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1、万方数据第32卷第4期云南中医学院学报V01.32No.42009年8月JournalofYunnanUni、一ersityofTradilionalChineseMedicine8.2009云南不同产地茯苓中多糖的含量测定+卫华,赵声兰,赵荣华,冯德强△(云南中医学院中药学院,云南昆明650500)摘要:分别用水和稀碱为溶剂提取茯苓多糖,用硫酸一苯酚法测定云南9个不同产地茯苓样品的水溶性多糖和碱溶性多糖的含量。结果表明:云南不同产地的茯苓中水溶性多糖最高达7.03%,最低为3.27%,碱溶性多糖最高达92.72%,最低为65.85%.云南不同产地的茯苓中多糖含量有明显差别。研究结果为评价
2、云南茯苓药材的质量及种植奠定基础。关键词:茯苓;多糖;含量测定中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1000--2723(2009)04—0025珈3茯苓为多孔菌科真菌茯苓PoriaCOCOS(Schw.)Wolf的干燥菌核。主产于云南、安徽、湖北、河南、四川等地。产云南者称“云茯”,质较优。茯苓主要含p一茯苓聚糖,占干重约93%.其味甘而淡,性平,具有利水渗湿,益心脾而宁心安神之功效¨]。茯苓多糖或经改造的茯苓异多糖具有促进细胞分裂、补体激活、抗肿瘤、抗癌等生物活性[2]。茯苓多糖主要存在于茯苓细胞壁中,按照溶解度的不同又分为水溶性茯苓多糖和碱溶性多糖【3J。本文分别以水和稀碱
3、为溶剂,提取茯苓中的多糖,用文献【41硫酸一苯酚法测定云南9个不同产地茯苓样品的水溶性多糖和碱溶性多糖的含量,为茯苓药材的质量评价和开发利用提供依据。1仪器、试剂及实验材料1.1仪器赛多利斯BS系列电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司),XYJ一802离心机(江苏医疗仪器厂),752N紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)。1.2材料及试剂茯苓药材为茯苓PoriaCOCOS(Schw.)Wolf的干燥菌核,由普洱市民族传统医药研究所提供,共有9个产地9个样品。浓硫酸,石油醚(60—90℃),95%乙醇,无水葡萄糖,氢氧化钠,苯酚均为国产分析纯。5%苯酚溶液:称取分析纯苯酚309加热蒸馏
4、,收集182。C的馏分,吸取此馏分10mL,加蒸馏水200mL使之溶解,置棕色瓶内,放冰箱备用。2方法与结果2.1样品的预处理样品粉碎过60目筛网,置于索氏提取器中用石油醚回流处理3h,再用80%乙醇提取4~5h,过滤,于60℃干燥5h(至恒重)后置于干燥器中备用。2.2水分含量的测定按文献【5]水分测定法(附录ⅨH第一法)测定。云南不同产地茯苓药材中的含水量(表1)。表1云南不同产地茯苓药材中的含水量产地含量(%)产地含水量%2.3葡萄糖对照品溶液[6-s]精密称取105。C干燥至恒重的无水葡萄糖·基金项目:云南省2004科技攻关项目(No.2004NG05一17)收稿日期:2009—0
5、5—24修回日期:2007—07一17作者简介:卫华(1965一),女,云南石屏人,高级讲师,从事有机化学教学和研究工作。△通讯作者:冯德强,Tel:0871-5849622;E—mail:fdq590522@qq.com25万方数据2009钜云南中医学院学报第32卷100mg,用水溶解并定容于100mL容量瓶中,摇匀。精密量取10mL上述溶液,置于100mL容量瓶中,用水定容,摇匀。即配制得0.1mg/mL的葡萄糖对照品溶液。2.4供试品溶液2.4.1水溶性茯苓多糖精密称取经过预处理的茯苓样品1g,加水40mL,回流提取2h,趁热过滤,重复提取2次,用少量水洗涤滤渣,合并滤液,转移至10
6、0mL容量瓶内,加水稀释至刻度,摇匀,即为供试品溶液。2.4.2碱溶性茯苓多糖曲1精密称取预处理的茯苓样品0.49,加1mol/L的NaOH溶液100mL,4℃浸渍过夜,过滤,弃去初滤液,精密吸取滤液1.5mL于50mL的容量瓶,加水稀释至刻度,摇匀,即为供试品溶液。2.5最大吸收波长的确定精密吸取对照品溶液和同一供试品溶液0.5mL,分别置于具塞刻度比色管中,各补加蒸馏水至1.0mL,再各加苯酚试液1.OmL,摇匀,迅速滴加浓硫酸5.0mL,摇匀后放置5min,沸水浴25rain,取出冷却至室温,用试剂空白调零,在300nm~600nm波长范围连续测定吸光度。结果表明,对照品溶液和供试品
7、溶液均在490nm有最大吸收,故确定490nm为测定波长。2.6标准曲线【n8】精密吸取葡萄糖对照品溶液0,0.1,0.3,0.5,O.7,0.9,1.0mL,分别置于具塞刻度比色管中,SHJtl蒸馏水至1.0mL,按2.5项方法操作,于490nm波长测定吸光度,以吸光度A为纵坐标。葡萄糖量为横坐标,绘制标准曲线,求得回归方程为:A=0.8163C+0.0005,r=0.9994(n=6)。结果表明葡萄糖进样量在0.01
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