独一味胶囊镇痛、止血作用的实验研究的论文

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时间:2018-07-06

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1、独一味胶囊镇痛、止血作用的实验研究的论文【摘要】通过观察独一味胶囊对小鼠镇痛作用与血清、脑组织中no含量的影响,以及对小鼠出血时间和血浆复钙时间的影响,得出结论:独一味胶囊能显著提高小鼠痛阈值,降低小鼠血清及脑组织中no水平,明显缩短小鼠出血时间及血浆复钙时间,表明独一味胶囊具有良好的镇痛、止血作用。【关键词】独一味胶囊镇痛止血一氧化氮(no)独一味胶囊是《中国药典》收载的经典中成药,具有活血止痛、化瘀止血的功能。本文主要对独一味胶囊进行了镇痛、止血新机理探讨和研究,进一步阐明独一味胶囊镇痛、止血的作用机理,从而为临床药物

2、的使用提供实验依据。1材料1.1对象选用健康3~5周龄昆明种小鼠150只,雌雄各半,体质量24~26g,购于成都中医药大学实验动物中心。整个实验过程小鼠自由饮食饮水,于室温(22±2)℃、24小时饲养环境中光照12小时,黑暗12小时条件下饲养。1.2试剂及仪器独一味胶囊(dyg/kg,中剂量为462.86mg/kg,低剂量为231.43mg/kg;阿司匹林(aspl,陕西汉王药业有限公司,批号:070416);l-精氨酸(l-arg)(北京化学试剂公司,批号:070112);l-硝基精氨酸甲酯(l-name)(美国sigm

3、a公司)。.紫外可见分光光度计(日本岛津),柠檬酸钠溶液、生理盐水、氯化钙溶液等。2方法2.1对小鼠镇痛作用及血清和脑组织no含量的影响2.1.1以小鼠痛阈的影响2.1.1.1浸尾法(45℃)检测痛阈昆明种小鼠50只,随机分为5组:dyg/kg)、dyg/kg)+l-arg(200mg/kg)、dyg/kg)+l-name(37.5mg/kg)、aspl组(200mg/kg)、对照组(生理盐水)。将小鼠尾尖部3cm处用苦味酸做一标记,并将这一部位浸入45℃热水中,以鼠尾缩出水面为痛反应指标,以鼠尾浸入水中至缩出水面的时间为

4、痛阈。首先测定基础痛阈(间隔10min测定2次痛阈,以2次均数为基础痛阈)。然后各组依次分别:dye腹腔注射(ip)、aspl灌胃(ig)、生理盐水灌胃(ig)。药后30分钟、60分钟分别按药前方法测定药后痛阈。实验结束后,摘小鼠眼球取血,3500r/min离心15分钟,取血清。取血后快速处死小鼠取脑称质量,加入适量生理盐水低温(冰水浴中)制成脑组织匀浆。血清和脑组织匀浆均置于-20℃冰箱保存待测。2.1.1.2血清及脑组织no含量的测定按试剂盒说明采用硝酸还原酶法进行操作,检测血清和脑组织中的no含量,于550nm处用g

5、riess法测定。2.2对小鼠出血时间及血浆复钙时间的影响2.2.1对出血时间的影响[1]取22~25g小鼠45只,雌雄各半,随机分为生理盐水组、药物高、中、低剂量组,共4组,禁食禁水24小时,按0.02ml/g体质量分别灌胃给予生理盐水和相应剂量的药物。45分钟后剪去鼠尾3mm便有血液流出,立即计时,每隔10s用滤纸轻轻拭血1次,直至拭后不再出血为止。从开始出血到出血停止,所经历时间即为小鼠出血时间。2.2.2对血浆复钙时间的影响[2]取22~25g小鼠45只,雌雄各半,实验分组同上,禁食禁水24小时。摘眼球取血1ml,

6、放入加有0.1ml柠檬酸钠溶(38mg/ml)的离心管内,混匀后以1000r/min离心10分钟,取内径8mm试管1支,加入混合血浆和生理盐水各80μl,随即放入37℃水浴中温浴2分钟,然后加入80μl氯化钙溶(2.8mg/ml),混匀后再放入37℃水浴中,立即计时,记录自加钙后至纤维蛋白形成、液面不动所需时间,即为生理盐水组血浆复钙时间。将生理盐水换成独一味胶囊药物高、中、低剂量,按相同方法和条件测出各组的血浆复钙时间。2.3统计学处理应用spss10.0软件进行统计学处理。数据以x-±s表示,组间比较采用t检验,p&l

7、t;0.05表示有统计学差异。3结果3.1对小鼠镇痛作用及血清、脑组织中no含量的影响3.1.1对小鼠痛阈的影响结果显示:dye可部分增强独一味胶囊的镇痛作用。同时独一味胶囊可明显降低小鼠血清和脑组织中no含量,提示独一味胶囊的镇痛作用机制与降低体内过量的no有关。对于小鼠止血实验表明,独一味胶囊能明显缩短小鼠出血时间及血浆复钙时间,说明独一味胶囊具有明显的止血作用。

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