t―spot.tb试验在结核性胸膜炎诊断中的应用价值

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1、T一SPOT.TB试验在结核性胸膜炎诊断中的应用价值【摘要】目的研究结核性胸膜炎患者实施T-SPOT.TB试验的诊断意义。方法25例合并胸腔积液的结核性胸膜炎患者作为观察组，另选择同时期25例肺炎渗出性胸膜炎且无原发结核患者作为对照组，对两组胸腔积液实施T-SPOT.TB结核试验，观察记录检测结果。结果观察组检测结果阳性23例，阴性2例，敏感性92.0%(23/25);对照组检测结果阳性5例，阴性20例，敏感性20.0%(5/25)。观察组敏感性大于对照组(P【关键词】T-SPOT.TB试验；结核性胸膜炎；诊断DOI：10.14163/j.c

2、nki.ll-5547/r.2016.13.086作为胸腔积液发生的常见原因，结核性胸膜炎于国内胸腔积液患者中占49.5%〜54.5%，因其特异性表现缺乏，细菌学方法检测阳性率不高，且胸膜活检创伤性也使其在临床应用中受到限制［1，2］。该病初诊确诊难度较大，T细胞斑点试验(tcellenzyme-linkedimmunospot，T-SPOT)主要由酶联免疫斑点检测技术(enzyme-linkedimmunospot,ELISPOT)发展而来，其可以于单细胞水平针对细胞因子的分泌状况进行检测［3］。主要通过事先进行设计的抗体捕获细胞所分泌的特

3、殊细胞因子通过酶联斑点显色表现出来。通常检验Id内可以完成，从而为患者减少因检验而滞后的治疗时间。T-SPOT.TB试验具有较高的敏感性、特异性及可重复性，可以从20〜30万的细胞中将单个蛋白分泌细胞检测出来，需要的标本数量少，操作便利。本文就结核性胸膜炎患者实施T-SPOT.TB试验的意义进行研究，现报告如下。1资料与方法1.1—般资料收集2014年1月〜2015年3月到本院进行检查的结核性胸膜炎合并有胸腔积液患者25例作为观察组，其中男14例，女11例；年龄21〜69岁；平均年龄(32.2±12.5)岁，25例患者中结核性胸膜炎合并单侧胸

4、腔积液患者13例，合并双侧胸腔积液患者12例；诊断依据如下：有呼吸系统典型结核中毒症状、结合抗原阳性、结核菌素试验(PPD试验)强阳性、痰液抗酸杆菌阳性、结核抗体5项多项阳性者，上述检查阳性符合3个以上即可确诊。另选择同时期25例肺炎渗出性胸膜炎且无原发结核患者作为对照组，男13例，女12例;年龄20〜64岁；平均年龄(31.2±11.1)岁；对照组中2例胸腔积液与肺纤维化有关，1例与类风湿性关节炎有关。所有研宄对象及相关家属均签署知情同意书。1.2方法胸水样本收集：采集胸腔积液50ml后2h内常规分离淋巴细胞用于检测。ELISPOT过程:在

5、活化后预包被好抗体的平板中，每孔加入100ul，细胞浓度为2X105个细胞/孔。背景阴性对照孔中不加入任何刺激物。阳性对照每孔加入5PHA，终浓度5ug/mlo实验孔加入抗原ESAT-6，终浓度为5ug/?Lo然后盖上板盖，放入37°C,5%CO2培养箱培养16〜24h。第2天洗板后，加入检测抗体孵育1h,洗板后再加入亲和素孵育1h。最后加入显色剂显色。待显色洗板后，Elispot斑点计数，并记录斑点的各种参数。1.3结果判定根据T-SPOT.TB试剂盒使用说明书，如果阴性对照孔斑点形成细胞(SFC)