独一味胶囊镇痛、止血作用的实验研究

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1、独一味胶囊镇痛、止血作用的实验研宄【摘要】通过观察独一味胶囊对小鼠镇痛作用与血清、脑组织中NO含量的影响，以及对小鼠出血时间和血浆复钙时间的影响，得出结论：独一味胶囊能显著提高小鼠痛阈值，降低小鼠血清及脑组织中NO水平，明显缩短小鼠出血时间及血浆复钙时间，表明独一味胶囊具有良好的镇痛、止血作用。【关键词】独一味胶囊镇痛止血一氧化氮（NO）独一味胶囊是《中国药典》收载的经典中成药，具有活血止痛、化瘀止血的功能。本文主要对独一味胶囊进行了镇痛、止血新机理探讨和研宄，进一步阐明独一味胶囊镇痛、止血的作用机理，从而为临床药物

2、的使用提供实验依据。1材料对象选用健康3〜5周龄昆明种小鼠150只，雌雄各半，体质量24〜26g，购于成都中医药大学实验动物中心。整个实验过程小鼠自由饮食饮水，于室温（22±2）°C、24小时饲养环境中光照12小时，黑暗12小时条件下饲养。试剂及仪器独一味胶囊（DYW，甘肃独一味药业提供，批号：07111214）;独一味胶囊高剂量为/kg，中剂量为/kg，低剂量为/kg;阿司匹林（ASPL，陕西汉王药业有限公司，批号：070416）;L-精氨酸（L-Arg）（北京化学试剂公司，批号：070112）;L-硝基精氨酸甲酯

3、（L-NAME）（美国Sigma公司）。紫外可见分光光度计（日本岛津），柠檬酸钠溶液、生理盐水、氯化钙溶液等。2方法对小鼠镇痛作用及血清和脑组织N0含量的影响以小鼠痛阈的影响浸尾法（45°C）检测痛阈昆明种小鼠50只，随机分为5组：DYW组（/kg）、DYW（/kg）+L-Arg（200mg/kg）、DYW（/kg）+L-NAME（/kg）、ASPL组（200mg/kg）、对照组（生理盐水）。将小鼠尾尖部3cm处用苦味酸做一标记，并将这一部位浸入45°C热水中，以鼠尾缩出水面为痛反应指标，以鼠尾浸入水中至缩出水面的时

4、间为痛阈。首先测定基础痛阈（间隔lOmin测定2次痛阈，以2次均数为基础痛阈）。然后各组依次分别：DYW灌胃（ig）、DYW灌胃（ig）+L-Arg腹腔注射（ip）、DYW灌胃（ig）+L-NAME腹腔注射（ip）、ASPL灌胃（ig）、生理盐水灌胃（ig）。药后30分钟、60分钟分别按药前方法测定药后痛阈。实验结束后，摘小鼠眼球取血，3500r/min离心15分钟，取血清取血后快速处死小鼠取脑称质量，加入适量生理盐水低温（冰水浴中）制成脑组织匀浆。血清和脑组织匀浆均置于_20°C冰箱保存待测。血清及脑组织N0含量的

5、测定按试剂盒说明采用硝酸还原酶法进行操作，检测血清和脑组织中的NO含量，于550nm处用Griess法测定。对小鼠出血时间及血浆复餌时间的影响对出血时间的影响［1］取22〜25g小鼠45只，雌雄各半，随机分为生理盐水组、药物高、中、低剂量组，共4组，禁食禁水24小时，按/g体质量分别灌胃给予生理盐水和相应剂量的药物。45分钟后剪去鼠尾3inm便有血液流出，立即计时，每隔1Os用滤纸轻轻拭血1次，直至拭后不再出血为止。从开始出血到出血停止，所经历时间即为小鼠出血时间。对血浆复钙时间的影响［2］取22〜25g小鼠45只，

6、雌雄各半，实验分组同上，禁食禁水24小时。摘眼球取血lml,放入加有柠檬酸钠溶（38mg/ml）的离心管内，混匀后以1000r/min离心10分钟，取内径8腿试管1支，加入混合血浆和生理盐水各80ul,随即放入37°C水浴中温浴2分钟，然后加入80yl氯化钙溶（/ml），混匀后再放入37°（：水浴中，立即计时，记录自加钙后至纤维蛋白形成、液面不动所需时间，即为生理盐水组血浆复钙时间。将生理盐水换成独一味胶囊药物高、中、低剂量，按相同方法和条件测出各组的血浆复钙时间。统计学处理应用软件进行统计学处理。数据以x-±s表示

7、，组间表示有统计学差异。3结果对小鼠镇痛作用及血清、脑组织中NO含量的影响对小鼠痛阈的影响结果显75:DYW组在提高小鼠痛阈值方面优于生理盐水组；L-Arg能显著减弱DYW的镇痛作用。对小鼠血清和脑组织NO含量的影响结果显示：DYW组小鼠血清和脑组织中NO含量显著低于生理盐水组；同时，DYW组同DYW+L-Arg组比较，后者脑组织中N0水平明显高于前者。对小鼠出血时间及血浆复钙时间的影响实验表明，药物组同对照组比较：独一味胶囊高、中剂量组在缩短出血时间及血浆复钙时间方面，明显优于对照组；剂量组之间比较，高剂量组效果优

8、于低剂量组，呈现明显的量效关系4讨论本研宄结果显示，独一味胶囊对小鼠浸尾45°C致痛模型有显著的镇痛作用，L-Arg可部分拮抗独一味胶囊的镇痛作用，L-NAME可部分增强独一味胶囊的镇痛作用。同时独一味胶囊可明显降低小鼠血清和脑组织中NO含量，提示独一味胶囊的镇痛作用机制与降低体内过量的NO有关。对于小鼠止血实验表明，独一味胶囊能明显缩短小鼠出