马齿苋活性成分体内外抗癌作用的初步筛选

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1、马齿苋活性成分体内外抗癌作用的初步筛选作者：李玉萍，曾宪伟，叶军，苏虎,刘华，周春丽【摘要】目的观察马齿苋活性成分对人肺腺癌细胞系(A-549cell)、人喉表皮样癌细胞系(Hep-2cell)、人宫颈癌细胞系(Helacell)和人恶性胚胎横纹肌瘤细胞系（RDcell）生长的影响。方法体外培养条件下用不同浓度的马齿苋活性成分处理4种癌细胞，通过溴化二甲噻唑二苯四氮唑（MTT）试验法测定癌细胞的增殖；同时处理S180荷瘤小鼠，观察荷瘤小鼠的体重、瘤重、死亡率和抑瘤率。结果马齿苋生物碱对离体培养的A-549肺癌细胞、Hela细胞和Hep-2细胞的增殖均具有明显抑制作用

2、,马齿苋多糖对Hela细胞有较强的抑制作用,马齿苋脂肪酸对Hep-2细胞有一定的抑制作用，马齿苋黄酮对RD细胞有很强的抑制作用，并存在浓度剂量效应，高浓度抑制作用强。结论马齿苋活性成分能选择性地杀伤癌细胞，有进一步研究的潜在价值。【关键词】马齿苋；活性成分；溴化二甲噻唑二苯四氮唑试验；抗肿瘤活性　　Abstract：ObjectiveToobservetheeffectsoftheactiveconstituentsfromPortulacaoleraceaL.ontheproliferationoffourhumantumorcelllines.MethodsTh

3、eanti-proliferationactivitiesofactiveconstituentsfromPortulacaoleraceaL.uponA549cell,Helacells,Hep-2cellandRDcellorPortulacaoleraceaL.onthetransplantedtumorcellsofSarcinoma180ice.ResultsRaorcelllinesinadosedependentmanner,respectively.Theexperimentsinvivoindicatedthatthefouractiveconst

4、ituentshadcertaininhibitionagainstthecellsofimplantedtumorascitesSarcinoma180.ConclusionTheactiveconstituentsfromPortulacaoleraceaL.haveselectivecytotoxicitytothetumorcellsandisoreffect　　恶性肿瘤是目前危害人们生命和健康的严重疾病之一，而化学合成的抗癌药常常对人体正常细胞产生毒副作用，因此从天然动、植物中寻找毒性低、疗效高的抗癌活性成分仍是近年来国内外科学工作者研究的热点之一。药食两

5、用植物马齿苋含有去甲基肾上腺素、生物碱、香豆精类、黄酮类、多糖、多不饱和脂肪酸等活性成分［1］，其中马齿苋多糖具有抗癌作用已被报道［2，3］。为了探讨马齿苋其它活性成分的抗癌作用，本实验对马齿苋总提取液、多糖、总黄酮、生物碱、不饱和脂肪酸等活性成分进行了体内和体外抗癌作用实验研究,对马齿苋活性成分的抗癌活性进行初步筛选，为进一步系统研究马齿苋的药用价值提供理论依据。　　1仪器与材料　　1.1仪器与试剂RPMI1640培养液：美国GIBCO公司产品；胎牛血清（FBS）：杭州四季青生物工程有限公司产品；溴化二甲噻唑二苯四氮唑(MTT)、胰蛋白酶和二甲基亚砜(DMSO)为

6、AMRESCO公司产品；其余试剂均为国产分析纯(国药集团)。倒置荧光显微镜(IX-71)：日本OLYMPUS产品；二氧化碳培养箱(ThermoFormaSeries-II，美国ThermoScientific，Forma公司)产品；全自动酶标仪(MultiscanMk3,labsystems公司)产品。　　1.2材料新鲜马齿苋PortulacaoleraceaL.于2005-09购于江西省南昌市农贸市场，经本校药学院药理学教研室鉴定。用清水洗净，沥干水分，60℃鼓风干燥6h，粉碎备用。称取上述备用马齿苋干粉50g，加蒸馏水（按1∶30的比例分3次加蒸馏水），煮沸后煎

7、20min，取其上清液减压浓缩使其生药浓度为2g/L，得粗提取液，置4℃冰箱保存备用。同时，称取相同重量的马齿苋干粉，分别采用周晶［4］、上官新晨［5］、黄阿根［6］等的方法提取马齿苋粗多糖、不饱和脂肪酸、生物碱、黄酮及定量，所得样品4℃干燥保存备用。临用时配制使用。　　2方法　　2.1细胞株及体外抑瘤作用观察　　2.1.1肿瘤株选用人肺腺癌细胞(A-549cell)和人宫颈癌细胞(Helacell)由南昌大学医学院第二附属医院细胞研究室友情提供，人喉表皮样癌细胞(Hep-2cell)和人恶性胚胎横纹肌瘤细胞（RDcell）由江西省疾控中心友情提供。　　2.1.