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时间:2018-11-18
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1、制川乌与白芍不同配伍比例对总生物碱含量的影响论文.freelstance,andtoinvestigatethesciencityandrationalityofpatibilitydisciplines.MethodsAciddyecolorimetryinethetotalalkaloidcontents.ResultsTopareetry;Totalalkaloidscontents制川乌与白芍配伍在临床上是一常用治疗痹证的配伍药对,最早见于汉代张仲景《金匮要略》中的乌头汤“病历节不可屈伸疼痛,乌头汤主之[1]。”制川乌配伍白芍可以增强镇痛、抗炎、免疫调节等作用,常
2、用于治疗类风湿性关节炎、腰椎间盘突出症、坐骨神经痛、膝关节积液等[2~6]。本实验通过测定制川乌白芍配伍药对的不同配伍比例在水煎液环境中的总生物碱含量,探讨配伍规律的科学性和合理性。1器材1.1药材制川乌(RadixAconitiPreparata),本品为川乌的炮制加工品,购自四川江油恒源药业有限公司,经产地采收、加工而得,由成都中医药大学中药鉴定教研室严铸云副教授鉴定。白芍(RadixPaeoniaeAlba),为毛茛科植物芍药PaeonialactifloraPall.的干燥根,购自成都五块石中药材市场,由成都中医药大学中药鉴定教研室唐声武教授鉴定,产地为四川省中江
3、县。1.2仪器与试剂紫外/可见分光光度计,Perkin-Elmerinstru-mentsLambda35UV/Visspectrometer;pHS-2型酸度计(上海雷磁仪器厂);SartoriusBP211D电子天平(德国);R501旋转蒸发器(上海申顺生物科技有限公司);乌头碱(Aconitine0720-9807)购自中国药品生物制品检定所;溴甲酚绿等。2方法2.1pH6.1±0.1溴甲酚绿染料的配制取27.16g醋酸钠(NaAC·3H2O),加入900ml水使溶解,用冰醋酸缓缓调节pH至6.1±0.1,加水至1000ml,备用。取溴甲酚绿约100mg,用0.05
4、mol/L氢氧化钠3.5ml充分研磨溶解后,再加入pH6.1±0.1的醋酸-醋酸钠缓冲液至200ml,过滤,取滤液备用[7]。2.2对照品溶液的制备取乌头碱对照品约10mg,精密称定,置100ml量瓶中,用二氯甲烷使其溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。2.3最大吸收峰位的确定取溴甲酚绿与乌头碱形成离子对的氯仿溶液,照分光光度法[8]在紫外分光光度计上从200~700nm波长范围内扫描,其最大吸收峰位在414~416nm,与文献报道一致[9]。乌头碱紫外扫描图见图1。图1乌头碱紫外扫描图(略)2.4标准曲线的绘制精密量取乌头碱标准液0.00,0.50,1.00,1.25,1.5
5、0,2.00,2.50ml,分别置于分液漏斗中,并精密加入氯仿至20.0ml。以第1份为空白对照,然后各加入10mlpH(6.1±0.1)溴甲酚绿染料,充分振摇,静置1h,氯仿液过滤至25ml容量瓶中并用氯仿稀释至刻度。于415nm波长处,分别测定空白、供试液的吸收度。结果见表1。以生物碱量与吸收度值作图并经直线回归处理,得线性方程式Y=3.0931X-0.0231,r=0.9994。结果表明,乌头碱在51.0~255.0μg范围内,线性关系良好。乌头总生物碱标准曲线图见图2。表1总生物碱标准曲线测定结果(略)图2乌头总生物碱标准曲线(略)2.5制川乌配伍白芍样品溶液的制
6、备2.5.1制川乌单煎液制川乌粉碎成粗颗粒,称取100g置于圆底烧瓶中,加水10倍量,浸泡30min,回流,煮沸后煎煮2h,趁热过滤,用适量水洗涤残渣3次,合并洗液和滤液,置于旋转蒸发器中,在70℃下减压浓缩至1∶1体积,备用。2.5.2制川乌白芍=2∶1配伍水煎液称取制川乌粗颗粒100g,置于圆底烧瓶中,加水10倍量,浸泡30min,回流,煮沸后1h,加入已用10倍量水浸泡30min的白芍颗粒50g,共同煎煮1h,趁热过滤,用适量水洗涤残渣3次,合并洗液和滤液,置于旋转蒸发器中在70℃下减压浓缩至1∶1体积,备用。2.5.3制川乌白芍=1∶1配伍水煎液称取制川乌粗颗粒1
7、00g,白芍粗颗粒100g,煎煮及浓缩方法同“2.5.2”项。2.5.4制川乌白芍=2∶3配伍水煎液称取制川乌粗颗粒100g,白芍粗颗粒150g,煎煮及浓缩方法“2.5.2”项。2.5.5制川乌白芍=1∶2配伍水煎液称取制川乌粗颗粒100g,白芍粗颗粒200g,煎煮及浓缩方法“2.5.2”项。2.6含量测定方法取制川乌水煎液、制川乌白芍2∶1,1∶1,2∶3,1∶2配伍水煎液适量,用氨水调pH=9,用乙醚-氯仿(3∶1)的混合液萃取3次,混合液置蒸发皿中,水浴蒸干,残渣加适量氯仿溶解,转移至分液漏斗中,加氯仿至20m1,即得。
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