不同产地的知母中芒果苷和多糖的含量测定

《不同产地的知母中芒果苷和多糖的含量测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、不同产地的知母中芒果苷和多糖的含量测定作者：关红晖郭秋平高英姚小华【摘要】　　目的考察不同产地知母中芒果苷、多糖的含量。方法采用HPLC法测定不同产地知母中芒果苷的含量；采用硫酸蒽酮法测定不同产地知母中多糖的含量，色谱柱迪马C18柱250mm×4.6mm。流动相为甲醇-3％醋酸溶液（45:55），流速为1.0ml·min-1，柱温为室温。结果河北、安徽、广东知母中芒果苷的含量为0.50%～1.18％，回收率为101.54％，RSD为2.33%(n=6)；芒果苷的线性范围为1.29～7.74μg(r=0.9995)；河北、安徽、广东知母中的多糖含量为0.52%～1.91%，回收率

2、为99.15％，RSD为1.94%(n=6)。结论各产地知母中芒果苷及多糖含量间变异较大；以河北知母中芒果苷最高，以广东知母多糖含量最高。【关键词】知母；芒果苷；多糖；高效液相色谱　　知母是百合科Liliaceae植物知母AnemarrhenaasphodeloidesBge.的干燥根茎,具有清热泻火、生津润燥的功效，用于治疗外感热病、高热烦渴、肺热燥咳、骨蒸潮热、内热消渴、肠燥便秘［1］。知母的主要有效成分为知母皂苷及多糖，具有免疫活性、抗菌活性,有抗氧化、抗糖尿病、抗肿瘤作用,对血脂质有抑制效应,有护肝、抗肥胖效应,在骨吸收方面有重要的抑制效应等［2］。知母虽为单一品种,但

3、分布较广,各地产药材之间品质差异较大。本文采用了高效液相法及比色法检测比较了3个产地知母中芒果苷及多糖的含量,为更好地控制知母的质量提供了依据。　　1仪器与材料　　1.1仪器岛津CBM-10AVPplus液相仪，岛津AUY120分析天平，RE－2000旋转蒸发器（上海亚生化仪器厂），HHS精密恒温水浴锅（江苏金坛市医疗仪器厂），unicuv-2100紫外分光光度计（尤尼柯上海仪器有限公司）。　　1.2材料芒果苷对照品（购自中国药品生物制品检定所，批号110704200509）；香兰素（国药集团化学试剂有限公司，批号20050718）；甲醇（色谱纯，德国Merck公司）；乙醇、

4、氯仿、丙酮、高氯酸（分析纯，天津大茂化学试剂厂），不同产地的知母药材购自广州清平市场，经广州中医药大学中药鉴定教研室徐鸿华教授鉴定为百合科知母。　　2方法与结果　　2.1HPLC法测定各产地知母中芒果苷的含量　　2.1.1色谱条件色谱柱为迪马C18柱250mm×4.6mm。流动相为甲醇－3％醋酸溶液（45∶55），流速为1.0ml·min-1；柱温为室温。　　2.1.2溶液的制备　　对照品溶液的制备：精密称取芒果苷4.3mg于10ml量瓶中，加甲醇溶解制成0.43mg/ml的溶液。　　供试品溶液的制备：分别称取河北安国、安徽、广东知母粉末（过3号筛）各2.00g，于25ml量瓶

5、中，加甲醇至刻度，超声30min，放冷，用甲醇补足失重，摇匀，0.45μm滤膜滤过。　　2.1.3线性关系考察分别精密吸取对照品溶液6.0，9.0，12.0，15.0，18.0μl，依次注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以芒果苷的含量为横坐标，色谱峰面积的自然对数为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y＝2E+06X＋3E+06，r=0.9995。结果表明，芒果苷对照品在1.29～7.74μg内呈良好的线性关系（见图1～2）。　　2.1.4精密度实验精密吸取对照品溶液15μl，重复进样5次，测定峰面积平均值为16567992，RSD为1.59％，表明仪器精密度良好。　　2.1.5

6、稳定性实验取广东知母溶液，分别于0,24，48h测定，进样5μl，结果显示，0,24，48h测定，广东知母中芒果苷的峰面积平均值8171278，RSD为2.72％，表明本品48h内具有良好的稳定性。　　2.1.6重复性实验取同一批次的广东知母6份，分别独立按供试品溶液制备方法制成样品溶液，在上述色谱条件下测定，测得的平均含量为2.59mg，RSD为2.82%。表明方法重复性良好。　　2.1.7准确度实验取本品粉末（过4号筛）0.50g，精密称定一定量的对照品，按供试品溶液制备方法制成样品溶液，精密吸取5μl，在上述色谱条件下测定6次，计算回收率。结果显示平均回收率为101.54

7、％，RSD为为2.33%，表明芒果苷回收率良好。　　图1芒果苷对照品溶液HPLC图（略）　　图2河北知母药材溶液HPLC图（略）　　2.1.8样品含量测定取各个产地的知母药材3份，精密称定2.00g，按供试品溶液制备的方法处理，在上述色谱条件下测定。结果见表1。结果显示,测得河北安国知母中芒果苷的含量最高，达1.18％，安徽知母与广东知母中芒果苷含量相当，分别为0.50％，0.64％。　　2.2硫酸－蒽酮法测定各产地知母中多糖含量　　2.2.1溶液的制备　　对照品溶液的制备：精密称取葡萄糖对