大鼠灌胃射干合剂后血清中盐酸麻黄碱的浓度变化

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1、大鼠灌胃射干合剂后血清中盐酸麻黄碱的浓度变化  射干合剂(SGHJ)的临床疗效主要为宣肺清热,止咳祛痰平喘;从目前已知的化学成分来分析,盐酸麻黄碱具有平喘功效,SGHJ指纹图谱分析[1]可看到,SGHJ的可测定化合物主要为盐酸麻黄碱和黄酮类化合物,本实验在多指标成分测定方法[2],动物血药浓度测定[3],SGHJ多指标成分在体内回收率的基础上,采用给大鼠灌胃SGHJ并观察其主要指标成分盐酸麻黄碱在动物血清中24h浓度变化.目前,对SGHJ的临床疗效与指标成分浓度之间的研究还缺乏研究,本研究尝试在中药复方制剂的质量控制中引入指标成分的含量与临

2、床疗效相关性的可能性;为中药复方制剂的质量控制建立定量基础.  1材料  1.1仪器与试剂  Agilent6460串联四极杆质谱,Agilent1200高效液相色谱仪(美国惠普公司);Labofuge400R高速离心机(上海力新有限公司);XGIII[2.0mm100mm,5μm,资生堂(中国)投资有限公司];流动相A:水,流动相B:乙腈,二元线性梯度洗脱[0~0.5min,A:B(95%:5%);0.5~5min,A:B(10%:90%);5~6.5min,A:B(95%:5%),6.5~10min,A:B(95%:5%)];流速

3、:0.3mlmin-1;进样体积5μl.  2.1.2质谱条件电喷雾离子源,正离子扫描;雾化气:50kPa,气帘气:20kPa,碰撞气:48kPa,离子源电压:4500V,离子源温度:500℃,为正离子多离子反应监测(MRM)扫描方式.在上述色谱、质谱条件下,通过质谱参数优化,分别得到ED和IS(TD)的离子选择通道分别为m/z166.2→148.2、m/z371.2→126.2.见图1.    2.2标准溶液的配制  分别精密配制ED、IS标准品配制质量浓度为0.1mgml-1的标准储备液,储存于-20℃备用;各

4、对照品的工作液浓度:0.1μgml-1.  2.3空白血清及含药血清样品的预处理  2.3.1血清的预处理取大鼠空白、含药全血0.3ml在3000rmin-1条件下离心10min,取45μl上层血清,加IS5μl混匀,加甲醇150μl,旋涡振荡,离心3000rmin-1,上清液10μl加50μl水稀释,涡旋混合3min,取5μl进样.  2.3.2尿液取空白、给药尿样,用甲醇稀释10倍体积,离心,然后取IS10μl(0.1μgml-1),加10μl稀释尿液,再加水80μl,混

5、匀,取5μl进样.  2.3.3粪便称取空白、粪样约0.1g,加1ml甲醇,超声处理(500S/MS法测定动物血清中射干合剂多指标成分的浓度[J].中国药师,2013,16(2):190-193  4常存库,王喜军.中药血清药物化学理论与方法的意义[J].世界科学技术---中医药现代化,2010,12(4):635-637  5董倩倩,李萍,闻晓东.丹参成分在Caco-2细胞中吸收的研究[J].中国天然药物,2007,5(1):59-62  6王喜军.基于药物代谢组学的中药及方剂中组分间协同增效作用[J].中国天然药物,2009,(7

6、)2:90-94  7贺丰,罗佳波,陈飞龙,等.GC-MS法研究麻黄汤中麻黄碱、伪麻黄碱的人体内过程[J].中药新药与临床药理,2004,15(5):336-347  8龙锐.小青龙颗粒中麻黄碱_伪麻黄碱在大鼠体内的药动学及药效学研究[D].北京:北京中医药大学硕士学位论文,2008  9陈燕,朱全红,罗佳波,等.麻黄汤中麻黄生物碱在人尿中的排泄研究[J].中国实验方剂学杂志,2007,13(11):55-60  10沈群.麻黄汤不同配伍对麻黄碱和伪麻黄碱在小鼠体内药代动力学的影响[D].广州:第一军医大学硕士学位论文,2002

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