兔脑出血模型的建立及其方法比较

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1、兔脑出血模型的建立及其方法比较【摘要】目的建立稳定、可靠、重复性好的兔脑内血肿模型。方法利用兔不抗凝自身血注入脑基底节区形成血肿。通过高磁场强MR序列评价两种注射法（缓慢匀速注射法和快速注射法）的差异。并通过神经功能缺损评分判断血肿对机体的影响。结果MR显示缓慢匀速注射法可形成较稳定、形态规则的血肿，与快速注射法形成血肿大小比较差异有显著性（P<0.01）。神经功能评分可见缓慢匀速注射组得分(10.08±3.23)、快速注射组(15.32±2.48)，对照组未见明显神经功能异常，前两者差异有显著性（P<0.05）。

2、结论利用缓慢匀速注射法、不抗凝自身血注入兔脑基底节区可形成稳定、可靠、重复性好的脑内血肿模型。【关键词】兔脑内血肿磁共振动物实验　　【Abstract】ObjectiveTomakeareproduciblehemorrhagemodelinrabbitsbyinjectingautologousbloodsloethodsbyhighfieldMRscanning.Theneurologicdeficitscoreulaintracerebralhemorrhageingentlyinjection.Statisticssh

3、oorrhagecouldbemadeorrhagemagicresonanceimaginganimalexperiment　　临床上脑出血的发病率及病死率均较高，对其研究也在不断深入。脑出血除了占位效应外，血肿引起的脑水肿及继发性损伤已受到重视［１］。因此，建立稳定可靠、重复性好的脑内出血动物模型将对临床、病理研究及影像学诊断提供很大帮助。作者介绍家兔自身血缓慢匀速注射法及快速注射法制作脑出血模型，并对两种方法进行比较。　　1材料与方法　　1.1实验动物及分组　　2003年12月至2005年2月采用体重2000～2500g

4、健康家兔30只（浙江大学医学院实验动物中心提供）。随机分成三组，每组10只。分为缓慢匀速注射组、快速注射组及对照组。　　1.2模型制作方法　　(1)动物麻醉及穿刺定位：常温下给予家兔2.5％戊巴比妥钠，经耳缘静脉注射麻醉。麻醉成功后动物浅感觉消失，呼吸平稳。将动物固定于立体定向仪上（江湾Ⅱ型）。颅顶部脱毛、消毒。取兔眶上切迹后方11mm水平、正中矢状线旁开4.5mm处作为基底节区穿刺点。切开皮肤分离至骨膜，颅骨钻孔。(2)穿刺、注血：①缓慢匀速注血法：用1ml针筒在兔耳正中动脉抽血共500μl（不抗凝），立即经颅顶钻孔垂直穿刺

5、入基底节区，深度11mm。穿刺到位后2min内缓慢匀速注入250μl自体血至基底节区形成血肿，注射完成后保留穿刺针8min，以防止血液自针道反流。②快速注血法：穿刺到位后快速（半分钟以内）注入自体血以形成脑内血肿，注射完成后保留穿刺针8min，以防止血液自针道反流。③对照组：第1组5只动物只钻孔不穿刺；第2组5只动物只穿刺，但不注血。　　1.3MR扫描并测量血肿大小　　采用GESignaHorizonLX1.5T超导型磁共振机，相控振头线圈。扫描序列：T1aging(T1R扫描后放血处死，取脑固定于9％甲醛24h，以针道为中心

6、，2mm层厚切片。常规石蜡包埋、HE染色。　　1.6统计学处理　　采用SPSS10.0软件，采用方差分析比较两种注射法血肿大小，采用t检验分析两组兔神经功能评分差异。　　2结果　　2.1MR各序列扫描　　MR各序列扫描（图1）：T2*RI信号改变，其次胶原酶可能对炎性细胞有诱导作用，会影响脑血肿对周围组织损伤程度的评估。Nahls［３］等用头端带气囊的导管置入基底节制造血肿，此方法只能观察血肿占位效应，不能了解血肿周围环境变化及由于血肿本身引起的周围脑组织损伤。家兔凝血功能很强，凝血时间约5min，利用其自身血很容易形成局部血

7、肿。本研究利用家兔自身血注入形成脑内血肿，并比较了两种注射方法所形成血肿大小、形态的差异。其中缓慢匀速注射法较快速注射法形成血肿成功率高，且所导致的神经功能障碍症状较重，注射于基底节区也较符合人类脑内出血好发部位。利用高磁场强MR扫描评价脑内出血敏感性较高，如T2*R下观察，可以制作成稳定的脑内血肿动物模型。【参考