实验三多糖含量的测定

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1、实验三多糖含量的测定1、分光光度法测多糖的原现和方法2、用Officeexcel作标准曲线二、仪器与试剂1、仪器:7200分光光度计、水浴锅、电子天平2、试剂:1水葡萄糖、5%苯酚溶液、浓H2SO4、dH2O3、器皿:50ml容量瓶、10ml量筒、玻璃棒、洗耳球、烧杯、试管、试管架三、步骤1、标准曲线的绘制①取1水葡萄糖0.551g于50ml容量瓶,加入dH2O溶解并小心稀释至刻度,再取5ml于50ml容量瓶巾,加dH2O稀释,即1.0mg/ml;②分别量取0.25ml,0.5ml,1.0ml,1.5ml,2.0ml,2.5ml分别置于已编号的50ml容量瓶中,加c!H2O定容

2、;③分别吸取上述溶液各2.0ml,再加入5%苯酚1ml,摇匀后迅速加入5ml浓H2SO4,摇匀后,室温放置5min,然后置于90°C水浴15min,冷却至室温;空白对照:同样収2mldH2O+lml5%苯酚+5ml浓H2SO4,摇匀后,室温放置5min,然后置于90°C水浴15min,冷却至室温;吸光度A得,浓度C与吸光度的线性方程y=ax+b2、准确量取多糖溶液(待测)2.0ml于50ml容量瓶屮,加dH2O定容,方法同上述③。四、实验结果①实验主要步骤(记录)②用Excel作图,并选择性粘帖至Word到PDF③计算浓度(待测液)五、实验注意1、高毒一一苯酚(强腐蚀)!2、高

3、腐蚀一一浓硫酸!一实验步骤标准曲线的绘制①取1水葡萄糖0.551g于50ml容量瓶,加入dH2O溶解并小心稀释至刻度,再取5ml于50ml容量瓶屮,加dH2O稀释,即待测溶液也用同法,空白对照组同法②分别量取0.25ml,0.5ml,1.0ml,1.5ml,2.0ml,2.5ml分别置于己编号的50ml容量瓶巾,定容;取待测2.0ml于50ml容量瓶巾,定容,空白对照组用2ml蒸馏水。1.5ml,2.0ml,2.5ml葡萄糖溶液)(图为定容好以后的,0.25ml,0.5ml,1.0ml,(加入苯酚,试管颜色仍为透明无色,①分别吸取上述溶液各2.0ml,再加入5%苯酚1ml,摇匀

4、后迅速加入5ml浓H2SO4,摇匀后,室温放置5min,然后置于90°C水浴冷却至室温;加入浓硫酸以后,试管变热,反应激烈,立马有细小气泡产生,且颜色变黄,葡萄糖溶液浓度越高,黄色越深)的试管颜色按浓度由高到低摆放,最左边的是待测溶液,颜色为浅黄色)5测量吸光度二实验数据的记录与作图0.70.60.50.40.30.20.10V=13.32x-0.0526Rz=0.985770.010.020.030.040.050.06X轴为浓度Y轴为吸光度三计算浓度待测溶液的吸光度为0.013由此推算出待测液浓度为0.004925

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