γ氨基丁酸及拮抗剂对大鼠黑质致密部神经元活动的影响论文

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1、γ氨基丁酸及拮抗剂对大鼠黑质致密部神经元活动的影响论文李伟红刘媛媛庄晓燕张红焦金菊常志杰【摘要】目的：研究γ氨基丁酸（γAminobutyricAcid，GABA）和GABAA受体阻断剂荷包牡丹碱(Bicuculine,Bic)对大鼠黑质致密部（parspactaofsubstantianigra,SNc）神经元自发放电活动的影响。方法：采用微电泳及细胞外记录方法观察GABA和Bic对SNc神经元自发放电活动的影响。结果：GABA使42个受试神经元自发放电活动几乎完全停止。在30个受试神经元中，Bic使22个神经元放电频率加快，6个神经元无作用，

2、2个神经元受到抑制。在35个受试神经元中，微电泳GABA期间给予GABAA受体阻断剂Bic，其可使91.43％神经元放电频率加快。结论：GABA能投射对SNc神经元有抑制作用，GABAA受体阻断剂Bic能拮抗GABA的抑制作用。【关键词】γ氨基丁酸荷包牡丹碱黑质致密部微电泳基底神经节是一群与中枢神经系统运动调节功能有关的皮层下核团的总称.freeline,DA）能神经元有重要的调节作用。由于黑质是引起帕金森病的主要核团，因此本实验采用微电泳及细胞外记录方法观察GABA和拮抗剂Bic对SNc神经元自发放电活动的影响，以探讨GABA在躯体运动中的调节作用

3、。1材料和方法1.1材料1.1.1实验动物本实验采用SpragueDal/100g)腹腔麻醉后，将大鼠置于脑立体定位仪上行常规开颅术。1.2.2微电泳及细胞外记录根据PaxionsΩ)灌注含1％滂胺天蓝的3.0MNaCl溶液作为神经元放电活动引导电极。外周管电阻为20～100MΩ，按需要分别充以下列药物：GABA（pH3.5，0.2mol/L），Bic（pH4.0，0.01mol/L），NaCl（0.165mol/L，对照），借助微电极推进器将微电极缓缓插入SNc，探查SNc神经元放电活动。使用微电泳仪进行微电泳。电泳电流为10～150nA，滞留电

4、流为5～10nA，可根据实验需要及神经元情况进行适当调节，各药皆用正电流泳入。分别观察GABA、Bic对SNc神经元放电活动的影响，再在微电泳GABA期间微电泳Bic，观察Bic对GABA神经传递的影响。神经元放电活动由微电极引导信号，经放大器放大、滤波，显示于示波器上，并输入SMUP生物信号处理系统，计数神经元放电情况，结果自动制成序列密度直方图。1.2.3组织学定位实验结束后经中心管给予20μA阴极电流，15min，电泳滂胺天蓝到记录部位。用10％甲醛灌流心脏后，取脑固定于10％甲醛溶液内，24h后做30um冰冻切片，焦油紫染色，进行组织学鉴定并

5、拍照。1.2.4数据处理分别记录微电泳前后神经元放电频率，微电泳前后放电频率的变化以（电泳药物期间放电频率－电泳前放电频率）/电泳前放电频率×100％表示。微电泳药物后放电频率变化超过±30％为有作用临界值，统计资料以均数±标准差表示，显著性检验用t检验，以P0.05为差异显著性指标，P0.01为差异极显著性指标。2实验结果在42个受试神经元中，微电泳GABA(20～80nA，20～30s)使所观察全部神经元自发放电活动几乎完全停止，平均放电频率由电泳前的4.28±0.99Hz减少到1.39±0.80Hz(P0.01,见图1)。其特点是作用迅速，几乎

6、没有潜伏期，也没有明显后作用，停止电泳后放电迅速恢复到对照组水平。在35个受试神经元中，微电泳GABA(20nA，50～80s)期间给予GABAA受体阻断剂Bic(30nA，20s)可拮抗GABA的抑制性作用，其可使91.43％神经元放电频率加快，平均放电频率由电泳前的1.29±0.76Hz增加到3.71±0.92Hz，增加了184.18%±34.12％(P0.01,见图1)。另外，在30个受试神经元中，直接微电泳Bic(40nA，50s)，使22个神经元放电频率加快，6个神经元无作用，2个神经元受到抑制，平均放电频率由电泳前的4.33±1.01Hz

7、增加到8.10±2.40Hz(P0.01,见图1)。其特点为作用迅速，几乎没有潜伏期，但有明显后作用。表1微电泳GABA和Bic对SNc神经元自发放电活动的影响（略）3讨论根据文献报道［2～4］，SNc神经元自发放电的特点是：自发放电频率较慢(10次/秒)，动作电位时程较长(2ms),可见爆发性放电。本实验观察到SNc神经元自发放电频率在1.96～7.20次/秒之间，平均为4.28±0.99次/秒，动作电位时程在3.35～5.98ms之间，平均为4.33±0.12ms。其基本放电形式有两种：比较规则的连续放电和爆发性放电。这两种放电形式常混合出现。这

8、些特征与文献报道基本一致。目前研究结果表明，基底神经节接受大脑皮层的纤维投射，其传出纤维经丘脑前腹核和外侧腹