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时间:2018-11-18
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1、种曲质量观察1取培养成熟种曲于光线较强处观察菌丝生长情况和孢子色泽。2取少量种曲闻是否有曲香。3取种曲掰开看内部是否有夹生或白心现象。4观察整批种曲,观察是否有与种曲菌丝孢子色泽不吻合的其他杂菌存在,记录形态大小特征色泽。检查记录每批种曲感官质量。种曲记录培养时间、温度、配料记录、翻曲记录。化验检测水分、孢子数、孢子发芽率。种曲孢子数不足或者孢子繁殖力差,易造成污染。曲料含水高,培养温度高,湿度大,氧气供给不适都易造成污染。种曲培养中温度超过37℃易生水毛(毛霉),低于28℃易染青霉,青霉在较低温度下容易繁殖,菌从绿色,大量繁殖后产生霉臭气味。制曲主要污染的细菌为小球菌,该菌好气
2、。繁殖速度较霉菌酵母快。枯草芽孢杆菌,耐热,污染后会造成曲子发粘,严重时有异臭,产生氨味。种曲外观:外观无杂菌,孢子整齐旺盛,无夹心,无青霉及其他异色,孢子数达到30亿/克以上,发芽率在90%以上,杂菌8千万/克以下。种曲外观:外观无杂菌,孢子整齐旺盛,无夹心,无青霉及其他异色,孢子数达到30亿/克以上,发芽率在90%以上,杂菌8千万/克以下。水分少则孢子少而瘦弱。白曲麦芽汁培养基,菌从为肉桂色,菌丝无色,孢子球形,发育适温32--35℃,有生酸能力。生产菌种性能衰退、退化检查霉菌菌丝不健壮,产孢子数减少,生产性能减弱,菌落颜色变深,斜面试管生长缓慢,菌落形态改变。制曲培养时曲料
3、发硬红曲霉色度降低。白曲颜色变深。酵母菌出芽缓慢,或不出芽而形成孢子。酵母菌落正常光环湿润,退化后出现褶皱型,菌落变小。显微镜出芽不规则,细胞形态不规则。菌种退化最易观察菌落和细胞形态改变。培养基的配制与灭菌一、器皿的清洗1新玻璃器皿含有游离碱,一般先将其在2%盐酸溶液中浸泡数小时,再用水清洗干净,也可将器皿先用热水浸泡,再用去污粉或肥皂粉刷洗,再经热水洗刷,自来水清洗。2用过的玻璃器皿,若盛有废弃物,先经高压灭菌后清洗,对只带有细菌标本或培养物的器皿,用过后应立即将其浸泡于2%来苏水中经24小时再取出清洗。对于普通培养基必须煮沸30分钟后在清洗。用蜡封口的试管先高压蒸汽灭菌,然
4、后取出趁热拔去粘有蜡的棉塞,立即倒去培养物,再将试管放入温水稍加洗刷后放入5%肥皂水内煮沸5分钟去除油污后清洗。加过消泡剂或者做过通气培养的大三角瓶,一般将倒空的瓶子用碱粉或10%火碱水刷洗后再用水洗。管壁上粘有培养物,用试管刷难以去除,可以铁丝绑上纱布,润湿后沾去污粉擦洗。吸过菌液的吸管,用完后应放在5%石炭酸溶液内消毒,未吸过菌液的吸管用后放于清水中防止干燥。吸过带油液体的吸管应先在10%氢氧化钠溶液中浸泡半小时,去掉油污再清洗。培养基的制备大致过程配料—溶解—校正PH—加凝固剂—融化—过滤—分装—加棉塞—包扎—灭菌—无菌检查1溶解配料制备培养基先在烧杯中加入所需水量的一半,
5、按配方称取各种材料依次加入水中,逐个溶解,最后加足水量。在加料过程中,各种成分溶解的次序先加缓冲化合物—主要元素—微量元素—维生素等2调PH配料溶解完毕,冷却到室温,再加入酸或者碱。要缓慢少量,多加搅拌,防止局部过酸过碱而破坏营养成分,常用10%氢氧化钠和6摩尔/升盐酸调PH3配置固体培养基时,需加入琼脂或者明胶等凝固剂。若以琼脂为凝固剂,将琼脂加入煮沸的培养基中,不断搅拌至溶化,最后补足蒸发的水分。4过滤,在两层纱布中加脱脂棉,趁热过滤。5分装,装入试管的固体培养基不易超过试管高度的1/5。装入三角瓶中的液体培养基不超过总体积的一半。切勿使培养基沾污试管口和瓶口。6包扎做通气培
6、养可用6—8层纱布代替棉塞。7灭菌固体试管培养基斜面长度不超过试管一半。8无菌检查将培养基放入培养箱做培养做无菌检查。固体试管应烘干试管内壁的水分。培养基灭菌方法液体及琼脂固体培养基。一般121℃灭菌20分钟,若容器大,粘度大,培养基多应延长时间。明胶培养基112℃灭菌25分钟,最高温度不应超过112℃,否则明胶凝固能力消失。马铃薯培养基因含有抵抗能力很强的马铃薯杆菌,121℃灭菌30分钟。培养基灭菌时会发生各种变化,只有极少数培养基对热完全稳定。大多数糖类灭菌都发生改变,可能形成对微生物有毒害的物质,含糖高的培养基灭菌后颜色变深。培养基蛋白质含量越高,杀菌速度越慢。麦芽汁、米曲
7、汁灭菌后大分子物质凝集会发生沉淀。甲醛对细菌和酵母杀菌效果好,硫磺对霉菌效果好。甲醛熏蒸,按甲醛用量的一半称取高锰酸钾于瓷碗或玻璃容器内,再量取甲醛,倒入容器,立即关门,几秒种后甲醛即可挥发。熏蒸至少在使用前24小时进行,熏蒸后密闭保持12小时。熏蒸完毕量取为甲醛一半的氨水迅速放在室内,可以很快减弱甲醛的气味。硫磺熏蒸在地面上洒水,曲室密闭,室内保持一定湿度,将硫磺用火燃烧,生成二氧化硫(有刺激性和毒性),与空气中的水结合生成亚硫酸杀菌,用量一半2—3克/立方米。定期对无菌室、实
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