半夏块茎不同粒径总生物碱含量的研究

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1、半夏块茎不同粒径总生物碱含量的研究曾建红彭正松陈旭王晓华舒丽清【摘要】　　目的测定半夏块茎不同粒径总生物碱的含量，为半夏质量标准控制提供理论依据。方法采用氯仿提取，依据酸性染料比色法的原理，在417nm波长下测定，并作方差分析。结果获得良好的线性关系(r=0.9989)和回收率(100.1%)，RSD为2.3%。不同粒径总生物碱含量的差异显著（F=79.23，P0.01）。结论测定方法简单快速；不同粒径总生物碱含量和产量以直径为2cm的块茎最高，在半夏收购过程中应将块茎粒径控制在2.0cm左右为宜。【关键词】半夏块茎

2、总生物碱　　Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentoftotalalkaloidsfromPinelliaternatetuberetersforqualitycontrol.MethodsThealkaloidfromPinelliaternateandtestedat417nmeterhadverysignificantdifference(F=79.23，P0.01).ConclusionThismethodissimpleandquick.Thealkaloidcont

3、entandoutputisthehighesteter；Alkaloids　　中药半夏为天南星科多年生草本植物半夏Pinelliaternate(Thunb.)Breit的干燥块茎，在我国大部分地区及朝鲜半岛和日本均有分布。半夏入药首载于《神农本草经》，《中国药典》2005年版收载为唯一的半夏类药材植物。半夏块茎主要含有生物碱、β-谷甾醇、多糖、半夏蛋白、氨基酸、挥发油及无机元素等多种化学成分〔1,2〕，具有燥湿化痰，降逆止呕，消痞散结之功效。目前市售镇咳类中药复方制剂中多含有半夏，而生物碱在众多的化学成分中具有明

4、显的生物活性和生理功能，是中药半夏中主要有效成分之一。国内外对半夏生物碱含量的测定已做了大量工作〔3～8〕，但对半夏块茎不同粒径生物碱含量的研究尚未见报道，《中国药典》2005年版中也未见半夏块茎的粒径指标。本研究采用酸性染料比色法测定半夏块茎不同粒径生物碱的含量，为半夏质量标准控制提供依据。　　1材料与仪器　　1.1样品　　材料来自西华师范大学生命科学学院半夏基地，经本教研室鉴定为半夏的干燥块茎。材料均系同一植株的块茎和珠芽通过无性繁殖生长，无病虫害。材料共取5个批次，按块茎单粒直径分为5级，分别用Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，

5、Ⅴ表示。块茎采收后去皮，洗净，105℃烘箱中烘4h后置于60℃烘箱中烘干至恒重，游标卡尺量取直径，粉碎过60目筛置干燥器备用。　　1.2试剂　　对照品盐酸麻黄碱(中国药品生物制品检定所，批号714-9903)，氨水、二氯甲烷、柠檬酸钠缓冲液(pH=6.0)，0.1%溴麝香草酚蓝溶液等均为市售分析纯。　　1.3仪器　　GT3C916紫外可见分光光度计：(澳大利亚GBC科学仪器有限公司)，旋转式蒸发仪(上海申科电子有限公司)。　　2方法和结果　　2.1对照品溶液的制备　　精密称取105℃干燥至恒重的盐酸麻黄碱对照品16

6、.4mg，置250ml容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀制得含盐酸麻黄碱浓度为0.0656mg/ml对照品溶液。　　2.2样品供试液的制备　　精密称取半夏粉末，加入12%氨水将材料搅拌至湿润，加入样品量18倍的氯仿浸泡25h，置70℃水浴锅中回流提取5h，过滤，残渣以10ml氯仿分3次洗涤，合并提取液，移置50ml容量瓶中，用氯仿稀释至刻度，摇匀，精确吸取提取液2ml置旋转式蒸发仪浓缩至干，加入pH6.0缓冲液5ml，精密加入氯仿10ml，加0.1%溴麝香草酚蓝溶液1ml，充分振荡，移置60ml分液漏斗，静置3

7、0min，分取氯仿层，作为样品供试液。　　2.3实验条件的选择　　2.3.1最大吸收光谱波长的选择　　精密称取样品，按“2.2”项方法制备样品供试液，并将对照品溶液和样品供试液在380～600nm波长范围内进行光谱扫描，结果两者在417nm波长处均有最大吸收值，两者的吸收峰完全相同，吸收光谱一致，故选定417nm作为测定波长。　　2.3.2稳定性考察　　精密称取样品，按“2.2”项制备样品供试液和空白对照液，在波长417nm处进行测定，并在室温下每隔20min测定1次，实验结果表明供试样品液在80min内显色稳定，R

8、SD=0.3%(n=5)。本实验只考察了80min内供试液的显色稳定性，因80min内完全可以完成测定。　　2.3.3标准曲线的绘制　　精密吸取对照品溶液0.1，0.3，0.5，0.7，0.9ml，分别加蒸馏水至1.0ml，加入5mlpH6.0柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，精密加入氯10ml和0.1%溴麝香草酚蓝溶液1ml充分振荡，移置60ml分液漏