实时pcr和颗粒凝集法检测儿童呼吸道肺炎支原体感染的价值分析

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1、实时PCR和颗粒凝集法检测儿童呼吸道肺炎支原体感染的价值分析1.湖南省郴州市第一人民医院检验科423000；2.深圳北京人学深圳医院检验科518000摘要.•A的:分析实时PCR和颗粒凝集法检测儿童呼吸道肺炎支原体感染的价值。方法：资料随机选自2013年7月至2014年7月本院儿科治疗的呼吸道感染患儿513例，采用颗粒凝集法与实时PCR,分别检测患儿的肺炎支原体抗体(MP-Ab)与肺炎支原体核酸(MP-DNA)，对比分析两种方法的检测结果，并分析不同季节的儿童呼吸道肺炎支原体感染率。结果：应用实时PCR检测的MP-Ab阳性率明显高于采用颗粒凝集法检测的MP-DN

2、A阳性率，两种检测方法的一致性不高，对比差异具有统计学意义(R<0.05)；儿童冬季的呼吸道肺炎支原体感染率高于其他三个季节，对比差异较为明显(P<0.05)o结论：实时PCR检测呼吸道肺炎支原体感染率高于颗粒凝集法检测，且儿童的肺炎支原体感染具有季节性差异。关键词：实时PCR;颗粒凝集法；儿童；肺炎支原体；价值肺炎支原体是诱发儿童呼吸道感染的常见病原体，且常伴有多器官、多系统损害，严重威胁患儿的身体健康，因此其早期诊断和治疗十分关键［1］。本次研究通过选取513例呼吸道感染患儿，采用实时PCR与颗粒凝集法分别检测患儿的肺炎支原体抗体(MP-Ab)与肺炎支原体核

3、酸(MP-DNA),对比分析两种检测法的结果，以期为诊断与治疗提供准确依据，现将结果报告如卜。1.资料与方法1.1一般资料资料随机选自2013年7月至2014年7月本院门诊与住院治疗的呼吸道感染患儿513例，男327例，女186例;年龄为0.7-12岁，平均(6.35±1.03)岁。1.2检测方法肺炎支原体抗体（MP-Ab）检测：取患儿l-2mL的外周血，以2100r/min的速度进行lOmin的离心以分离血清，采用（珠海丽珠试剂股份奋限公司生产的肺炎支原体抗体检测试剂盒（被动凝集法））检测患儿体内的肺炎支原体抗体，检测应用被动凝集法，抗体滴度为&

4、ge;l:40呈现阳性，操作依产品说明书。肺炎支原体核酸（MP-DNA）检测：取患儿深部痰液，以浓度为4%的NaOH液化并以盐水洗涤，分离核酸后应用实吋PCR检测，试剂由（中山大学达安基因股份有限公司）生产，具体实验操作依据试剂的的详细说明书。1.3统计学分析研究资料均采用SPSS21.0软件进行分析处理，检测结果的比较以McNemar’s进行检验，一致性检测kappa进行检验，不同季节的感染率对比应用X2进行检验，当P<0.05吋，表明比较差异具有统计学意义。1.结果2.1肺炎支原体抗体与肺炎支原体核酸的检测结果513例患儿中肺炎支原体核酸阳性奋2

5、8例，阳性率为5.46%,肺炎支原体抗体的阳性有114例，阳性率为22.22%;肺炎支原体核酸或肺炎支原体抗体任一方法的阳性110例，阳性率19.49%，二者同为阳性15例，占2.92%,两种检测方式的无良好的一致性，肺炎支原体抗体阳性率明显高于肺炎支原体核酸阳性率，对比具有统计学意义（P<0.05）,详见表1。2.2儿童不同季节的肺炎支原体检出率将两种方法测出的阳性例数均作为肺炎支原体感染，冬季的感染率明显高于其他三个季节（P<0.05）,而春、夏及秋的感染率无明显差异，详见表2。2.讨论近年来肺炎支原体感染率不断上升，其症状加重，发病年龄范围也在扩大，严重影

6、响人体健康与生活质量，已冇研究表明及时的诊断与治疗十分关键。诊断需要实验室病理学分析作为依据，S前使用的检测方法较多，但均因耗吋太长而不利于病情的及吋诊断［2】。本次研究通过选取513例呼吸道肺炎支原体感染患儿，采用实吋PCR与颗粒凝集法分别检测患儿的肺炎支原体抗体(MP-Ab)与肺炎支原体核酸(MP-DNA),对比分析两种检测法的结果。研究结果显示，应用实吋PCR检测法检出的肺炎支原体的阳性率明显优于颗粒凝集法，其中实吋PCR检测法检出的阳性率为22.22%，明显高于颗粒凝集法的5.46%，对比差异较为显著，具有统计学意义，表明实吋PCR检测法比颗粒凝集法对肺

7、炎支原体的敏感性更高，由此可知实吋PCR检测法可谓临床诊断肺炎支原体感染提供可靠依据，这与周喜友［3］等人的研究结果相一致。肺炎支原体通过空气传播，四季均可能发生，现奋资料表明不冋地区的肺炎支原体感染因季节，周喜友等对深圳的感染率进行研究，发现其冬季感染率最高，这与本文研究结果基本相似，本次研究结果显示本地的肺炎支原体感染率以冬季最高，感染率为30.33%，明显高于其他季节，其他三个季节无明显差异。而孙福明［4］对海岛地区的感染情况进行研究，发现海岛的肺炎支原体感染率以春季最低，秋季最高，夏冬季无明显差异，这表明肺炎支原体的感染随地域和季节的变化而发生变化。综上

8、所述，因肺炎支原体感染缺