资源描述：
《蓖麻细胞素p450基因rnai植物表达载体构建及遗传转化之研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、蓖麻细胞素P450基因RNAi植物表达载体构建及遗传转化之研究第一章文献综述蓖麻(RicinusmunisL.)为大戟科蓖麻属的一种油料作物，是起源于非洲东部阿比西尼亚（Abyssinia，今埃塞俄比亚）的一种热带多年生灌木，现在已分布于整个热带和亚热带，也适宜温带地区种植(Chanetal.,2010)。蓖麻的主要经济价值体现在高含油量的蓖麻籽上。据2011年全国蓖麻年会报道，2011年，印度年收获的蓖麻籽产量不少于130万吨，位居世界第一位，而中国只有30万吨左右，远远不能满足蓖麻加工企业的需求。
2、国内大多数蓖麻化工企业原材料的供给主要靠从印度进口原油，改变这种现状应该从提高农民种植蓖麻的积极性入手。蓖麻种植实践表明，单产水平低和不易收获使得种植蓖麻比较效益不高，造成蓖麻播种面积的减少。因此，如何解决这两大难题是蓖麻栽培和育种工必须深入思考的问题。发生在20世纪50年代初，以水稻、小麦矮秆和半矮秆为主要特征的第一次绿色革命解决了19个发展中国家粮食自给问题。可见矮生种质对产量性状的重要作用。植株适当矮化进而改善株型、增大群体结构是提高蓖麻产量的有效途径之一，但是目前还没有适合大面积推广的矮秆品种
3、。传统上，采用选择育种的方法控制植物株高。通常，矮化植物由于特殊的观赏价值或是在机械压力诸如大风雨的条件下能够幸免于难而被选择保留下来。然而这种选择育种进程是相当缓慢的。有种能加快产生矮化植物的方法，即通过施用某种有机化合物，例如赤霉素生物合成抑制剂。然而这些化合物不但价格昂贵而且在植物的整个生活周期都必须使用，这就必然增加生产成本，其结果是增产不增收。杂交育种的方法可以加快矮化品种的培育进程，但需要大量的带有矮秆性状的种质资源。通过常规手段筛选蓖麻矮秆种质资源因其周期较长，已不能满足蓖麻种植业快速发
4、展的要求。分子生物学技术的发展为获得综合性状良好并且具备矮秆性状的蓖麻种质资源提供了有利条件。随着分子生物学研究水平的不断深入，技术手段的不断更新，在农业方面的应用也越来越广泛。但对于蓖麻等油料作物来说，分子水平的研究才刚刚起步。将分子生物学技术应用于蓖麻矮化种质资源的培育，在目前国内外可检索的文献中尚未见报道，利用RNAi技术创造蓖麻矮化种质资源更是全新的课题。该研究的实施将为蓖麻分子育种积累一定的理论基础与实践经验，会促进我国蓖麻等油料作物分子生物学研究的进步。并对矮秆蓖麻新品种选育和蓖麻产业的长
5、远发展都具有重要的理论意义和现实应用价值。1.1蓖麻的综合利用价值及生产存在的问题蓖麻全株均有利用价值。蓖麻籽粒含油量高达50-60%，出油率居油料作物之首，是同为油料作物大豆的2-3倍(Baldg/LZT+2.0mg/LNAA。子叶节对Kan较为敏感，适宜筛选浓度为250mg/L。外植体预培养2-3d，预培养培养基中添加20mg/LAS，侵染用农杆菌菌液OD600=0.8，侵染时间10min，共培养3d，可获得较高的遗传转化效率。利用300mg/Lcef可以有效抑制农杆菌的过度繁殖。抗性筛选再生的小
6、植株经PCR和Sounthenblot检测，证明植物表达载体pBI-P450-RNAi已转入蓖麻基因组中。通过Northern杂交证明转基因蓖麻的P450基因已沉默，转基因蓖麻叶片中过氧化物酶和酯酶同工酶与对照相比均缺失1条同工酶谱带。对转基因蓖麻的表型观察表明：植株明显变矮，叶片变小，叶色变深，证明蓖麻P450基因严重影响株高的发育，可以作为蓖麻的矮秆基因。iRNA表达载体的构建.基因组学与应用生物学,29(2):804-808.[3]常国斌,常洪,陈国宏,刘向萍,陈蓉,秦玉蓉.2008.新型小分子
7、RNA-piRNAs的研究进展.畜牧与兽医,40(2):103-106.[4]邓崇辉,孙强,王磊.1994.单雌蓖麻的遗传研究.吉林农业科学,3:31-34.[5]邓天福,王争艳,尉吉乾,王小姣.2008.蓖麻等植物提取物对两种储粮害虫的活性研究.河南农业科学,(3):70[6]邓艺,曾炳山,赵思东,刘英,裘珍飞,李湘阳,王曙.2010.乙酰丁香酮在农杆菌介导的遗传转化中的作用机制及应用.安徽农业科学,38(5):2229-2232.[7]戴素明,周成爱,谢炳炎,冯东昕,肖启明.2004.细胞色素P4
8、50表达在植物防御反应中的作用.石河子大学学报(自然科学版),(22):184–187.[8]丁兰.王涛.景宏伟.高超.2010.蓖麻的组织培养.西北师范大学学报,46(1):79-83.[9]丁香.2006.解读诺贝尔医学奖成果RNA干扰机制和医学应用.医疗保健器具,11:4.[10]代容春.2009.农杆菌介导的植物转基因研究中抑菌剂的应用现状.福建轻纺,(25):36-38.(责任编辑：gufeng)
