pgc1基因thr394thr多态性与ⅱ型糖尿病关系的研究论文

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1、PGC1基因Thr394Thr多态性与Ⅱ型糖尿病关系的研究论文【摘要】探讨延边地区朝鲜族及汉族人群PGC1基因Thr394Thr多态性与Ⅱ型糖尿病的相关性.［方法］采用聚合酶链反应单链构象多态性（PCRSSCP）方法对104例糖耐量正常者和113例Ⅱ型糖尿病患者的PGC1基因Thr394Thr多态性基因型进行对照研究.［结果］朝鲜族和汉族正常人PGC1基因Thr394Thr多态性的A等位基因频率分别为23.3%，20.7%；糖耐量正常组及Ⅱ型糖尿病组人群的PGC1基因Thr394Thr多态性的A等位基因频率均为22.1%.［结论］延边地区朝鲜族和汉族人群PGC1基因Thr39

2、4Thr多态性间无显著性差异；PGC1基因Thr394Thr多态性与Ⅱ型糖尿病发病无相关性.【关键词】多态性单核苷酸糖尿病Ⅱ型人种群ABSTRACT:OBJECTIVETodeterminethecorrelationofperoxisomeproliferatorsactivatedreceptorγcoactivator1(PGC1)geneThr394Thrpolymorphismandtype2diabetesmellitus(T2DM)forKoreanChineseandHannationalityinYanbianarea.METHODSPGC1geneThr394T

3、hrpolymorphismin104casesofnormalglucosetolerant(NGT)and113casesofT2DMorphismbetorphismorphism,singlenucleotide；diabatesmellitus,type2；ethnicgroups过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子1（peroxismeproliferatoractivatedreceptouγ，PGC1）是新颖的核受体家族的转录共激活蛋白,是过氧化物酶体增殖物受体γ（PPARγ）的转录辅激活因子［1］.该基因定位于人类染色体4p15.1，全长为6kbp，由13个外显子和12

4、个内含子组成［2］.PGC1对体内能量代谢有调控作用，提示它可能与肥胖、Ⅱ型糖尿病及脂代谢密切相关.本研究应用聚合酶链反应单链构象多态性（PCRSSCP）技术探讨了延边地区朝鲜族及汉族人群PGC1基因Thr394Thr多态性与Ⅱ型糖尿病的关系.1对象与方法1.1对象在吉林省延边地区，遵循自愿知情的原则随机选择217名被调查者，对象间均无血缘关系.freelL，置于-80℃冰箱冻存.基因组DNA的提取严格按照小量全血DNA提取试剂盒（由北京华美生物工程公司提供）说明书步骤进行操作，4℃条件下保存.利用DNA/RNA蛋白测定仪测定DNA纯度.结果示所有被检样品质量浓度均在200mg/L以

5、上；OD260nm/OD280nm比值大于1.6，提示DNA纯度良好.1.2.2PCR扩增PCR反应总体积为25μL，引物序列为，上游引物5′TGGTGGACACGAGGAAAG3′，下游引物5′CTGCCAATCAGAGGAGACAT3′；扩增片段大小为166bp，模板DNA为100ng，dNTP为200μmol/L，上游引物及下游引物质量浓度均为12.5pmol/L，TaqDNA聚合酶为1U，扩增循环参数为95℃变性45s，56℃退火45s，72℃延伸45s，共30个循环，循环前反应液95℃预变性3min，最后72℃延伸10min.反应在PCPersonalCycler(Bio

6、metra)PCR扩增仪上进行，所用试剂均为北京华美生物工程有限公司产品.1.2.3SSCP检测取PCR扩增产物8μL，加入2μL变性剂（950g/L甲酰胺，10mmol/LEDTA，0.2g/L溴酚蓝），98℃加热变性10min，取出后立即放入冰浴中2min以上.在4℃条件下，将全部水相上样于12g/L非变性聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）上，在300V条件下电泳8h，取出凝胶行银染，观察显示条带情况.1.2.4DNA序列测定选取SSCP结果具有代表性的PCR产物3份进行DNA序列测定，以确保SSCP结果判读的正确性.1.2.5统计学处理运用基因计数法计算基因型频率和等位基因频率，利用Hardy

7、atsukautationaleseproliferatoractivatedreceptorgammacoactivatorlalpha(PGC1alpha)genepolymorphismsandtheirrelationshiptoType2diabetesinAsianIndians［J］.DiabetMed,2005,22(11):1516.［5］路文盛，成桦，黄勤，等.Ⅱ型糖尿病PGC