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1、地锦草提取物对红色毛癣菌酶活性的影响作者：安惠霞，李治建，古力娜·达吾提，斯拉甫·艾白【摘要】目的研究地锦草提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的影响，探讨其抗真菌作用机制。方法药物干预红色毛癣菌后分离菌体，按试剂盒要求处理样品，利用酶联免疫法和荧光分光光度法，研究地锦草提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性的作用。结果地锦草提取物256μg·ml-1时，可显著降低红色毛癣菌中角鲨烯环氧化酶的活性(P<0.01);不同浓度的地锦草提取物，均可降低红色毛癣菌β-(
2、1,3)-D-葡聚糖合成酶的活性(P<0.01)。结论地锦草提取物抗真菌机制可能与抑制角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的活性有关。【关键词】地锦草提取物;角鲨烯环氧化酶;酶联免疫吸附试验;β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶;荧光分光光度法 Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofEuphorbiahumifusaextract(EHE)onsqualeneepoxidaseandβ-(1,3)-D-glucansynthaseofT.rubrumanditsmechanism
3、.MethodsTreatedT.rubrumwithEHE,studiedtheeffectsofEHEonsqualenceepoxidaseactivityinT.rubrumcellmembranebyELISA9testandβ-1,3-glucansynthaseactivityinT.rubrumcellwallbyfluorospectrophotometry.ResultsTheELISAtestresultsshowedthatsqualeneepoxidaseactivitywasdecreasedsign
4、ificantly(P<0.01,vsgrowthcontrol)inT.rubrumwhentheconcentrationofEHEwas256μg·ml-1.Thefluorospectrophotometrytestresultsshowedthatβ-(1,3)-D-glucansynthaseactivitywasdecreasedsignificantlyinT.rubrumtreatedwithlow,middleandhighconcentrationsofEHE(P<0.01,vsgrowthco
5、ntrol).ConclusionTheantifungalmechanismmayberelatedtoitsinhibitiononsqualeneepoxidaseandβ-(1,3)-D-glucansynthaseactivityinfungus. Keywords：Euphorbiahumifusaextract;Squaleneepoxidase;Elisatest;β-1,3-D-glucansynthase;Fluorospectrophotometry 红色毛癣菌T.rubrum是临床常见的皮肤癣菌，也是
6、浅部真菌病的主要病原菌，其中69.5%的皮肤癣菌病是由红色毛癣菌感染所致[1，2]。地锦草Euphorbia9humifusa是维吾尔医常用药材，临床主要用于治疗手癣、体癣、足癣、花斑癣及银屑病等[3]。文献报道[48]，地锦草具有显著的抗真菌作用，尤其对毛癣菌属Trichophyton的红色毛癣菌最敏感。为了探讨地锦草提取物抗皮肤癣菌的作用机制，本实验研究了地锦草提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶活性和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的影响，为地锦草的开发利用提供实验依据。 1材料 1.1药物地锦草提取物(EHE，批号：20
7、080117)，由新疆维吾尔医药研究所药剂室提供，提取方法及质量控制，参照《中华人民共和国药品标准·维吾尔药分册》中百癣夏塔热片之地锦草提取方法及质量控制[9]，用二甲基亚砜(DMSO)溶解制成浓度为102.4mg·ml-1的储存液，存于-60℃冰箱备用。 1.2菌株红色毛癣菌T.rubrum1株，菌株编号：XYZT.r40001，由新疆医科大学真菌与真菌病研究中心菌种保藏库(XYZ)提供。 1.3试剂RPMI-1640培养基和三氮吗啡琳丙磺酸(MOPS)，美国Gibco公司产品;沙堡氏琼脂培养基(SDA)，北京奥博星生物科
8、技有限公司产品，批号：20080228;真菌角鲨烯环氧化酶酶联免疫分析试剂盒(FungussqualenceepoxidaseELISAkit)，美国Uscnlife公司产品，编号：EN1007fu;GENMED真菌细胞β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性定量检
