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时间:2018-11-13
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1、新会陈皮中总黄酮的提取工艺【摘要】目的优化新会陈皮总黄酮提取的工艺条件。方法在单因素试验的基础上,以总黄酮含量为指标,采用正交试验方法考察液固比、乙醇浓度、提取时间等因素。结果各因素的影响次序是液固比>提取温度>提取时间;最佳提取工艺为:乙醇体积分数为60%,液固比1∶25,提取温度70℃,提取时间3h,提取1次。结论优选得到的工艺稳定可行。【关键词】新会陈皮;总黄酮;正交设计 OptimizationofextractionprocessoftotalflavonoidsinXinhuidryorangepeelbyorthogonaldesign LINLin,LINZi-xia,HU
2、ANGQing-hua (SectionofAnalyticalChemistry,GuangdongPharmaceuticalUniversity,Guangzhou,Guangdong510006,China) Abstract:ObjectiveTooptimizeextractionprocessconditionfortotalflavonoidsinXinhuidryorangepeel.MethodsOnthebasisofthesingleexperimentalfactor,theoptimizedextractionconditiononthebasisoftotal
3、flavonoidsinedbyorthogonaldesign.ResultsTheorderoffactorsperature>extractionduration;Theoptimumextractionconditionsareextractiononceethodissimple,convenient,andaccurate. KeyL烧瓶中,加入石油醚(30~60℃)80mL,60℃回流脱脂2h;挥干石油醚后,根据实验要求,按照不同的水提取温度、提取时间以不同液固比及提取次数进行提取,抽滤,洗涤滤渣,合并滤液和洗液,浓缩去适量的乙醇,然后转入100mL量瓶中,定容,摇匀,即为供试
4、品溶液。 2.2橙皮苷标准曲线的绘制 取0.2274mg/mL的橙皮苷对照品贮备液,精密吸取0.5、1、1.5、2.0和2.5mL置25mL量瓶中,加体积分数为60%的乙醇至刻度。在285nm处测定吸收度,并绘制标准曲线。结果表明:在4.548~22.74μg/mL范围内有良好的线性关系,回归方程为A=0.033C+0.013,r=0.9993。 2.3测定方法 取一定提取条件下所得的供试品溶液,适当稀释,在285nm处测定样品的吸光度。根据标准曲线计算总黄酮的含量。以陈皮总黄酮的得率(%)为指标,确定最佳提取条件。 2.4单因素试验 选取水浴温度、乙醇体积分数、提取时间、液固比、
5、提取次数这5个可能影响提取效果的因素做单因素试验,以确定相关因素对陈皮提取物中黄酮含量的影响,结果见图1。 A.提取温度;B.乙醇体积;C.提取时间;D.液固比;E.提取次数 图15种因素对陈皮总黄酮得率的影响(略) Fig.1Effectoffivefactorsontheyieldoftotalflavonoids 由图1可以得出:在70℃时陈皮总黄酮得率达到最大,故可以确定最佳的提取温度为70℃;乙醇体积分数大于60%,陈皮总黄酮得率逐渐减少,故可以确定最佳的乙醇体积分数为60%;提取时间从2h后得率增长不大,以5h为最高;液固比在30倍后有显著减少,以25倍为最高;提取1次后得
6、率增长不大,从节省成本和节省溶剂的角度,提取次数为1次。 2.5正交试验设计优选最佳提取条件 通过单因素实验选取影响较大的三个因素:提取时间、提取温度和液固比,运用正交设计实验法,选用三因素三水平来确定陈皮总黄酮提取的最佳条件。实验结果见表1~3。 表1实验因素水平表(略) Tab.1Factorsandlevels 从表2的直观分析可以看出,3个因素对总黄酮提取含量的影响次序:液固比、提取温度、提取时间。 从表3的方差分析可以看出,液固比和提取温度对结果有显著性影响,提取时间对结果的影响不显著,从经济、省时的原则考虑,提取时间定为3h。综合上面的因素,最佳提取工艺:体积分数为6
7、0%的乙醇,提取温度70℃,液固比1∶25,提取时间3h,提取1次。 表2L9(34)正交实验结果与直观分析(略) Tab.2ResultofL9(34)orthogonalexperimentandanalysis 表3L9(34)正交实验方差分析表(略) Tab.3ANOVAanalysisofL9(34)orthogonalexperiment 2.6验证实验 按上述优化提取条件
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