不同产地的知母中芒果苷和多糖的含量测定论文

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1、不同产地的知母中芒果苷和多糖的含量测定论文关红晖郭秋平高英姚小华【摘要】目的考察不同产地知母中芒果苷、多糖的含量。方法采用HPLC法测定不同产地知母中芒果苷的含量；采用硫酸蒽酮法测定不同产地知母中多糖的含量，色谱柱迪马C18柱250mm×4.6mm。流动相为甲醇-3％醋酸溶液（45:55），流速为1.0ml·min-1，柱温为室温。结果河北、安徽、广东知母中芒果苷的含量为0.50%～1.18％，回收率为101.54％，RSD为2.33%(n=6)；芒果苷的线性范围为1.29～7.74μg(r=0.9995)；河北、安徽、广东知母中的多糖含量为0.52%～1.91%，回收率为99

2、.15％，RSD为1.94%(n=6)。结论各产地知母中芒果苷及多糖含量间变异较大；以河北知母中芒果苷最高.freelarrhenaasphodeloidesBge.的干燥根茎,具有清热泻火、生津润燥的功效，用于治疗外感热病、高热烦渴、肺热燥咳、骨蒸潮热、内热消渴、肠燥便秘［1］。知母的主要有效成分为知母皂苷及多糖，具有免疫活性、抗菌活性,有抗氧化、抗糖尿病、抗肿瘤作用,对血脂质有抑制效应,有护肝、抗肥胖效应,在骨吸收方面有重要的抑制效应等［2］。知母虽为单一品种,但分布较广,各地产药材之间品质差异较大。本文采用了高效液相法及比色法检测比较了3个产地知母中芒果苷及多糖的含量,为

3、更好地控制知母的质量提供了依据。1仪器与材料1.1仪器岛津CBM-10AVPplus液相仪，岛津AUY120分析天平，RE－2000旋转蒸发器（上海亚生化仪器厂），HHS精密恒温水浴锅（江苏金坛市医疗仪器厂），unicuv-2100紫外分光光度计（尤尼柯上海仪器有限公司）。1.2材料芒果苷对照品（购自中国药品生物制品检定所，批号110704200509）；香兰素（国药集团化学试剂有限公司，批号20050718）；甲醇（色谱纯，德国Merck公司）；乙醇、氯仿、丙酮、高氯酸（分析纯，天津大茂化学试剂厂），不同产地的知母药材购自广州清平市场，经广州中医药大学中药鉴定教研室徐鸿华教

4、授鉴定为百合科知母。2方法与结果2.1HPLC法测定各产地知母中芒果苷的含量2.1.1色谱条件色谱柱为迪马C18柱250mm×4.6mm。流动相为甲醇－3％醋酸溶液（45∶55），流速为1.0ml·min-1；柱温为室温。2.1.2溶液的制备对照品溶液的制备：精密称取芒果苷4.3mg于10ml量瓶中，加甲醇溶解制成0.43mg/ml的溶液。供试品溶液的制备：分别称取河北安国、安徽、广东知母粉末（过3号筛）各2.00g，于25ml量瓶中，加甲醇至刻度，超声30min，放冷，用甲醇补足失重，摇匀，0.45μm滤膜滤过。2.1.3线性关系考察分别精密吸取对照品溶液6.0，9.0，12

5、.0，15.0，18.0μl，依次注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以芒果苷的含量为横坐标，色谱峰面积的自然对数为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y＝2E+06X＋3E+06，r=0.9995。结果表明，芒果苷对照品在1.29～7.74μg内呈良好的线性关系（见图1～2）。2.1.4精密度实验精密吸取对照品溶液15μl，重复进样5次，测定峰面积平均值为16567992，RSD为1.59％，表明仪器精密度良好。2.1.5稳定性实验取广东知母溶液，分别于0,24，48h测定，进样5μl，结果显示，0,24，48h测定，广东知母中芒果苷的峰面积平均值8171278，RSD为2.72

6、％，表明本品48h内具有良好的稳定性。2.1.6重复性实验取同一批次的广东知母6份，分别独立按供试品溶液制备方法制成样品溶液，在上述色谱条件下测定，测得的平均含量为2.59mg，RSD为2.82%。表明方法重复性良好。2.1.7准确度实验取本品粉末（过4号筛）0.50g，精密称定一定量的对照品，按供试品溶液制备方法制成样品溶液，精密吸取5μl，在上述色谱条件下测定6次，计算回收率。结果显示平均回收率为101.54％，RSD为为2.33%，表明芒果苷回收率良好。图1芒果苷对照品溶液HPLC图（略）图2河北知母药材溶液HPLC图（略）2.1.8样品含量测定取各个产地的知母药材3份，

7、精密称定2.00g，按供试品溶液制备的方法处理，在上述色谱条件下测定。结果见表1。结果显示,测得河北安国知母中芒果苷的含量最高，达1.18％，安徽知母与广东知母中芒果苷含量相当，分别为0.50％，0.64％。2.2硫酸－蒽酮法测定各产地知母中多糖含量2.2.1溶液的制备对照品溶液的制备：精密称取葡萄糖对照品适量，加蒸馏水溶解，配制成0.2mg/ml的溶液。供试品溶液的制备：分别称取河北安国、安徽，广东知母粉末（过4号筛）各2g，精密称定，置具塞圆底烧瓶中，加乙醇20ml，90℃水浴回流3次，