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1、地锦草提取物对红色毛癣菌酶活性的影响作者：安惠霞，李治建，古力娜·达吾提，斯拉甫·艾白【摘要】目的研究地锦草提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的影响，探讨其抗真菌作用机制。方法药物干预红色毛癣菌后分离菌体，按试剂盒要求处理样品，利用酶联免疫法和荧光分光光度法，研究地锦草提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性的作用。结果地锦草提取物256μg·ml-1时，可显著降低红色毛癣菌中角鲨烯环氧化酶的活性(P<0.01);不同浓度的地锦草提取物，均可降低红色毛癣菌β-(1,3)-D-葡聚
2、糖合成酶的活性(P<0.01)。结论地锦草提取物抗真菌机制可能与抑制角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的活性有关。【关键词】地锦草提取物;角鲨烯环氧化酶;酶联免疫吸附试验;β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶;荧光分光光度法 Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofEuphorbiahumifusaextract(EHE)onsqualeneepoxidaseandβ-(1,3)-D-glucansynthaseofT.rubrumanditsmechanism.MethodsTreatedT.r
3、ubrumcellmembranebyELISAtestandβ-1,3-glucansynthaseactivityinT.rubrumcelletry.ResultsTheELISAtestresultsshol-1.ThefluorospectrophotometrytestresultsshotreatediddleandhighconcentrationsofEHE(P<0.01,vsgroechanismmayberelatedtoitsinhibitiononsqualeneepoxidaseandβ-(1,3)-D-gluc
4、ansynthaseactivityinfungus. Keyifusaextract;Squaleneepoxidase;Elisatest;β-1,3-D-glucansynthase;Fluorospectrophotometry 红色毛癣菌T.rubrum是临床常见的皮肤癣菌，也是浅部真菌病的主要病原菌，其中69.5%的皮肤癣菌病是由红色毛癣菌感染所致[1，2]。地锦草Euphorbiahumifusa是维吾尔医常用药材，临床主要用于治疗手癣、体癣、足癣、花斑癣及银屑病等[3]。 3.2对红色毛癣菌β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活
5、性的影响实验结果表明，不同浓度的地锦草提取物，均可降低红色毛癣菌β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的活性(P<0.01)。结果见表2。 表2EHE对红色毛癣菌β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性的影响EHE高、中、低浓度组与生长对照组比较，**P<0.01;EHE高、中浓度组与低浓度组比较，△△P<0.01;EHE高浓度组与中浓度组比较，+P>0.05;n=3 4讨论 角鲨烯环氧化酶是真菌细胞膜麦角甾醇生物合成通路中的一个重要酶，它能使角鲨烯转变成羊毛甾醇。目前，临床常用的烯丙胺类及硫脲类药物，通过作用于角鲨烯环氧化酶，
6、导致真菌重要膜成分麦角甾醇生物合成受抑而缺陷，发挥抑菌作用;角鲨烯的最终积聚，脂滴沉积于细胞壁及细胞浆内，导致膜破裂和细胞死亡，发挥杀菌作用[11]。ELISA实验表明，地锦草提取物256μg·ml-1时，可显著降低红色毛癣菌中角鲨烯环氧化酶的活性(P<0.01)，因此，其抗真菌机制可能与抑制角鲨烯环氧化酶的活性，影响麦角甾醇的生物合成有关。 真菌细胞壁的主要物质为碳水化合物，主要有甘露聚糖蛋白、几丁质和β-葡聚糖(β-1,3-glucansynthase)组成。β-葡聚糖是细胞壁的主要成分，占细胞干重的48%60%，由β-(1,3)键(
7、67%)和β-(1,6)键(14%)连接而成，它保证细胞渗透压的稳定性，并且在细胞生长和分裂过程中起重要作用[12]。抑制了β-(1,3)-葡聚糖合成酶，就可致细胞壁结构破坏，细胞破裂死亡。荧光分光光度法研究得出结论，不同浓度的地锦草提取物，均可降低红色毛癣菌β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的活性(P<0.01)。地锦草提取物在64μg·ml-1时，就可显著降低红色毛癣菌中β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的活性(P<0.01)，且存在剂量依赖性。因此，地锦草提取物抗真菌机制，可能是通过抑制β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶，导致多聚葡聚
8、糖的合成受阻，细胞生长周期停滞，真菌细胞壁的完整性被破坏，真菌细胞内渗透压不稳定，最终导致真菌细胞溶解死亡。【参考
