大黄虫丸抗实验性肝纤维化的功效组分研究

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1、大黄虫丸抗实验性肝纤维化的功效组分研究作者：赖景绍，蔡红兵，陈文倩，刘强，陈育尧，吕志平【摘要】目的观察大黄虫丸各功效组分对大鼠实验性肝纤维化的作用。方法建立肝纤维化大鼠模型。全自动生化分析仪测定ALT、AST、TP、ALB，放免法测定HA、LN、CⅣ、PCⅢ，光镜下观察肝组织形态学及胶原纤维增生情况。结果各功效组分均能一定程度上改善肝功能及降低肝纤维化血清指标（P<0.01或P<0.05），光镜下可见各药物组肝纤维化程度与模型组相比差异显著（P<0.05）。其中活血化淤组在降低ALT、AST及肝纤维血

2、清指标方面效果较好，而滋阴养血组能更有效地升高TP及ALB。结论大黄虫丸各功效组分均有一定的抗肝纤维化作用，其中活血化淤组作用更为明显。【关键词】肝纤维化；大黄虫丸；肝功能；病理　　Abstract：ObjectiveToobservetheeffectsofdividedfunctionofDahuangZhechongPill(DR-DZP)onexperimentalhepaticfibrosisinrats.MethodsInratsentalhepaticfibrosis,automaticbiochemica

3、lanalyzermunoassayicroscopeodelcontrol,alltheDR-DZPcouldimprovetheliverfunction,reduceserummarkersofliverfibrosis(P<0.01orP<0.05),andevidentlylomarkersofliverfiber,andthegroupofZiyinyangxueoreeffectiveinelevatingTPandALB.ConclusionAlltheDR-DZPcanimprovethel

4、iverfunctionandreduceserummarkersofliverfibrosis,amongthem,Huexuehuayugroupismoreeffective.　　Keypus公司）；超薄石蜡切片机（瑞典LKB公司)。　　2方法　　2.1分组、模型制备及药物干预58只大鼠随机分为6组：正常组、模型组、大黄虫丸全方组、活血化淤组、清热润燥组、滋阴养血组，正常组8只，其余每组10只。用生理盐水将DMN稀释为0.5%DMN溶液（体积比），模型组及各药物组大鼠以10mg/(kg·d)0.5%DMN溶液腹腔注

5、射，每周连续3d，共4周［8］。造模的第1天开始灌胃给药（正常组与模型组除外），大黄虫丸全方组每日给药剂量为4.4g/kg、活血化淤组1.1g/kg、清热润燥组1.6g/kg、滋阴养血组1.7g/kg（根据动物与人体表面积比值推算出动物的给药剂量），连续灌胃28d。在整个实验过程中，以普通饲料喂养大鼠，自由饮用自来水。　　2.2指标检测实验期满后，动物禁食不禁水12h，用10%水合氯醛腹腔麻醉，腹主动脉采血，真空负压采血管收集，室温静置1.5h，2500r/min离心15min，取上层血清，分装于离心管中，用AU5400

6、全自动生化分析仪测定血清谷草转氨酶(ALT)、谷丙转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)，试剂盒为南京建成生物工程公司产品；放免法测定血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅲ前胶原(PCⅢ)，试剂盒来自上海海研生物医学技术有限公司（均按试剂说明书进行）。　　2.3病理学观察大鼠予10%水合氯醛腹腔麻醉后，仰卧位固定，打开腹腔，取1.0cm×0.8cm×0.3cm大小肝组织，40g/L中性甲醛液固定，24h后逐级酒精脱水，二甲苯透明，56℃石蜡包埋，4μm厚切片，制成切片分别用于进行苏木素-

7、伊红（HE）及Mallory染色，光镜下观察肝组织形态学及胶原纤维增生情况。肝纤维化程度分级参考［9］：0级，肝组织正常，无胶原纤维增生；Ⅰ级，胶原纤维在汇管区或中央静脉周围轻度增多；Ⅱ级，中央静脉区胶原纤维间隔形成；Ⅲ级，中央静脉到中央静脉或中央静脉到汇管区纤维间隔形成或相连接；Ⅳ级，多数纤维间隔形成，分隔肝实质并形成假小叶，假小叶中央时见汇管区。　　2.4统计学分析利用SPSS13.0统计软件，对计量资料采用单向方差分析（one-es-Ho.　　3.3肝纤维化指标(血清中HA，LN，CIV，PCⅢ)的变化　　与正常组

8、相比，模型组动物血清中的HA，LN，CIV，PCⅢ显著升高(P<0.01)；与模型组相比，大黄虫丸全方及各分组的HA，LN，CIV，PCⅢ均有所下降，其中大黄虫丸全方及活血化瘀组的HA，LN，PCⅢ，CIV下降更为明显，与模型组差异更大（P<0.01)，而清热润燥组及滋阴养血组HA、CIV显著下降（P&l