小檗碱抑制兔胆固醇结石形成的作用和机制

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1、小檗碱抑制兔胆固醇结石形成的作用和机制作者：王江华　陈先祥　蔡庆和　程彩涛　何志军　吴黎明【摘要】　　目的观察小檗碱对兔胆囊胆固醇结石形成的预防作用和机制。方法动物模型：日本大耳白兔30只，随机等分三组：每组10只，对照组喂普通饮食；结石组，喂含1.2%高胆固醇饲料100g；实验组，同时喂饲含1.2%高胆固醇饲料100g和每日10mg/kg的小檗碱灌胃。8周后利用全自动生化分析仪酶法测定兔胆汁中的总胆固醇、磷脂、胆盐，通过Carey表计算胆固醇饱和指数(cholesterolsaturationindex，CSI)，观

2、察各组胆囊胆汁结晶情况及环氧合酶-2(cyclooxygenase2，COX2)含量。结果实验组比成石组形成胆固醇结晶机会明显减少(8／10、3／10，?字2=5.051，P<0.05)；各组胆囊胆汁中CSI(对照组0.82±0.23、结石组1.64±0.27及实验组1.13±0.29)；结石组COX2表达与空白组相比明显升高(47.66±1.54比28.39±1.46，P<0．05)，实验组较之结石组COX2表达量有降低(37.42±2.45比47.66±1.54，P<0.05)。结论小檗碱能够抑制

3、胆固醇结石形成和发展，其机制与调节脂质代谢，改善致石性胆汁及抑制COX2的活性等作用有关。【关键词】胆固醇结石；盐酸小檗碱；环氧合酶-2；兔　　InhibitoryeffectsofberberineontheformationofcholesterolgallstoneanditsmechanisminrabbitsAbstractObjectiveToinvestigateandobservetheinhibitoryeffectsofberberineontheformationofexperimentalgal

4、lstoneandexploreitspossiblemechanism．MethodsThreedietarygroupsofJapaneserabbitsaldiet），lithogenic(fedg/kg/day)groupsrespectivelyfor8ation，andthemorphologicchangesofthemucosaicroscope.ThelevelofCOX2ingallbladdermucosaineachgroupatedmunohistochemicalassay.ResultsT

5、heopportunityoftheformationofthecholesterolcrystallintheberberinegroupgallstone(3/10vs8/10，P<0.05).CSIineachgroupucosalinflammationandlevelofCOX2expressionationanddevelopmentofcholesterolgallstone．Itsmechanismisrelatedtotheadjustmentoflipidmetabolism,improvem

6、entoflithogenicbileandinhibitionoftheactivityofCOX-2.Keyan公司)，链霉素抗生素蛋白-过氧化酶免疫组化试剂盒（中杉公司），胆固醇(厦门星隆达化学试剂有限公司)G5370。1.2动物模型健康SPF日本大耳白兔(30只)，体质量为2.00～2.50kg，雌雄各半，武汉大学医学部实验动物中心提供：合格证号SCXK（鄂）2003-0005。普通颗粒饲料喂养1周后，随机分为3组:①对照组：每日喂普通颗粒饲料100g。②结石组：每日喂含1.2%高胆固醇饲料100g。③实验组：

7、每日灌胃小檗碱10mg/kg，喂含1.2%高胆固醇饲料100g。单笼饲养，饮水不限。8周后禁食12h，戊巴比妥(30mg/kg剂量)耳缘静脉注射麻醉，开腹，收集胆汁观察结晶情况，胆囊组织固定于10％甲醛液内待行病理和免疫组化检查。1.3观测指标及检测方法1.3.1胆汁结晶①取新鲜胆汁滴在载玻片上偏振光显微镜下观察胆固醇结晶。②肉眼观察胆汁内有无>1mm、成形粗大的泥沙样颗粒形成。1.3.2胆脂测定胆汁中的总胆固醇、磷脂、胆汁酸在7170A全自动生化分析仪上测定。胆固醇饱和指数通过Carey表计算[3]。1.3.3

8、免疫细胞化学检测COX2蛋白表达采用SP法，详细步骤按试剂盒说明进行。采用计算机图像分析系统测算阳性细胞的面积（％），用此间接反映COX2蛋白的表达量。1.3.4统计学方法所有数据均采用SPSS13.0统计软件分析，胆汁结晶情况以分数表示，行χ2检验；胆囊黏膜COX2表达量以x±s表示，组间均数比较进行单因素方差分析，P<0