慢性阻塞性肺疾病tnfa和lta基因等位基因变异分析论文

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1、慢性阻塞性肺疾病TNFA和LTA基因等位基因变异分析论文【摘要】研究中国北方汉族人群中TNF超家族基因等位基因变异是否与慢性阻塞性肺疾病（COPD）相关联。方法以50例COPD患者为研究对象，应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法研究TNF超家族基因（TNFA和LTA）等位基因变异分布。结果COPD组TNFA基因多态性位点-308G/AAA基因型频率明显高于对照组（P0.01）,OR值为10.756（95%CI为9.875～12.640）;COPD组-308G/A多态性位点A等位基因频率明显高于对照组（P0.01）；COPD组LTA基因+252A/

2、G多态性位点AG基因型频率明显高于对照组（P0.01），OR值为4.373（95%CI为3.301～6.872）。COPD组TNFA基因GG正常基因型和LTA基因AG杂合基因型结合个体频率明显高于对照组（P﹤0.05）。2组间LTA基因+252A/G多态性位点G等位基因频率差异无统计学意义(P＞0.05)。结论中国北方汉族人群LTA基因等位基因变异、TNFA基因多态性变异组合与COPD相关联。【关键词】慢性阻塞性肺疾病TNFA基因LTA基因遗传多态性Abstract:ObjectiveToinvestigateonarydisease(COPD)ofHanpopulati

3、oninnorthernChina.Methods50casesofCOPDily-gene(TNFAandLTA)allelevariationdistributionbythemethodofpolymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism(PCR-RFLP).Resultsparedorphismspacepoint-308G/A(P0.01),ORvalueorphismspacepoint（P0.01）;③COPDgrouphadahigherfrequencyofAGallelegeno

4、typeatLTA-gene+252A/Gpolymorphismspacepoint(P0.01),ORvaluealgenotypeandLTA-geneAGhybridgenotype(P0.05).⑤NosignificantdifferenceinfrequencyofGallelegenotypeatLTA-genepolymorphismspacepoint+252A/Gorphismvariationareassociatedonarydisease;TNFAgene;LTAgene;geicpolymorphism慢性阻塞性肺疾病（chronicobst

5、ructivepulmonarydisease,COPD）是内科系统常见病、多发病，慢性炎症是COPD发病过程中的重要特征。参与肺部炎症调节的细胞因子在COPD发病过程中起重要作用。肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)是一个多功能的细胞因子，它促进气道重构，改变平滑肌细胞功能，参与肺部炎症调节，从而在COPD发病过程中起重要作用。淋巴毒素-α(lymphotoxin,LT-α)也是炎症细胞介素.freelmol/L,1mmol/LdNTPs2.5μl,引物各5pmol,TaqDNA聚合酶4U（北京鼎国生物技术有限责任公司），不足体积用

6、灭菌双蒸馏水补充至25μl。TNFA基因-308G/APCR反应循环参数：94℃预变性5min；94℃变性60s，61℃（LTA基因+252A/G为64℃）退火45s，72℃延伸60s，32个循环；最后72℃延伸7min。扩增后取反应产物4μl在2%琼脂糖凝胶上电泳15min（电压120V），紫外线灯下鉴定PCR产物。表1引物序列与PCR、酶切反应条件1.2.3酶切条件及体系采用限制性片段长度多态性(RFLP)检测TNFA和LTA基因的多态性（表1）。在20μl体系中，加入10μlPCR产物，10×缓冲液2μl，NcoⅠ（北京鼎国生物技术有限责任公司）4U(0.5μl),

7、.freelin，根据紫外灯下观察到的酶切产物片段长度鉴定等位基因并照相。1.3统计学处理采用SPSS11.5进行统计学分析。各组间各基因型和等位基因频率的比较以及Hardy-cDoorphisminthehumantumornecrosisfactoralphapromoterontranscriptionalactivation［J］.ProcNatlAcadSciUSA,1997,94(7):3195-3199.［2］PalmerSM,Klimeckied,1997,156(5):1436-1439.［6］Patuzzo