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时间:2018-11-09
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1、红景天苷对大鼠急性心肌缺血和乳鼠心肌细胞的保护作用作者:颜天华马莹杨伟王秋娟贾莹潘志伟【摘要】目的研究红景天苷对大鼠急性心肌缺血的保护作用,以及对乳鼠心肌细胞于缺氧/复氧损伤和氧化损伤下的影响。方法以垂体后叶素(pituitrin)制备大鼠急性心肌缺血模型,观察急性心肌缺血大鼠Ⅱ导联心电图的变化。体外培养原代乳鼠心肌细胞,采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导心肌细胞缺氧/复氧损伤和过氧化氢(H2O2)诱导造成氧化损伤模型。MTT法测定细胞存活率并测定乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)浓度。结果红景天苷能显著抑制垂体后叶素所造成的心电图T波抬高和J点升高;能明显提高缺氧/
2、复氧模型和氧化损伤模型下的细胞存活率,降低培养液中的LDH和CK浓度。结论红景天苷对急性心肌缺血损伤、缺氧/复氧损伤和氧化损伤均有较好的保护作用。【关键词】红景天苷急性心肌缺血心肌细胞缺氧/复氧氧化损伤红景天为景天科景天属RhodiolaL.多年生草本植物,主要生长于高寒、缺氧的地区,因此具有极强的环境适应能力和生命力。在我国红景天的应用已有悠久历史,在西藏被誉为“高原人参”,为藏族习用药材。红景天主要有效成分有红景天苷、酪醇,此外含有淀粉、蛋白质和具有生物活性的多种微量元素,国内外的研究主要集中在红景天苷、红景天素和酪醇上[1,2]。近年来的研究结果表明,红景天具有抗肿瘤、
3、抗衰老、抗缺氧、抗寒冷、抗辐射等多种功能。本实验研究红景天苷对急性心肌缺血损伤的影响以及对缺氧/复氧损伤和氧化损伤的心肌细胞的影响,为开发具有临床应用价值的抗心肌缺血新药提供依据。 1器材 1.1药品与试剂注射用红景天苷,由成都恒基医药科技有限公司提供,纯度大于90%;葛根素注射液,北京协和药厂生产;注射用盐酸地尔硫卓(合贝爽),天津田边制药有限公司进口分装;垂体后叶素注射液,上海第一生化药业有限公司生产;连二亚硫酸钠,天津市福晨化学试剂厂生产,分析纯;溴化-(4、5二甲基-2-噻唑基)-2、5二苯基四氮唑(MTT),美国sigma公司出品;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒及肌
4、酸激酶(CK)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所;其它试剂均为市售分析纯。 1.2仪器ECG-6511型心电图机,日本光电工株式会社出品;紫外可见分光光度计(TU-1800),北京普析通用仪器有限责任公司出品;DG-5031型酶联免疫检测仪,华东电子集团医疗装备有限责任公司出品。 1.3动物SD大鼠,雌雄各半,(220±20)g,清洁级;SD孕大鼠,清洁级;均由河南省实验动物中心提供,许可证号:SCXK(豫)2005-0001。 2方法 2.1红景天苷对垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血的影响[3]SD大鼠70只,雌雄各半,随机分为7组。分别为正常对照组和模型组(均给予等
5、量生理盐水),葛根素组(12.0mg/kg),地尔硫卓组(1.5mg/kg),红景天苷高、中、低剂量组(24.0,12.0,6.0mg/kg)。以上各组以不同浓度等容积给药0.5ml/kg。 将大鼠用3%的戊巴比妥钠以40mg/kg的剂量腹腔注射麻醉后,仰卧位固定,记录一段正常心电图(S点不高于基线为合格,异常者弃去不用)。静脉给药5min后尾静脉注射脑垂体后叶素0.75U/kg[4,5],给药容积为1.0ml/kg,注射速度为5~10s。记录注射后5,10,30s,1,2,5,10,20min的Ⅱ导联心电图,观察T波和J点的变化。 2.2红景天苷对心肌细胞的影响
6、 2.2.1对缺氧/复氧(Na2S2O4)所致心肌细胞损伤的影响根据 3结果 3.1红景天苷对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血的影响与对照组比较,给予垂体后叶素后,模型组出现明显的T波抬高(P<0.01),持续30s,随后T波降低。与模型组相比,红景天苷高剂量组(24.0mg/kg)于5,10s时能明显抑制T波抬高(P<0.01);中剂量组(12.0mg/kg)于5,10s时也可抑制T波抬高(P<0.05);低剂量组(6.0mg/kg)不能抑制T波抬高。红景天苷高、中剂量组作用强度与地尔硫卓组(1.5mg/kg)和葛根素组(12.0mg/kg)比较无显著差异(
7、P>0.05)。结果见表1。 与对照组比较,给予垂体后叶素后,模型组出现明显的J点升高(P<0.01),且持续至药后20min尚未恢复。与模型组相比,红景天苷高、中剂量组(24.0,12.0mg/kg)能显著抑制J点升高(P<0.01),低剂量组6.0mg/kg无明显作用。红景天苷高、中剂量组作用强度与地尔硫卓组1.5mg/kg和葛根素组12.0mg/kg比较无显著差异(P>0.05)。结果见表2。 表1红景天苷对垂体后叶素所致心肌缺血大鼠T波的影响(略) 与对照组比较,*
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