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1、不同来源白头翁药材的皂苷含量比较论文.freelination；HPLC白头翁为毛茛科植物白头翁Pulsatillachinensis(Bge.)Regel的干燥根1,为多年生草本植物,具有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫的功效。目前市场上以野生采集品为主,由于产地不一,加工和饮片的切制方法不同,.freelin,取出,待温度降至50℃,再放入干燥箱中烘干,编号为F。2.2白头翁皂苷B4含量测定2.2.1检测波长的确定取白头翁对照品溶液,以甲醇溶液作空白基线,在400～190nm波长范围内扫描。结果表明,白头翁皂苷B4
2、在205nm波长处有最大吸收,甲醇溶液对样品的测定无干扰。2.2.2色谱条件固定相：ZORBAXSB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm)；流动相：乙腈-水(28∶72)；体积流量1.0mL/min；检测波长205nm；柱温：室温。2.2.3标准曲线的制作称取5.0mg白头翁皂苷B4置10mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇均,即得0.5mg/mL浓度的白头翁皂苷B4溶液,取5mL置10mL容量瓶中,甲醇定容至刻度得0.25mg/mL,依次类推,进行倍比稀释得0.125、0.625、0.0312、0.01
3、56mg/mL6个梯度浓度的对照品溶液,进样量20μL。以进样量为横坐标,峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程Y＝276350X－12180,R2＝0.9996。白头翁皂苷B4在0.3125～10μg范围线性关系良好。2.2.4供试品溶液的制备精密称定各样品白头翁粗粉20.0g,置圆底烧瓶中,加95%乙醇溶液100mL回流提取2h,提取3次,过滤,静置12h。回收乙醇浓缩至20mL,取1mL放入100mL的容量瓶中,加甲醇定容至刻度,即每毫升溶液相当于0.01原药材。于0.45μm微孔滤膜滤过,作为供试品溶
4、液。2.2.5系统适用性考察在上述色谱条件下,分别吸取对照品溶液和供试品溶液各20μL,注入液相色谱仪,测定。结果表明,供试品中白头翁皂苷B4与其相邻峰的分离好,保留时间适中(近8min)。结果见图1。2.2.6精密度试验精密吸取对照品溶液20μL,注入液相色谱仪中,平行测定5次,在上述色谱条件下测定,对照品峰面积的RSD＝0.72%。结果表明精密度良好。2.2.7稳定性试验精密吸取同一供试品溶液20μL,注入色谱仪中,在上述色谱条件下,于0、2、4、6、8、12、24h范围内测定,结果表明,供试品溶液在24h内稳
5、定性良好,供试品白头翁皂苷B4峰面积RSD＝1.20%。2.2.8重复性试验取滁州凤阳白头翁100g,粉碎、混匀。分为5份(各20g),照供试品溶液制备项下操作,制成供试品溶液,在上述色谱条件下测其白头翁皂苷B4的峰面积,RSD＝0.80%,表明重复性良好。2.2.9回收率试验精密称取已知皂苷B4含量的样品0.50g,分别加入皂苷B4对照品适量,依供试品溶液的制备方法处理成5份,按上述色谱条件进样分析。回收率(n＝5)为99.5%,RSD＝1.10%。2.3不同来源白头翁皂苷B4含量比较(见表1)表1不同来源白头翁
6、皂苷B4含量测定结果（略）3讨论地理环境和气候条件是有效成分积累的基础2,所以,来源于不同地区的白头翁药材,白头翁皂苷B4含量有一定的差异。样品C、E、F产地均为安徽,为什么含量相差如此之大？经我们多年研究表明,一是白头翁为多年生草本植物,不同的采收时间对其含量有影响；二是白头翁在干燥过程中存在酶解现象,所以杀酶后再50℃干燥,其含量较高；三是白头翁皂苷为水溶性物质,饮片切制过程中润洗不当可导致其丧失,故饮片中其含量较低。中药材和饮片是中药质量源头,其真伪优劣直接影响到中成药的质量,也关系到中医临床疗效和患者的用药
7、安全3。有效成分的含量与产地、采收时间及加工方法密切相关。本试验采用高效液相色谱法,通过比较不同来源白头翁其皂苷B4的含量,为白头翁药材的选用与加工提供了科学数据。【
