大孔树脂吸附分离纯化玉屏风复方中色原酮苷的研究论文

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1、大孔树脂吸附分离纯化玉屏风复方中色原酮苷的研究论文杨克迪，葛利，李宏，唐文，龙云飞【摘要】目的大孔树脂吸附分离纯化玉屏风复方提取物中色原酮苷成分。方法采用静态吸附实验考察D101，AB8，S8，X5等7种大孔吸附树脂对升麻苷和5O甲基维斯阿米醇苷两种色原酮苷的吸附效果.freeloneglycosidefromtheextractofYupingfengacroporousresinabsorption.MethodsTheresinsuitableforseparationofchrom

2、oneglycosideinedbystaticabsorptionexperimentonsevendifferentkindsofresins,andfurthermore,theabsorptionandelutionofchromoneglycosideontheselectedresinent.ResultsTheAB-8resinoneglycoside.TheexperimentresultsshooneglycosideintheextractofYupingfengincrease

3、dfrom0.55%to10.01%entofchromoneglycosideinextractofYupingfeng.Keyoneglycoside；Macroporousresinabsorption；Separationandpurification玉屏风复方是中医用于扶正的经典名方，由黄芪、白术、防风3味药材组成，升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷等色原酮苷是玉屏风主要活性成分之一［1］。目前，玉屏风制剂生产中，很少对玉屏风提取物中色原酮苷、皂苷等活性成分富集、纯化，制剂中活性成分含量较低

4、。大孔树脂吸附分离技术可有效富集中药活性部位，是提高中药制剂水平的一种有效方法［2～4］。本实验探讨了玉屏风提取物中升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷两种色原酮苷的大孔树脂吸附分离，旨在为玉屏风制剂的生产和改进提供一定参考。1仪器和试药Agilent1100高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；B-688恒流泵(瑞士Buchi公司)；LABOROTA4000旋转蒸发器(德国Heidolph公司)；THZ-82恒温震荡器（江苏太仓华美生化仪器厂）。黄芪（批号20051101）、防风（批号200503

5、01）、白术（批号20041129），购于广西一心药业公司，经鉴定符合2005年版《中国药典》(Ⅰ部)相关项下规定；升麻苷（批号0781-20011）及5-O-甲基维斯阿米醇苷（批号1523-200203）对照品（中国药品生物制品检定所）；D101，AB-8，S-8，NKA-9，D3520，D4020，X-5大孔树脂购于南开大学化工厂；精制玉屏风复方提取物（色原酮苷含量为9.4%），自制。2方法2.1升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷HPLC分析色谱条件为ZorbaxSB-C18色谱柱(4.6mm×1

6、50mm，5μm)，柱温30℃，以甲醇∶水=40∶60（V/V）为流动相，流速1ml·min-1，检测波长254nm。2.2树脂静态吸附与解吸分别称取预处理好的D101，AB-8，S-8等湿树脂各0.5g置于50ml锥型瓶中，加入色原酮苷（升麻苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷）含量已知的玉屏风提取物溶液20ml，在振荡器中以150r·min-1的转速、30℃下振摇12h。测定吸附平衡后溶液中色原酮苷的含量，计算树脂的平衡吸附量。称取色原酮苷吸附量已知的树脂置于50ml的锥形瓶中，加入95%的乙醇溶液20

7、ml，在振荡器上以150r·min-1的转速,30℃下振摇12h，计算色原酮苷解吸率。2.3固定床吸附分离筛选出的树脂湿法装于Φ1.0cm×20cm吸附柱中，树脂高度10cm，取色原酮苷含量已知的料液以一定流速连续流过树脂柱，每20ml分段接收流出液，分析流出液中色原酮苷的含量。固定床吸附结束后，以4倍床层体积去离子水洗柱，然后用洗脱剂连续洗脱。3结果与讨论3.1树脂筛选表1为不同型号树脂在实验考察条件下对色原酮苷的吸附和解吸效果。D101，AB-8及X-5等树脂对色原酮苷均有一定吸附能力；AB-8

8、和X-5树脂的解吸效果较好。综合考虑树脂的吸附能力及解析效果，AB-8树脂较适宜于玉屏风提取物中色原酮苷的吸附分离。表1不同型号树脂对色原酮苷的吸附效果（略）3.2色原酮苷在AB-8树脂上的等温吸附行为图1为玉屏风提取液中色原酮苷在AB-8树脂上的等温吸附行为，降低温度有利于色原酮苷的吸附。对等温吸附数据进行拟合分析，溶液中色原酮苷浓度较低时，其吸附行为较符合Langmuir单分子层吸附模型，吸附速率较快，2h内基本达到平衡（见图2）；当提取物溶液中色原酮苷含量相对较