益母草对糖尿病肾病大鼠血液流变学及转化生长因子 β1表达的影响

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1、益母草对糖尿病肾病大鼠血液流变学及转化生长因子β1表达的影响　　【Abstract】AIM:ToobservetheeffectsofLeonursHeterophyllusSinggrolydividedinto4group:normalcontrolgroup,modelgroup,LHStreatedgroupandRadixAstragalitreatedgroup.Thelatter2groupsinisteredsamevolumenormalsaline.Diabeticnephropathymodelsmol/Lbuffer(pH4.4),andfedhighlipid,

2、highglucosediets.Talsmol/Lodels.Theirbodymassodelingandsacrifice,andthekidneysalin.24hurinemunohistochemistryeterployedtodeterminethechangeofbloodrheology.CONCLUSION:LeonursHeterophyllusSayberelatedtoitsimprovingtheindexofbloodrheology.　　【Keyorheology;transforminggromol/L,pH为4.4的枸椽酸缓冲液配成1%的浓度，以50m

3、g/kg的剂量一次性腹腔注射，同时喂养高脂高糖半合成高热量饲料，2mol/L者，确定为模型成功.所有大鼠均自由饮食，分别于造模和杀检时测量体质量，并于杀检时称量肾质量，用代谢笼收集24h尿液.实验8ellitus，DM)发生肾脏病并发症或对已经出现DN延缓其发展至终末期肾病(endstagerenaldisease，ESRD)，达到“既病防变”目的.临床上益母草常用于糖尿病慢性并发症的防治，药理研究表明益母草具有抗凝、降脂、抑制血小板聚集等作用［1-2］，但对其用于防治糖尿病肾病机制研究尚未见深入报道.我们以链脲佐菌素(STZ)所致糖尿肾病大鼠为实验对象，观察益母草对糖尿病肾病血流变学及转

4、化生长因子β1的影响.　　1材料和方法　　1.1材料STZ，Sigma公司产品；葡萄糖测定试剂盒:浙江东殴生物有限公司，批号041001.即用型SABC免疫组化染色试剂盒购自武汉博士德生物工程公司.PBS(0.01mol/L,pH7.2~7.4),浓缩型DAB试剂盒和抗体稀释液均为北京中杉金桥生物技术有限公司产品.752分光光度计，上海第三分析仪器厂.UV2000分光光度计，尤尼柯（上海）仪器有限公司.血液流变仪:北京普利生仪器中心.普通光学显微镜，日本Olympus公司.益母草水煎液：原药材由河南省药材公司提供，经河南中医学院中药鉴定教研室鉴定益母草为唇形科植物益母草（Leonursh

5、eterophyllusSL，煮沸60min，双层纱布过滤.二煎加水1000mL，煮沸60min，双层纱布过滤.合并滤液，浓缩至250mL（相当于每1mL含生药1g）放至冰箱4℃冷藏备用.黄芪水煎液：原药材由河南省药材公司提供，经河南中医学院中药鉴定教研室鉴定为豆科植物蒙古黄（Astragalusmemeranaceus）的根，按药典方法［3］炮制后.称取黄芪（切成片的干燥品）250g，浸泡1h，加水至2000mL，煮沸60min，双层纱布过滤.二煎加水1000mL，煮沸60min，双层纱布过滤.合并滤液，浓缩至250mL（相当于每1mL含生药1g）放至冰箱4℃冷藏备用.　　1．2方法　　1

6、．2．1动物分组取健康SD大鼠48只，体质量180～220g，购自河南省实验动物中心.随机等分为4组：正常组、模型组、益母草组、黄芪组.　　1．2．2给药益母草、黄芪临床用量为15g［3］，大鼠每千克1d灌服生药量为15／60×20（倍）=5g/(kg·d).益母草组、黄芪组分别灌服5g/(kg·d)益母草、黄芪水煎液，正常对照组、模型对照组灌服相同体积生理盐水.　　1．2．3造模［4］造模前禁食12h.将STZ用0.1mmol/L,pH为4.4的枸椽酸缓冲液配成1%的浓度，以50mg/kg的剂量一次性腹腔注射，同时喂养高脂高糖半合成高热量饲料，2mol/L者，确定为模型成功.所有大鼠均自由

7、饮食，分别于造模和杀检时测体质量，并于杀检时称肾质量，用代谢笼收集24h尿液.　　1．2．4取材实验8L/L的过氧化氢去离子水，室温下孵育10min以灭活内源性过氧化物酶，蒸馏水冲洗3×5min；将切片放入盛有抗原修复液（柠檬酸缓冲液，0.01mol/L，pH6.0）的耐热容器内，于微波炉内加热煮沸后断电，反复3～5次，进行抗原修复，室温冷却，PBS冲洗3×5min；滴加100mL/L山羊血清工作液，室温孵育