陕西汉族人群er基因扩增片段酶切长度多态性论文

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1、陕西汉族人群ER基因扩增片段酶切长度多态性论文李军林，舒青，郑强荪，冯蕾【关键词】,雌激素受体基因【Abstract】AIM:TostudythedistributionofERintron1polymorphisminHanpopulationofdifferentagesandsexesinShaanxiProvince.METHODS:AmplificationRestrictionFragmentlengthPolymorphism(AmpRFLP)orphismofHanpopulationinShaanxiPr

2、ovince.ThetemplatesofPCR162independentcasesofdifferentagesandsexesinShaanxiProvince.RESULTS:①ThefulllengthofERintronIafterPCRes,threetypesofgenotypeses,anotherthreetypesofgenotypesorphism.Thedistributionofthegenotypeisnotrelatedtodifferentagegroupsanddifferentgend

3、ergroups.【Keyorphism；HanpopulationinShaanxiprovince【摘要】目的:分析陕西省不同年龄和不同性别的汉族人群雌激素受体(ER)基因1号内含子基因多态性分布情况.方法:研究基于PCR后PvuII和XbaI的酶切结果，PCR模板DNA来自陕西省162例无关个体，研究对象分为不同年龄和不同性别两组.结果:①PCR扩增ER基因的DNA片段长度为1.3kb;②经PvuⅡ酶切，得到3种ER基因型：P/P型(1.3kb)，P/p型(1.3kb.freelpRFLP技术对陕西汉族正常人群的雌激

4、素受体基因（estrogenreceptorgene,ERgene）多态性分布进行初步研究，希望有助于从DNA水平更深入地了解ER基因多态性是否存在性别差异和年龄变化，以及相关疾病发生机制.1对象和方法1.1对象随机抽取162（男98，女64）例体质健康个体外周血血样，均为陕西省无血缘关系人群.1.2方法对162例研究对象按照年龄和性别分为:少年组（7～18岁）37例，成年组（19～40岁）72例，老年组（60～74岁）53例；按照性别分为男女两组，男98例，女64例.分别取静脉血3~5mL,生理盐水洗去血浆,加入STE,

5、.freelmol/LdNTP4μL，引物各2.5μL，模板DNA3μL.97℃预变性7min，加入Tag酶1μL（4mmol/L），94℃变性30s，61℃复性40s，72℃延伸90s，共30个循环，循环结束后72℃延伸10min.取PCR扩增产物8μL，14g/L琼脂糖凝胶30mA电泳30min，观察PCR结果.取20μLPCR扩增产物，无水乙醇和醋酸钠沉淀，晾干后加入灭菌双蒸水15.5μL溶解，加入BufferB2μL,AcetylatedBSA2μL和6UPvuII和XbaI于37℃分别酶切3～4h.酶切产物经15

6、g/L琼脂糖凝胶（含溴乙锭）电泳分离，在紫外灯下判读并照相记录结果.统计学处理：基因频率用直接算法，并按Hardyatsushita等［4］对133例怀孕妇女骨矿密度与ER关系研究揭示两者之间存在相关性.在对动脉粥样硬化遗传易感性研究过程中，我们发现女性在绝经前发病率明显低于男性，但绝经后与男性发病率相近［5］，而雌激素的分泌与年龄不存在相关性［6］.本研究结果显示，从少年组到老年组，ER基因1号内含子PvuII和XbaI两个与动脉粥样硬化遗传易感性相关的位点均有多态性分布，P/P，X/X较少见，P/p和x/x基因型分布频

7、率较高；结果与日本人种群基因频率相似［2，3］；ER基因在正常男性和正常女性中分布频率极为相近，不存在性别差异.ER基因1号内含子PvuII和XbaI两个研究位点不存在变化，说明在不同性别和不同年龄组之间，对动脉粥样硬化遗传易感性的敏感性和替代疗法存在的差异与其他限制性酶切位点可能存在相关性.结合ShiozaiK,,HigashioS,etal.Theassociationbetenopausalvertebralbonemineraldensityandestrogenreceptorgeneallelesinethni

8、cJapaneselivinginunMolPatholPharmacol，2001；109(12):15-24.［3］SapirKorenR,LivshitsG,LandsmanT,etal.Bonemineraldensityisassociatedorphisminmen［J］.Anthropol