检测血清和精液中hbv

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1、检测血清和精液中HBV　　　　　　　　　　　　　作者：石龙石铭韩博许琳婧【关键词】精液　　【摘要】目的了解男性感染乙型肝炎病毒（HBV）后，精液中是否携带HBV经受精卵传给子代形成父婴传播。方法采用核酸扩增（PCR）技术，检测血清和精液中的HBV-DNA。结果血清HBV标志物HBsAg、HBeAg、抗-HBc皆为阳性者，无论是血清或是精液均能100%检测出HBV-DNA。HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性者，血清和精液中HBV-DNA阳性检出率为53.3%和33.3%。89例血清和精液中HBV-DNA阳性检出率分别为49.44%和40.45%，

2、P>0.05，差异无显著性，不能说明血清与精液HBV-DNA阳性检出率不同。结论如果说HBV感染的传播途径除主要的血液暴露、性接触、日常生活接触和母婴传播外，经精液传播HBV也极具潜在的危险性，则通过父亲将HBV传染给子女成为可能。因此，男性更应该积极参与负责任的生育、性和生殖行为，避免给家庭和子女带来不幸。　　关键词精液垂直传播乙型肝炎病毒　　ClinicalsignificanceofHBV-DNAintheserumandsemen　　【Abstract】ObjectiveTostudythemaleinfectedbyhepatiti

3、sBvirus（HBV），oblasttakestheHBVornot，ationfatherission.Meth-odsThetechniquePCR-HybribdiagnostickitforhepatitisBvirusandsemen.ResultsTheserumHBsAg，HBeAg，anti-HBcallandsemenpositiveratesandsemenpos-itiverateandsemenpositiverateissionoftheHBVinfectionmainlyisabloodtoexpose，sexcont

4、act，thedailylifegetsintouchentransmittedtheHBVhasthelatentriskverymuch.ThefatherpassingtotheHBVinfectedtothechildrenpossibly.Therefore，themaleevenshouldparticipatetoberesponsibleactivelyofgroiseryforfamilyandsonanddaughter.　　KeyenverticaltransmissionhepatitisBvirus　　在我国乙型肝炎病毒（

5、HBV）感染的传播途径主要是血液和体液传播，而垂直传播也在HBV感染的过程中起着十分重要的作用。从传统意义上讲，有关HBV的垂直传播问题，人们往往将注意力偏重于母婴传播上，却忽视了男性参与生殖健康和性行为方面所起的作用。事实上在日常生活与性接触中，一直缺乏足够的证据，证实HBV是否在父婴间一定没有传染性。因此，潜在的父婴传播HBV的危险性也是不可忽视的途径之一。为了解HBV在父婴间传播的可能性，我们采用核酸扩增（PCR）技术检测男性血清和精液中的HBV-DNA，以加深对父婴间传播的认识，现将检测结果报告如下。　　1资料与方法　　1.1一般资料标本来

6、源于2003年8月～2005年2月本院门诊，按照自己的意愿，要求做生殖健康检查的男性89例，年龄23～39岁，平均（25.5±2.3）岁。　　1.2标本采集　　1.2.1血清标本用一次性真空采血器，采集静脉血5ml，置于无菌试管中离心分离血清。　　1.2.2精液标本在医生指导下用避孕套采集，置于无菌试管中。采集到的所有标本放置-20℃保存待检。　　1.3方法　　1.3.1血清HBV标志物检测采用山东潍坊三维生物工程集团有限公司酶联免疫试剂盒。　　1.3.2HBV-DNA检测采用上海克隆生物高技术有限公司HBV核酸扩增（PCR）杂交梳检测试剂盒。仪器

7、为美国PerkinElmer480基因扩增仪。　　1.3.3HBV-DNA检测原理采用聚乙二醇（PEG）沉淀法浓缩标本中的乙型肝炎病毒颗粒，碱变性法提取DNA，用生物素标记引物对HBV-DNA进行PCR扩增。将扩增产物与固定在梳齿上的探针进行反向杂交。探针捕获的生物素和碱性磷酸酶标记的链霉亲和素（SA-AP）特异性结合后，碱性磷酸酶催化底物显色，在梳齿上显出蓝色线条，判断其乙型肝炎病毒核酸的存在。检测灵敏度为420拷贝/ml（10fg/ml）。试剂中使用dUTP和UNG酶，能够有效消除扩增产物污染对检测结果的干扰。　　1.3.4统计学方法对不同的检

8、测资料类型，采用样本构成比的比较。两组间差异采用配对计数资料比较。　　2结果　　2.1血清HBV标志物与HBV-DNA检测