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1、热毒清口服液对内毒素性发热家兔体温及血浆一氧化氮的影响论文.freela公司精制大肠杆菌内毒素,型号L2880,合肥市夏新生化试剂经营中心提供。电子数字型体温计,型号：MT1671,Microlife公司出品。NO检测试剂盒,Uslife生产。2实验方法2.1分组家兔每日测量体温(肛温)2次,连续2d,取两次体温的平均值记为基础体温。单次体温超过38.5℃或2次体温差超过0.5℃的动物剔除。将符合实验条件的家兔60只随机分为6组：复方乙酰水杨酸组、热毒清高剂量组、热毒清中剂量组、热毒清低剂量组、双黄连口服液组、模型组,每组10只。实验室经紫外线照
2、射消毒,所用耐高温干热物品均干热180℃2h,不宜干热物品采用高压蒸汽灭菌。各项操作按常规无菌操作规则进行。2.2动物处理及观察指标实验前6h禁食不禁水。用0.9%氯化钠溶液配制成100mL中含25μg的内毒素溶液,试验前将其置于38℃水中温浴,按0.25μg/kg的用量,于家兔耳静脉缓缓注射,造成家兔发热模型。各组均灌胃给药,模型组按1mL/kg给予生理盐水,复方乙酰水杨酸组、热毒清中剂量组、双黄连口服液组按成人常规剂量的10倍给药,热毒清高剂量组按成人常规剂量的20倍给药,热毒清低剂量组按成人剂量的5倍给药,各组均于注射内毒素前2h及注射内毒
3、素后2、4h给药。血浆NO检测方法均按试剂盒说明进行。注射内毒素后每1h测1次体温,连续测5h,并观察各组家兔症状与体征的变化情况。2.3指标测定用NO试剂盒(酶法),通过显色深浅在550nm浓度0.5光径,测样品吸收值。通过公式算出待测样品的NO浓度：NO＝(样品吸光度－空白管吸光度)/(标准管吸光度－空白管吸光度)×100×样品稀释倍数。2.4统计学方法所有数据用x±s表示,计量资料统计采用t检验,统计软件使用SPSS13.0。3结果3.1各组症状与体征变化模型组、热毒清低剂量组家兔在耳静脉注射内毒素后0.5～1h开始发热,出现耸毛、发抖、蜷
4、缩、拒食、心率加快,1～2h耸毛、发抖、蜷缩症状逐渐消失,但发热更加明显,心率加快,频繁饮水,胸腹灼热,睑结膜充血明显,舌质偏红,耳缘及皮下未见出血、斑点。4～5h上述症状逐渐消失。复方乙酰水杨酸组、热毒清高剂量组、热毒清中剂量组上述症状较轻。3.2对家兔发热模型体温的影响(见表1)表1各组内毒素性发热家兔不同时段体温比较(略)注：与模型组同一时段比较,*P0.05(下同)3.3对家兔发热模型血浆一氧化氮水平的影响(见表2)表2各组内毒素性发热家兔不同时段血浆NO水平比较(略)4讨论热毒清由古方蚤休散化裁而来,原方出自《药奁启秘》,由蚤休一味药组
5、成,主治外科疔疮肿痛。鉴于外感高热是外邪入侵,人体正气与之相搏,正邪交争与体外,或热毒充斥于人体而发热,即所谓“阳胜则热”的病理特点。综合古方功效,将原方加味后用于内科外感发热,全方由蚤休、连翘、射干、黄芩、大青叶、板蓝根组成。蚤休为君,其味苦性寒,归肝经,具有清热解毒、消肿止痛、熄风止痛功效；连翘为臣药,其味苦性寒,归肺、胃、小肠经,清热解毒、消痈散结；射干味苦性寒,归肺经,清热解毒、祛痰利咽；黄芩味苦性寒,归肺、胆、脾、胃、大肠、小肠经,清热燥湿、泻火解毒、止血；大青叶、板蓝根味苦性寒,归心、胃经,清热解毒、凉血消斑、利咽。全方解毒退热、利咽
6、止痛。现代药理研究证明,其药物组成各成分均有抗病原微生物与抗炎退热作用2。细菌内毒素(endotoxin,ET)是革兰阴性菌细胞外膜中的脂多糖(lipoposaccharide,LPS)成分,可刺激机体防御系统过度释放炎性因子——肿瘤坏死因子(TNF-α)及NO等,引起发热、弥漫性血管内凝血(DIC)、多器官功能衰竭,以至死亡。近年来的研究发现,β-内酰胺类抗生素可导致体内ET增加3,至今没有理想的抗内毒素药物4。NO是L-精氨酸上胍基在一氧化氮合酶(NOS)催化下释放的气体分子,继而激活可溶性鸟苷酸环化酶,通过升高胞内环磷酸鸟苷(cGMP)水平
7、发挥广泛的生物学效应。虽然NO半寿期极短,但其具有脂溶性高易于透过生物膜、合成酶分布广泛等特点,推测其作用几乎可不受限于机体内任何生物屏障,为NO参与外周-中枢信息传递提供了物质基础。体内血管内皮细胞、血小板、中性粒细胞、巨噬细胞、神经组织在一定刺激下均可产生NO。近年研究表明,NO参与广泛的生理功能的调节,如血压调节、外周非肾上腺素能非胆碱能(NANC)神经递质的传递、免疫介导及防御机制等,在急诊危重症患者的发病及治疗中具有重要意义。有实验表明,在体外NO有促进脂多糖调控中性粒细胞释放TNF的作用,在败血症、感染性休克发病机制中的作用十分引人注
8、目5。本实验发现,内毒素性发热家兔模型中循环血NO水平显著升高(P0.05),而且与体温呈显著正相关(P0.05),表明NO参与了内毒素
