肠易激综合征患者肠黏膜超微结构改变的电镜观察

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1、肠易激综合征患者肠黏膜超微结构改变的电镜观察【摘要】目的观察肠易激综合征(IBS)患者小肠和结肠黏膜杯状细胞、浆细胞、神经内分泌细胞和肥大细胞超微结构的变化，探讨它们在IBS发病机制中的作用。方法用活检钳分别钳取IBS患者腹泻型、便秘型和对照组各10例回肠末端及升结肠黏膜，在透射电镜下观察肠黏膜杯状细胞、浆细胞、神经内分泌细胞和肥大细胞超微结构的变化。结果与正常组比较，两型IBS患者结肠和小肠黏膜上皮均可见到杯状细胞内黏液泡和融合的黏液分泌泡明显增多；神经内分泌细胞和肥大细胞超微结构有改变，呈现功能活跃状态。4例发病前有急性感染性腹泻病史的腹泻型IBS，肠黏膜中浆细胞多

2、见，并有超微结构的改变。结论小肠和结肠黏膜内杯状细胞、浆细胞、神经内分泌细胞、肥大细胞等超微结构的改变，可能在IBS症状发生的神经免疫、内脏感觉过敏等机制中有一定的作用。【关键词】肠易激综合征肠黏膜超微结构　　ABSTRACT:ObjectiveTostudytheultrastructuralchangesincludingchalicecell,plasmacellneuroendocrinecellandmastcellintheintestinalmucosaofpatientse(IBS),andelucidatetheirpossibleeffectsont

3、hepathogenesisofIBS.MethodsOf10normalcontrols,10constipationpredominantIBS(IBSC)and10diarrheapredominantIBS(IBSD),biopsiestheterminalileumandascendingcolon.Underelectronmicroscope,acell,neuroendocrinecellandmastcelloftheintestinalmucosa.ResultsInbothcolonicmucosaandsmallintestinalmucos

4、aofpatientsucocystsandfusedmucocystsastcellsucosaofcolonandsmallintestine,oreplasmacellsucosa.ConclusionTheultrastructuralchangesofchalicecell,plasmacell,neuroendocrinecellandmastcellmayhaveapotentialeffectonneuroimmunologicmechanismandvisceralhypersensitivityofIBS.　　KEY×0.2cm。　　1.3标本的制

5、备和观察样品取出后切成1mm3的小方块，立即置于25g/L戊二醛固定液中4℃2h以上(固定液内含有0.1mol/L磷酸缓冲液、40g/L的多聚甲醛)，0.1mol/L磷酸缓冲液浸洗30min，10g/L四氧化锇固定液4℃后固定2h(固定液内含有0.1mol/L磷酸缓冲液)，0.1mol/L磷酸缓冲液浸洗1min，乙醇梯度脱水：300mL/L乙醇10min，500mL/L乙醇10min，700mL/L乙醇10min；700mL/L乙醇醋酸双氧铀快染2h或过夜；900mL/L乙醇10min×2；无水乙醇10min×3；环氧丙烷置换10min；环氧树脂Epon812浸透、包埋

6、，聚合后做半薄切片1μm，美兰染色后光学显微镜下定位，瑞典LKBV型超薄切片机进行超薄切片70nm，醋酸铀、柠檬酸铅染色后，日本日立H600投射式电子显微镜下观察、拍照。　　2结果　　2.1IBS患者肠黏膜杯状细胞和浆细胞的改变H600型透射电镜观察发现：与正常组比较，两型IBS患者结肠和小肠黏膜上皮均可见到杯状细胞内黏液泡和融合的黏液分泌泡明显增多，呈分泌旺盛状态(图1A)。4例发病前有急性感染性腹泻病史的腹泻型IBS，肠黏膜中浆细胞较多，浆细胞胞质内粗面内质网发达并有扩张，线粒体增多，便秘型患者未见明显的浆细胞及结构改变(图1B)。　　2.2IBS患者肠黏膜神

7、经内分泌细胞的改变正常对照组小肠和结肠黏膜上皮中较少观察到神经内分泌细胞，细胞质中内分泌颗粒少，无明显的空泡改变(图2A)。两型IBS患者小肠和结肠黏膜上皮细胞中可观察到神经内分泌细胞，呈锥形、上大下小、细胞核在上端、细胞质在下端、细胞质中充满高密度的内分泌颗粒，有的呈空泡状(图2B)。　　2.3IBS患者肠黏膜肥大细胞的改变正常人小肠和结肠黏膜基质中较少观察到肥大细胞，胞质中颗粒密度较低，无空泡(图3A)。两型IBS患者小肠和结肠黏膜基质中肥大细胞胞质中充满高密度的颗粒和一些空泡，呈现活跃的脱颗粒状态(图3B)。　　图1IBS患者肠黏膜