肠易激综合征小肠黏膜细胞的病理表现论文

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1、肠易激综合征小肠黏膜细胞的病理表现论文【摘要】目的探讨肠易激综合征（IBS）患者小肠黏膜肠嗜铬细胞（EC）、肥大细胞（MC）的数量和分布以及EC合成与储存5-HT的功能改变。方法将符合罗马Ⅲ标准的38例IBS患者分为：便秘型IBS18例（A组），腹泻型IBS20例（B组），另选20例因各种原因接受结肠镜和小肠镜检查均未见明显病变的健康者作为对照组（C组）。通过小肠镜及结肠镜分别取小肠不同部位黏膜，应用免疫组织化学方法检测EC和MC，并用电子显微镜观察EC的功能。结果（1）A组和B组每高倍镜视野下EC数量十二指肠降段黏膜分别为9.4±3.9、10

2、.2±3.7，近端空肠黏膜为6.7±2.6、6.2±2.4，回肠末端黏膜为2.7±1.4、3.2±1.9，与C组各个部位EC数量10.5±3.4、6.6±3.4、3.1±1.7相比差异均无统计学意义（P0.05）。（2）A组和B组十二指肠降段黏膜EC功能比末端回肠活跃.freele，IBS）是最常见的功能性胃肠疾病［1］。胃肠道黏膜的肠嗜铬细胞（enterochromaffincell，EC）所分泌的5-羟色胺（serotonin，5-HT），在调节胃肠道运动和感觉功能中起重要作用［2］。胃肠道黏膜的肥大细胞（mastcell,MC）释放多种生

3、物活性介质，包括生物胺、酶和白三烯等，影响胃肠道的神经和平滑肌功能［3］。目前国内、外有关IBS患者肠道黏膜EC和MC数量、分布以及EC合成、储存5-HT功能的研究结论尚不一致，且报道较少，为此笔者进行了这方面的研究，以探讨IBS的病理机制。1资料与方法1.1一般资料2006年7月～2007年2月从内蒙古民族大学附属医院普外科门诊患者中选取符合罗马Ⅲ标准［4］并且年龄≥18岁的IBS患者38例分为便秘型IBS（constipationpredominantIBS,IBS-C）患者组（A组）18例，男9例，女9例，年龄（41.5±15.1）岁；腹

4、泻型IBS（diarrheapredominantIBS,IBS-D）患者组（B组）20例，男12例，女8例，年龄（48.7±16.6）岁。同一时期从西安交通大学第二附属医院内镜室选取因各种原因接受结肠镜和小肠镜检查均未见明显病变的健康者20例，男9例，女11例，年龄（39.9±19.5）岁，作为正常对照组（C组）。结肠镜（日本潘太克斯公司，型号EC3830F）；小肠镜（日本富士能公司，型号EP450/p）；兔抗人5-HT抗体（北京中衫金桥公司，编号ZA-0231,稀释度1∶100）；鼠抗人胰蛋白酶抗体（福州迈新公司，编号MAB-0125，稀释

5、度1∶100）；SP9000免疫组化染色试剂盒（北京中衫金桥公司）；透射式电子显微镜（日本日立公司，型号H-600）。1.2方法1.2.1小肠黏膜组织的获取A组、B组和C组患者均在检查前至少1周停止一切可能影响胃肠运动的药物和治疗。先接受肠镜检查，在回肠末端取6块黏膜。休息1～2天后再行小肠镜检查（通过口腔插入小肠镜），在十二指肠降段和近段空肠各取6块黏膜。6块黏膜中3块立即放入40g/L甲醛，以备免疫组织化学检查。另3块放入40ml/L的戊二醛固定液，以备电镜观察。1.2.2免疫组化染色及观察将选取的上述黏膜标本用常规方法进行石蜡包埋和SP法

6、免疫组化染色，EC和MC分别用兔抗人5-HT抗体和鼠抗人胰蛋白酶抗体作为一抗。二抗试剂盒采用SP9000免疫组化染色试剂盒。随后在高倍光镜下观察,每张切片随机选6个不重叠的高倍视野（400倍），计算EC和MC的总数。EC和MC的计数以平均每高倍视野的EC和MC的个数表示。1.2.3透射电镜下EC的形态学观察将小肠黏膜标本从固定液中取出，10g/L四氧化锇固定2h，乙醇梯度脱水，700ml/L乙醇醋酸双氧铀块染色2h或过夜，环氧树脂Epon812浸透、包埋，聚合后进行超薄切片,醋酸铀、柠檬酸铅染色后，透射式电子显微镜下观察、拍照。观察EC个体大小

7、及形态，细胞内分泌颗粒的数量和形态变化。1.3统计学方法采用SPSS13.0软件包进行数据分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示。A组、B组和C组之间EC和MC的数量比较采用方差分析。P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1EC在光镜下的观察结果光镜下EC分布在肠腺腔内,以肠腺隐窝部位较多，大多数细胞呈锥形或近似菱形。统计学意义（P0.05）。A组、B组和C组十二指肠降段黏膜的EC数量比近端空肠黏膜显著增多（P0.05），近端空肠黏膜的EC数量又比末端回肠黏膜显著增多（P0.01），小肠黏膜EC的分布均表现为从十二指肠降段至末端回肠逐渐减

8、少。2.2EC在电子显微镜下的观察结果电镜下EC大多分布在黏膜基底部、肠腺隐窝部位。在超微结构下其分泌颗粒有独特特征，分泌颗粒常位于细胞的基底部。A组