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1、六味地黄丸对实验性糖尿病大鼠胰岛素敏感性影响作者:金智生,杨世勤,潘宇清,高研【摘要】目的探讨中药制剂六味地黄丸(Liua公司,批号:015K1279)。空腹及餐后血糖:采用微量血糖仪(美国罗氏公司,批号:021P1689)和试纸条;血清INS,C-P及生化指标(FFNS、TG、TC、HDL
2、C、LDL
3、C)测定参照放免分析试剂盒说明书(购自南京建成生物制品所,批号:200725)。1.3实验方法基础饲料适应性喂养1周后,将60只大鼠按体质量编号,以随机数字表法抽取8只为空白组;其余52只均喂以高脂饲料(其
4、中含10.0%猪油,20.0%蔗糖,2.5%胆固醇,1.0%胆酸盐,66.5%常规饲料),第5周对BMI≥25的大鼠一次性左侧下腹部注射小剂量STZ(30mg/kg)[2-3],第7周,大鼠禁食12h后,按2g/kg剂量灌服20%D-葡萄糖溶液,凡灌胃0和120min血糖分别≥7.8mmol/L和(或)≥11.0mmol/L的大鼠为造模成功。随机选择造模成功的大鼠32只(雌雄各半),称重按体质量编号依照随机数字表法分为4组,分别为模型组、罗格列酮组、LP低剂量组、LP高剂量组,每组8只。第2d开始灌胃,空白
5、组、模型组给予等体积的生理盐水;罗格列酮治疗组给予罗格列酮70mg/(kg·d)(质量浓度为4.2mg/mL);LP高、低剂量组分别给予150mg/(kg·d)、50mg/(kg·d),(质量浓度分别为9mg/mL,3mg/mL)。1.4标木采集与处理第11周后,大鼠禁食12h后,尾静脉取血测血糖,腹腔注射含2%戊巴比妥钠生理盐水溶液40mg/kg麻醉,股动脉取血加入装有40000U/mL抑肽酶20μL的冰冷试管中混匀,以3500r/min离心10min分离血清,室温下48h内检测INS、FPG、TG、TC
6、、HDL
7、C、LDL
8、C、C
9、P含量,并于-25℃冰箱内保存留取组织标本。胰岛素抵抗的评估,采用稳定模式评估法的胰岛素抵抗指数(HOMA
10、IR)[3]评价其胰岛素敏感性,HOMA
11、IR公式[空腹血糖(FPG,mmol/L)×空腹胰岛素(mU/L)/22.5]。HOMA
12、IR值越高,表明胰岛素敏感性越低,胰岛素抵抗越重。BMI=体质量∕身长2(kg∕m2)。ISI=Ln[1∕FFNS×FPG][4]。1.5统计学处理计数资料所有数据用(±s)表示。检验各变量非正态分布数据用非参数统计,情况组间比较用方差分析检
13、验,治疗前后比较用配对t检验,采用SPSS13.0统计软件处理。2实验结果2.1体质量及BMI的变化给药后与给药前相比体质量及BMI均降低,除空白组及模型对照组外差异均具有统计意义(P<0.05)。并且LP高剂量与罗格列酮有相似的治疗效果;LP高、低剂量组与罗格列酮组,LP高、低剂量组之间比较差异无统计意义(P>0.05)。说明LP和罗格列酮都可以降低2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠的体质量及BMI,能够改善胰岛素抵抗。见表1。表1LP对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠的体质量及BMI的影响(±s)组别n体质量
14、(g)BMI给药前给药后给药前给药后空白组8251.23±26.66250.78±27.5522.56±1.6521.52±1.68模型对照组8288.43±31.23﹟285.66±35.2126.11±1.75﹟25.50±1.53罗格列酮组8290.55±26.87260.11±23.79﹡△25.59±1.3721.57±1.27﹡△LP高剂量组8287.78±27.45272.38±30.31﹡△27.10±1.8221.38±1.88﹡△LP低剂量组8293.33±30.22278.63±24.
15、75﹡△26.36±1.5821.29±1.83﹡△注:与空白组比较﹟P<0.05,与模型对照组比较﹡P<0.05,与治疗前比较△P<0.052.2ISI、稳定模式评估法的胰岛素抵抗指数(HOMA
16、IR)、FPG及C
17、P水平的变化LP高、低剂量组及罗格列酮组、稳定模式评估法的胰岛素抵抗指数(HOMA
18、IR)、C
19、P及血糖均明显降低,ISI升高与模型对照组相比具有显著性差异(P<0.05或P<0.01);LP高、低剂量组与罗格列酮组,LP高、低剂量组之间比较无统计意义(P>
20、0.05)。说明LP和罗格列酮都可以降低T2DM胰岛素抵抗大鼠的稳定模式评估法的胰岛素抵抗指数(HOMA
21、IR)、C
22、P及FPG,增高ISI,而改善胰岛素抵抗。见表2。表2LP对ISI、HOMA
23、IR、FPG及C
24、P水平的影响(±s)组别nISIHOMA
25、IRFPG(mmol/L)C
26、P(pmol/L)空白组8-3.91±0.221.77±0.323.65±0.570.0833±0.008模型对照组8-4.78±