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时间:2018-11-13
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1、大鼠慢性脑灌注不足时的运动诱发电位宁宁赵士福成戎川梁伟华【摘要】 目的制备大鼠慢性脑灌注不足模型,观察运动诱发电位(MEP)变化,研究慢性脑低灌注对脑传导功能的影响。方法采用双侧颈总动脉结扎制作慢性脑灌注不足动物模型,实验分为对照组、缺血半月组、缺血1月组和缺血2月组共4组。使用电刺激诱发,双下肢记录,刺激电极放于皮层运动区,记录电极置于对侧腓肠肌,记录皮层MEP,观察潜伏期和波幅变化。结果慢性低灌注期MEP潜伏期显著延长(P0.01),并随低灌注持续时间延长而出现MEP潜伏期延长更为明显。结论慢性低灌注可以引起脑内传导功能受损,临床上MEP可用来反映慢性脑灌注不足后轴索的功能状态。【关键
2、词】运动诱发电位;慢性脑灌注不足;大鼠 慢性脑灌注不足(CCH)在老年个体中普遍存在,是导致老年期认知障碍和运动障碍主要原因,长期反复损害易导致血管性痴呆,而传导功能损害是其重要机制之一〔1〕。本实验采用双侧颈总动脉结扎法制备大鼠CCH,对缺血不同时间进行运动诱发电位(MEP)检测,观察反映轴索传导功能改变的MEP变化及规律,来证明了慢性低灌注是白质传导、传输功能下降重要因素,为预防慢性低灌注状态提供新的途径。 1材料与方法 1.1实验动物及分组 选用纯种健康SpragueDag/kg,保证手术操作期间大鼠有自主呼吸。仰卧固定,颈前部去毛消毒后沿颈正中切开,分离出双侧颈总动脉,双重
3、丝线结扎。术中大鼠肛温保持在36.5~37.5℃,手术后动物被送至通风和有空调的房间饲养。对照组仅切开颈前,不结扎颈总动脉。 1.2.2经颅电刺激和记录 采用丹迪公司Keypoint四导诱发电位仪记录。大鼠MEP在安静的电屏蔽室(室温20~24℃)内记录。10%水合氯醛40mg/kg腹腔注射麻醉大鼠。电极选用EEG针电极,刺激电置于大鼠前囟后方1mm皮下,参考电极于矢状缝旁3mm,记录电极在对侧腓肠肌,鼻部电极针接地。电刺激信号为单个方波电脉冲,刺激强度5~12mA,波宽0.2ms。每个结果至少重复2次以获得稳定的波形。 1.3信号分析及统计学处理 对不同组间潜伏期均数进行比较,采用
4、两样本均数t检验;3组以上成组资料均值比较采用完全随机的单因素方差分析。应用SPSS11.0软件进行数据分析,定量数据均以x±s表示。 2结果 2.1行为学观察 双侧颈总动脉完全阻断后首先出现短暂惊厥,体温降低,呼吸减慢,翻正反射消失;术后早期观察动物运动减少,后肢呈“八字”,走路共济失调,或爬行和转圈;术后7d手术组已基本恢复,无明显的运动障碍。摄食饮水均与建模前无显著差异。 2.2对大鼠活动的大体观察 大鼠在电压超过2V出现整个头面部肌肉收缩运动,6V以上头可产生移位,所有大鼠完成刺激后无死亡及活动异常。 2.3MEP变化 2.3.1波幅变化 刺激阈值强度约为5~10mA
5、时,首先出现的是MEP的早期成分(潜伏期10ms),包括3~4个负向波,以前两个波最为明显;晚期成分潜伏期约为14ms左右,时程较宽、波幅较小而且不太稳定;大于40~50mA为超强刺激,潜伏期和波幅不再有明显改变;随着刺激强度逐渐增加,波幅逐渐增加,见图1。 2.3.2潜伏期变化 制模后半个月,实验组大鼠左、右MEP潜伏期较对照组显著延长,具统计学意义(P0.01)。实验组大鼠自身左右侧比较无统计学意义(P>0.05),对照组大鼠自身左右侧比较无统计学意义(P>0.05);制模后1个月,实验组大鼠左、右侧潜伏期较对照组延长,具统计学意义(P0.01)。实验组及对照组大鼠自身左
6、右侧比较无统计学意义(P>0.05);制模后2个月,实验组大鼠左、右侧潜伏期较对照组大鼠延长,具统计学意义(P0.01)。实验组及对照组大鼠自身左、右侧比较无统计学意义(P>0.05);对照组、术后半个月组、术后1个月组、术后2个月组大鼠左、右侧两两比较潜伏期均具统计学意义,潜伏期逐渐延长(P0.01),见表1。表1各组双下肢MEP潜伏期(略) 3讨论 本实验采用双侧颈总动脉结扎制备慢性脑低灌注模型,此法是目前公认慢性脑缺血模型〔2,3〕。双侧颈总动脉结扎可造成稳定的不完全性前脑缺血,脑供血大幅度下降,更接近慢性脑灌注不足时脑组织病理生理演变过程,脑的幕上部分血流减少,而脑干
7、灌注良好,维持生命中枢的基本功能。范文辉等〔3〕通过数字减影血管造影(DSA)观察,双侧颈总动脉结扎后其血流完全阻断,脑部血液供应主要由双侧椎动脉维持,持久性结扎后1A以上的超强刺激下,MEP波形变化相对较小,推测此时脊髓下行传导束处于兴奋饱和状态,尽管刺激强度增大而神经轴突的兴奋数目或传导速度都不可能再有显著增加。本研究也证实大鼠MEP存在不同种成分,这与Nielsen等〔10〕的研究结果相符。电刺激临床有
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