藏药独一味两种方法提取组分对小鼠镇痛作用的影响论文

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1、藏药独一味两种方法提取组分对小鼠镇痛作用的影响论文林天慕，顾宜，方坤泉，张三奇，蒋永培【关键词】独一味【Abstract】AIM:ToexploreanexperimentalmethodforthestudyofeffectiveponentsintraditionalChinesemedicinebychemicalseparationtechnologyintegratedacologicalexperimentation.METHODS:Lamiophlomisrotata,amedicinalplantinTibet,ethod

2、s:extractionacroporousadsorptiveresin.Effectiveponentsofanalgesicice.RESULTS:Samplesseparatedbythetethodshadobviousanalgesicactiononiceandcouldprolongthelatenciesofpaacroporousadsorptiveresin.Nbutanolextract,petroleumetherextractandaineffectiveponentsofanalgesicinextracti

3、onLL-1ethanol,900mLL-1ethanolelutionpartsandprecipitateacroporousadsorptiveresin.CONCLUSION:ExperimentationoneffectiveponentsoftraditionalChinesemedicinehasbeenconductedandeffectiveanalgesicponentsarefoundinLamiophlomisrotata(Benth.)kudo.【Keyiophlomisrotata(Benth.)kudo;ex

4、tractionponents;analgesia【摘要】目的：中药化学提取分离技术与药理学试验方法相结合，构建中药有效成分研究的实验方法.方法：以独一味为代表药物，采用溶剂萃取法及大孔吸附树脂梯度洗脱分离法两种方法制备样品，通过小鼠醋酸扭体法及热板法筛选镇痛有效部位.结果：两种方法提取分离的样品对醋酸引起的小鼠扭体反应有明显的抑制作用；大孔吸附树脂梯度洗脱法分离的样品能明显延长小鼠热板的痛阈时间.萃取法中镇痛有效物质主要集中在正丁醇部分、石油醚部分、水部分；大孔吸附树脂梯度洗脱分离法中主要集中在300mLL-1乙醇洗脱部分、900mLL

5、-1乙醇洗脱部分和沉淀物部分.结论：初步建立了中药有效部位的研究方法.freeliophlomisrotata(Benth.)kudo是我国藏、蒙、纳西等民族民间常用草药之一，《中国药典》2000版一部收载独一味胶囊.临床主要用于多种外科手术后的刀口疼痛、出血，外伤骨折，筋骨扭伤，风湿痹痛等症［1］.独一味中已分得的化学成分主要有黄酮类、环烯醚萜类、三萜皂甙类等［2-4］.已有报道独一味浸膏具有镇痛活性［5］，而对独一味镇痛有效部位的研究未见报道.因此.我们以独一味为代表药物，用不同提取分离方法对独一味的化学成分进行了初步分离，通过药效试

6、验初步确定了镇痛有效部位.为进一步研究其镇痛有效单体及镇痛机制奠定基础.1材料和方法1.1材料独一味药材，采自四川藏区，经鉴定为唇形科独一味属植物独一味全草Lamiophlomisrotata(Benth.)kudo；石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、醋酸均为分析纯；酮洛芬（ketoprofen，浙江湖州市合成药厂，010901），吐温80（上海申隆药业，990602）；昆明种小鼠，体质量18~22g，由第四军医大学实验动物中心提供（陕医动字第08-13号）；D101大孔树脂（购自西安蓝深公司）；自动恒温小鼠热板法实验装置一套［自制,(55

7、±0.2)℃］.1.2方法1.2.1溶剂萃取法分离样品称取独一味药材粗粉200g，加950mLL-1乙醇回流提取3次，第一次10倍量溶剂，回流2h，第二次和第三次8倍量溶剂，回流1.5h.合并提取液，减压浓缩，回收乙醇至无醇味，得100mL浓缩液.浓缩液加1倍量水混悬后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取.分别萃取3次，每次100mL，合并萃取液，回收溶剂至干.得样品石油醚部分6.6g（A）、乙酸乙酯部分1.2g（B）、正丁醇部分8.5g（C）、萃取剩余部分为水部分24.1g（D）.以254mL20mLL-1吐温80溶解，为母液备用.1.2

8、.2大孔吸附树脂梯度洗脱法分离样品称取独一味药材粗粉200g，置渗漉器内，800mLL-1乙醇浸泡过夜后开始收集渗漉液.至流出液薄层层析（TLC）检测无斑点为止.减压浓缩渗漉液，回收乙醇至无醇