鼠大脑AchE的影响与模型组比较，*P0.05,**P0.01；n=104讨论血管性痴呆(vasculardementia,VD)是由一系列脑血管因素（缺血或出血及急慢性缺氧性脑血管病）导致脑组织损害而引起的