hplc 法测定消渴丸中格列本脲的含量

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1、HPLC法测定消渴丸中格列本脲的含量【关键词】HPLC消渴丸格列本脲含量测定消渴丸是由葛根地黄等7味中药及西药格列本脲制成。成功为滋肾养阴，益气生津。用于治疗糖尿病。格列本脲是降糖的主要有效成分。且格列本脲有许多不良反应，所以笔者建立了高效液相色谱法(HPLC)测定消渴丸中格列本脲的方法，以控制格列本脲的含量，保证药品质量及用药安全。1仪器与试药Angilent—110型高校液相色谱仪(美国Angilent公司)，UV—2500型可见—紫外分光光度计(日本岛津公司)，消渴丸(市售品批号H00390H00214)，甲醇(色谱纯)，格列本脲对照品(中国药品生物制

2、品签定所，批号0135—0103)，其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件DiamondC18色谱柱(4.5mm×150mm,5μg);柱温：30℃;流动相：甲醇—磷酸二氢氨溶液(磷酸二氢铵1.725g，容于300mL水，磷酸调pH3.5±0.5(65:35);流速：1.0mL/min;检测波长：274nm;进样量：5μL。2.2对照品溶液的制备精密称取格列本脲对照品10mg，置50mL量瓶中，加甲醇20mL超声处理使溶解，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取10mL置50mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即可。浓度40μg/mL。2.3供试品溶液的制备以1

3、0丸为1份，共称10份，算出每份的平均重量(10丸的重量)取本品研成细粉，取10丸(约相当于格列本脲2.5mg)，精密称定，置具塞烧瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理30min，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，取得。2.4阴性对照溶液的制备按处方比例及制备方法，自制格列本脲的阴性样品，按2.3项下的方法制备硬性对照溶液。按以上色谱条件得到对照品，消渴丸及阴性对照的色谱图，表明样品与对照的保留的时间相同，阴性对照溶液。按以上色谱条件得到对照品，消渴丸及阴性对照色谱图，表明样品与对照品的保留时间相同，阴性对照无干扰。2.5线性

4、关系精密吸取格列本脲40μgmL-1对照品溶液2、4、6、8、10μL按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积A为纵坐标，进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=156.45X—0.4313，r=0.9999。格列本脲在0.08～0.40μg范围内呈线性关系。2.6精密度实验精密吸取格列本脲对照品溶液(40μg/mL)10μL，重复进样6次，测定格列本脲峰面积为62.573，RSD=0.30%(n=6)。2.7重复性实验取同批共试品(批号H00390)5份，照“样品测定”项下操作，测定格列本脲含量，RSD=0.92%(n=5)。2.8稳定性实验取对照

5、品溶液，在实验室中室温放置，分别在0、5、10、15、20、24h进样，对照品的峰面积RSD=0.92%(n=5),溶液在在24h内稳定。2.9回收率实验精密称取已知含量的消渴丸(批号H00390，含量1.9mg/mL)细粉(约相当于格列本脲1.25mg)9份，分为3组，每组分别精密加入对照品溶液(浓度为1.0mg/mL)1.0mL、1.25mL、1.5mL照“样品测定”项以下操作，计算加样回收率平均回收率97.19%，RSD1.85%。见表1。表1回收率试验结果(略)2.10样品的测定取3批消渴丸，按“供试品溶液”项下制备溶液，同法操作，即得。见表2。表2

6、样品的含量测定结果(略)【