非小细胞肺癌血清及癌组织中egfr蛋白定量检测

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1、非小细胞肺癌血清及癌组织中EGFR蛋白定量检测【摘要】目的:探讨EGFR蛋白定量水平与非小细胞肺癌(NSCLC)的临床生物学行为及预后的关系.方法:采用双抗体夹心ELISA法定量检测30例NSCLC患者及17例良性肺疾病和健康对照者血清和组织中EGFR蛋白水平.结果:30例NSCLC患者血清和癌组织中EGFR蛋白水平升高(P<0.01),且EGFR蛋白水平与NSCLC患者TNM分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05).但NSCLC患者术前血清EGFR蛋白水平与术后3d及10d的血清水平无统计学差异(P>0.05).结论:

2、EGFR蛋白水平与NSCLC的发生、发展和转移密切相关,血清EGFR蛋白水平可作为评估NSCLC进展、复发和预后的有价值指标.【关键词】癌非小细胞肺受体表皮生长因子酶联免疫吸附测定  0引言  近年来全球肺癌的发病率和死亡率迅速上升,在许多国家和地区跃居各种肿瘤之首.随着分子生物遗传学研究的深入,人们试图用分子手段去预防、诊断和治疗肺癌.表皮生长因子受体(EpidermalGroL,分离血清,低温(-80℃)冻存待检.另外,良性病例组及肺癌病例组均于手术当日切取病变组织,称重后制作成组织匀浆待检.  1.2.2结果判定根

3、据EGFR标准品不同浓度及其对应的吸光度(A值)制作标准曲线,计算回归方程,得出EGFR浓度与吸光度之间的直线方程,再根据样本的吸光度,利用回归方程计算出样本中EGFR浓度.血清样本中EGFR浓度再乘以稀释倍数,得出最终结果,单位为μg/L.组织匀浆样本中EGFR浓度再除以各组织匀浆样本总蛋白的浓度,得出单位重量组织匀浆样本中EGFR浓度,单位为μg/g.  统计学处理:用SPSS13.0软件包进行统计学处理.考马斯亮兰法和ELISA检测的标准曲线通过直线回归分析获得.数据采用x±s表示,组间比较采用单因素方差分析,两两

4、比较采用LSDt检验,两变量关系研究采用相关性分析法.P<0.05为差异有统计学意义.  2结果  2.1NSCLC和良性病例及健康对照组术前血清中EGFR含量的比较NSCLC和良性病例及健康对照组术前血清EGFR含量分别为16.4±3.6,9.2±3.8和9.0±2.4μg/L,3组之间EGFR含量有统计学差异(P<0.05).  2.2NSCLC和良性病例组组织匀浆中EGFR含量的比较NSCLC组和良性病例组组织匀浆中EGFR含量分别为93±23,64±19μg/g,有统计学差异(P<0.05).  2.3NSCL

5、C患者术前血清及癌组织匀浆中EGFR含量与肺癌病理特征的关系NSCLC患者术前血清及癌组织匀浆中EGFR含量与有否淋巴结转移及TNM分期之间有统计学差异(P<0.05),与肿瘤大小、细胞分化程度之间无统计学差异(P>0.05,表1).  2.4NSCLC和肺良性病患者术前及术后血清中EGFR含量的动态变化NSCLC患者术前1d、术后3d及术后10d血清中EGFR含量分别为16±3,16±3和15±3.2μg/L,术前1d与术后3d及术后10d相比无统计学差异(P=0.635).术后10d血清中EGFR含量与良性病例组及健

6、康对照组血清中EGFR含量之间仍存在统计学差异(P=0.043).表1NSCLC患者术前血清及癌组织匀浆中EGFR含量与肺癌病理特征的关系(略)  2.5NSCLC患者术前血清中EGFR含量与癌组织匀浆中EGFR含量的相关性通过相关性分析,NSCLC患者术前血清中EGFR含量与肺癌组织匀浆中EGFR含量具有相关性,其相关系数为0.845(P<0.01),说明两者之间呈正相关.  3讨论  肺癌是目前全球发病率和死亡率最高的肿瘤之一,其中约85%为非小细胞肺癌(NSCLC).虽然目前内外科技术有了较大改进,但NSCLC患者

7、的5a生存率仍没有得到明显改善.因此寻求新的诊断、治疗NSCLC的措施十分必要.EGFR及其信号传导通路在正常细胞的增殖调控以及人类肿瘤的发生、发展中的作用日益引起人们的重视.EGFR酪氨酸激酶域活化[1]后主要通过RasMAPK通路、PI3KAkt通路以及非经典的STAT通路等把各种细胞信号传递到细胞核内,调控生长、分裂等细胞正常生物反应[2].肿瘤细胞中存在EGFR信号传导通路如EGFR过度表达、EGFR突变等的异常,从而促进细胞不断增殖并抑制其凋亡,导致生长调节失控;此外还可以促进肿瘤新生血管的生成、提高肿瘤细

8、胞的迁移和侵袭能力[3].对EGFR信号的干扰能够阻断肿瘤细胞的增殖,抑制肿瘤生长,为以EGFR为靶向的肿瘤治疗提供了理论基础和实验依据[4].然而目前对EGFR与NSCLC肿瘤分期、淋巴结转移、预后等临床病理特征关系的认识仍存在争论,这与用于检测EGFR的方法存在一定的局限性有很大关系.本实验采用ELISA法定量检

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