非小细胞肺癌组织中 EGFR、HER-2蛋白的表达变化及意义-论文.pdf

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1、山东医药2014年第54卷第31期非小细胞肺癌组织中EGFR、HER一2蛋白的表达变化及意义李宗军，沈毅，唐东方，金翔凤，王耀鹏，矫文捷，隋爱华，刘玉洪(青岛大学医学院附属医院，山东青岛266003)摘要：目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表皮生长因子受体(EGFR)、人类表皮生长因子受体2(HER一2)蛋白表达变化，并探讨其意义。方法采用免疫组化方法检测68例NSCLC组织和20例癌旁组织中EGFR、HER一2蛋白的表达，并分析两者问及与肿瘤临床病理参数的关系。结果EGFR与HER-2蛋白在NSCLC组织中的表达阳性率分别为54．4％、66．1％，在癌旁组织中均未见表达，两两比较

2、P均<0．05；EGFR蛋白表达与NSCLC病理类型及有无淋巴结转移有关，HER一2蛋白表达与肿瘤TNM分期及有无淋巴结转移有关(P均<0．05)；EGFR与HER一2蛋白表达呈正相关(P<0．05)。结论EGFR、HER-2蛋白在NSCLC组织中呈高表达，两者可能协同参与肿瘤发生、发展、侵袭及转移。关键词：非小细胞肺癌；表皮生长因子受体；人类表皮生长因子受体2；免疫组织化学方法doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2014．31．031中图分类号：R734．2文献标志码：B文章编号：1002—266X(2014)31081-03肺癌是世界上病死率最高的恶性肿瘤之一，

3、其浸润，距肿瘤病变>5em)20份，10％甲醛中性缓冲中约85％是非小细胞肺癌(NSCLC)¨，5年生存率液固定、石蜡包埋，4m厚连续切片。仅为20％～25％，死亡原因主要是肿瘤的局部侵袭1．2试剂鼠抗人EGFR单克隆抗体、鼠抗人及远处转移。表皮生长因子受体(EGFR)是癌基因HER-2单克隆抗体及sP免疫组化试剂盒，均购自C—erbB-2产物的同源物，具有酪氨酸激酶的活性，其北京康为世纪生物科技有限公司，其余试剂为国产异常表达与肿瘤细胞的黏附、侵袭、转移及凋亡抑制分析纯。有关；人类表皮生长因子受体2(HER．2)基因是1．3EGFR及HER-2蛋白的检测方法取上述石蜡重要的癌基因之一，

4、其高表达与肿瘤细胞增殖、侵切片，行常规HE染色及免疫组化sP染色。①脱蜡袭、迁移和血管生成有关J。NSCLC组织中EGFR、水化：60c《=烤片Ih，二甲苯脱蜡2次、每次5min，依HER一2蛋白表达的联合检测国内少见报道。本研次浸入梯度乙醇和蒸馏水中各5min水化。②抗原究利用免疫组化方法检测了EGFR、HER-2蛋白在修复：将pH值为6．0的0．01mol／L柠檬酸缓冲溶液NSCLC组织中的表达，分析了两者问及与肿瘤临床加入高压锅内，修复切片完全浸于修复液中后盖上压病理特征的关系，旨在为NSCLC的诊治提供新思力锅盖，加热至均匀喷气，1～2min后压力锅离开热路。源，自然冷却至室温，

5、取出切片，蒸馏水淋洗，PBS漂1资料与方法洗2次、每次3min。③封闭、染色：滴加试剂1(内源1．1临床资料青岛大学医学院附属医院胸外科性过氧化物酶封闭液)，室温孵育10min，PBS充分淋2011年10月～2012年10月收治的的NSCLC患者洗；滴加试剂2(封闭用正常羊血清工作液)，室温孵68例，男42例，女26例；年龄42～78岁(中位年龄育10min，甩干。分别滴加EGFR、HER-2一抗工作62岁)，其中<60岁35例、≥60岁33例；有吸烟史液(1：100、1：50)，室温孵育1h，PBS充分淋洗。滴加39例。均经病理检查确诊，其中腺癌48例，鳞癌20试剂3(生物素标记羊抗鼠

6、二抗工作液)，室温孵育10例；低分化27例，中高分化41例；TNM分期I、Ⅱmin，PBS充分淋洗；滴加试剂4(HRP标记的链霉亲期40例，Ⅲ期28例；有淋巴结转移37例。患者术和素)，室温孵育10min，PBS充分淋洗。滴加DAB前均未接受过化疗、放疗及免疫治疗。留取手术切显色工作液显色，显色时间1～5min，显微镜下观察除的肿瘤组织68份及癌旁正常肺组织(无癌细胞达最佳显色效果后自来水冲洗；甩去自来水，滴加适量改良型苏木素以覆盖整个组织，复染30s一3min，通信作者：刘玉洪自来水冲洗复染液，PBS或去离子水浸泡切片3～581山东医药2014年第54卷第31期min，使胞核反蓝；脱水

7、、透明、封片、镜检。EGFR表达2结果别性男女龄年烟吸有无病理腺鳞臌化分低骱中巴淋性阴性阳Ⅲ期Ⅲ以细胞质和细胞膜呈棕黄色或棕褐色颗粒为阳性，2．1EGFR、H∞E∞R史-2蛋白表癌达癌及与NSCLC临床病芟比分砖HER-2表达以细胞膜呈棕褐色颗粒状为阳性。着色理参数的关系NSCLC组织及癌旁化组移织中EGFR强度判定标准：不着色为0分(阴性)，轻度着色为1蛋白阳性表达者分别为37例(54．4％)、0例，HER一分(弱阳性)，中度着色