理肺通络方对肺炎支原体肺炎大鼠肺泡灌洗液中sig

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1、理肺通络方对肺炎支原体肺炎大鼠肺泡灌洗液中sIg【摘要】目的观察肺炎支原体肺炎大鼠肺泡灌洗液sIgA的含量及理肺通络方的干预作用。方法将40只大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、西药组，每组10只。一次性滴鼻感染肺炎支原体国际标准株(MPFH)菌液(每毫升含肺炎支原体107变色单位)造成肺炎支原体肺炎模型。造模第11d起，除正常组外，其余各组分别灌服生理盐水、理肺通络方水煎剂、阿齐霉素溶液，2mL/只。中药组连续服药10d，西药组前、后3d灌药液，中间4d灌生理盐水。在治疗的第11d处死动物，观察各组大鼠血清MP

2、IgM滴度及右肺组织

3、形态学，采用放免双抗夹心法检测sIgA含量。结果模型组大鼠血清MP

4、IgM阳性，光镜下显示肺组织炎性细胞浸润和组织损伤明显;与正常组比较，模型组、中药组、西药组肺泡灌洗液中sIgA含量显著降低，有高度统计意义（P<0.01）;与模型组比较，中药组、西药组sIgA含量显著升高（P<0.01）;中药组与西药组比较有统计意义（P<0.05）。结论肺炎支原体肺炎大鼠肺泡灌洗液sIgA含量下降，理肺通络合剂能提高呼吸道局部sIgA含量，且优于西药阿齐霉素，可能有助于降低再次感染的几率。【关键词】肺炎支原体肺炎；理肺通络方；肺泡

5、灌洗液；分泌型IgA分泌型免疫球蛋白A（sIgA）广泛存在于血液及各种分泌液中，它是分泌液重要的免疫蛋白种类，是机体特异性的防御因素。本实验观察了理肺通络方对肺炎支原体肺炎大鼠肺泡灌洗液sIgA含量影响，探讨本方对于增加sIgA含量、提高气道局部防御功能方面的作用。1材料及方法1.1材料选择6周龄SPF级雄性PFH)菌液(每毫升含肺炎支原体107变色单位)0.3mL/只，正常组予生理盐水0.3mL/只滴鼻。造模第11d起，分别灌胃灌服生理盐水、理肺通络方水煎剂、阿齐霉素溶液，2mL/只。模型组、中药组连续灌胃10d；西药组前、后3d灌服

6、药液，中间4d灌服生理盐水。在治疗的第11d处死动物，摘眼球取血，检测正常组、模型组血清MP

7、IgM。暴露大鼠胸腔，结扎右肺，左肺用生理盐水2mL行肺泡灌洗，灌洗液置-70℃冰箱中备用，检测各组sIgA含量。取肉眼可见病变的右下叶肺组织,用10%福尔马林固定、石蜡包埋、切片、HE染色,光学显微镜下观察。1.2.2肺泡灌洗液sIgA检测本试剂盒采用放免双抗夹心法，可检测血清及各种分泌液中的sIgA。采用的双抗体均是针对sIgA中分泌成分SC的特异抗体。包被在聚苯乙烯球上的抗体与样本中的sIgA形成免疫复合物“抗体-sIgA”，然后加入标记

8、抗体125I-抗体，形成三层夹心免疫复合物“抗体-sIgA-125I-抗体”。测定每个小球上的125I放射性计数率(cpm)值，与标准曲线或标准值cpm对照计算，即可知样品中sIgA含量。检测操作步骤首先对样品进行1∶10稀释，具体步骤见表1。表1sIgA放射免疫操作步骤各管cpm值先减去S0cpm值后再计算，用双对数直角坐标作图（横坐标为浓度，纵坐标为cpm值），查出浓度应乘以稀释倍数即为原标本浓度。1.2.3统计学处理所有测定指标均采用±s表示,组间比较采用ｔ检验,以P<0.05、P<0.01表示有统计意义。2实验结果2

9、.1大鼠血清Mp

10、IgM滴度及肺组织形态学检查实验结果显示，模型组大鼠血清MP

11、IgM滴度显著增高（见表2）。光镜下HE染色，正常组肺组织仅个别大鼠小支气管有少数淋巴样细胞浸润；模型组可见肺泡间隔增宽，支气管、细支气管周围与肺泡间隔内毛细血管明显充盈，有程度不等的淋巴样细胞，个别单核细胞及分叶核白细胞浸润，间质呈明显的炎性改变（见图1、图2）。以上结果说明造模成功。表2大鼠不同稀释倍数血清MP

12、IgM滴度阳性例数肺泡壁未见增厚，肺泡腔内未见炎性渗出物。肺内小支气管及间质小血管周围未见明显炎性病变。图2光镜下模型组肺组织形态学观察×200

13、增宽的肺泡间隔内毛细血管明显充盈，可见程度不等的淋巴样细胞，个别单核细胞及分叶核白细胞浸润，间质呈明显的炎性改变。2.2各组大鼠肺泡灌洗液sIgA的含量比较实验结果显示，与正常组比较，模型组、中药组、西药组肺泡灌洗液sIgA含量显著降低，有高度统计意义（P<0.01）。与模型组比较，中药组、西药组sIgA含量显著升高（P<0.01）,说明理肺通络合剂和阿齐霉素均可不同程度地提高呼吸道局部sIgA含量；中药组与西药组比较有统计意义（P<0.05）,提示理肺通络合剂对于提高sIgA含量方面作用优于阿齐霉素。见表3。表3各组

14、大鼠肺泡灌洗液sIgA的含量比较注：与正常组比较＃P<0.01；与模型组比较★P<0.01；与中药组比较△P<0.053讨论　　肺炎支原体(MP)是呼吸道常见致病菌,主要通过飞沫或气溶胶传