人参茎叶皂苷对热损伤大鼠不同脏器糖皮质激素受体的影响

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1、人参茎叶皂苷对热损伤大鼠不同脏器糖皮质激素受体的影响作者：李敏，凌昌全，黄雪强，沈志雷【关键词】人参皂苷［摘要］目的：观察人参茎叶皂苷（ginsenosides,GSS）对热损伤大鼠不同脏器糖皮质激素受体（glucocorticoidreceptor,GR）的影响，并探讨其作用机制。方法：雄性SD大鼠随机分为：（1）正常对照组，室温下饲养，蒸馏水灌胃；（2）GSS治疗组，室温下饲养，GSS灌胃；（3）热损伤模型组，蒸馏水灌胃，制作热损伤模型；（4）热损伤模型GSS治疗组，GSS灌胃，制作热损伤模型。采用放射配体结合法检测大鼠脑、胸腺、肺和肝细胞液GR结合活性；逆转录聚合酶

2、链反应法测定脑、肝细胞液GRmRNA的水平；放射免疫法测定血浆促肾上腺皮质激素（adrenocorticotropin,ACTH）和皮质酮（corticosterone,CS）的浓度。结果：热损伤模型GSS治疗组大鼠脑、肺和肝细胞液GR结合活性以及脑和肝细胞液GRmRNA表达水平均明显高于单纯热损伤模型组（P＜0.05或P＜0.01）；热损伤模型GSS治疗组大鼠血浆ACTH和CS浓度与单纯热损伤模型组比较则无明显差异。结论：GSS可缓解热损伤大鼠不同脏器GR结合活性的下降幅度，其作用机制可能与促进GRmRNA的表达有关。　　［关键词］人参皂苷;人参茎叶;糖皮质激素受体;热

3、损伤;大鼠　　Effectsofginsenosidesextractedfromginsengstemandleavesonglucocorticoidreceptorindifferentviscerainheatdamagedrats　　ABSTRACTObjective:Toevaluatetheeffectsofginsenosides(GSS)extractedfromginsengstemandleavesonglucocorticoidreceptor(GR)indifferentviscerainheatdamagedrats,andtofindouti

4、tsactionmechanism.Methods:ThirtytaleSDratsentalgroup,andfed2mg/dGSSandequalquantityofdistilledus,lungandlivercytosolsinratsRNAinbrainandlivercytosolsinedbyreversetranscriptionpolymerasechainreaction(RTPCR)assay.Plasmaadrenocorticotropin(ACTH)andcorticosterone(CS)concentrationsinedbyradioi

5、mmunoassay.Results:ThebindingactivitiesofGRinbrain,lungandlivercytosols,andtheexpressionlevelsofGRmRNAinbrainandlivercytosolsagedratsthanthoseintheuntreatedheatdamagedrats(P＜0.05orP＜0.01).ThereaconcentrationsofACTHandCSbetagedratsandtheuntreatedheatdamagedrats.Conclusion:GSScanlessenthede

6、scendingdegreeofthebindingactivityofGRinbrain,thymus,lungandlivercytosols,andsuchefficacyofGSSmayberelatedtoimprovmentoftheexpressionofGRmRNA.　　KEYMLVReverseTranscriptase（美国GibcoBRL公司产品），37℃保温60min。90℃处理5min，冰上冷却，室温离心将溶液收集至管底。PCR扩增，引物由上海博彩生物科技有限公司合成，上游5’AGGCCGGTCAGTGTTTTCTA3’，下游5’AGGGGTGA

7、GCTGTGGTAATG3’，扩增得GRmRNA长度433bp，每个反应用2.5μl10×PCRbuffer（mol/LMgCl2），19.25μlH2O，0.5μl10mmol/L4×dNTPmix，0.25μliNosUP，0.25μliNosDolPCR薄壁管里，每管23μl。内参βactin用同样方式进行。每管加2μlRT产物，加30μl石蜡油。PCR扩增条件：94℃45s，预变性120s，54℃退火45s，72℃延伸60s，循环35次，最后延伸300s。DNA扩增产物用1.6%琼脂糖电泳和溴乙锭（ethidiumbr