益母草的提取工艺研究张学谦于丽娜

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1、益母草的提取工艺研宄张学谦于丽娜张学谦于丽娜（沈阳市苏家屯区中医医院药剂科110101）【摘要】目的：对益母草中的总黄酮进行提取工艺研究。方法：通过正交实验确定提取益母草中的总黄酮的优化提取工艺条件。以提取溶剂水和益母草的重量倍数比，提取煎煮时间和提取煎煮的次数作为正交实验设计的三个考察因素，以益母草提取物中的总黄酮含量为考察指标，每个因素选用三个水平进行实验。结果:提取溶剂水和益母草的重量倍数比为10,提取煎煮时间为三小时，提取煎煮3次。结论：该方法操作简单、方便，可作为对益母草中总黄酮物质提取的方法,为益母草总黄酮提取工艺的进一步深入研究提供了依据。【关键词】益母草总黄酮提取工

2、艺正交试验【中图分类号】R284【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）12-0030-02益母草为曆形科益母草植物LeonurusjaponicusHoutt.的新鲜或干燥地上部分［1］。其味辛、微苦，性微寒，入心铋肝经。具有活血调经，利尿消肿之功效。用于治疗月经不调、痛经、水肿尿少、急性肾炎水肿等疾病。益母草全草含生物碱、黄酮、酚类、氨基酸、有机酸、糖类。其中，黄酮类化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖等多种生理活性。药理研究证明其只有调经止血，保护心肌缺血再灌注损伤抗血小板聚集，降低血液粘度等作用。在临床上可用来治疗痛经、流产后出血、冠心病、心肌缺血、高黏血

3、症、肾炎水肿、风湿关节疼痛等疾病，只有广泛的药理活性［2］。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其他包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等［3］。黄酮类化合物具有抗肿瘤、抗心脑血管疾病、消炎镇痛、免疫调节、降血糖、治疗骨质疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗辐射等作用［4］。益母草分布广泛，益母草中含有较为丰富的黄酮［5］〜［8］。因此，益母草具有广泛开发和利用价值，值得综合利用，加强资源开发。1仪器与材料1.1仪器UV-755B紫外线分光光度计（上海分析仪器总厂）；DZF-150小型真空恒温干燥箱（郑州长城科工贸易有限公司）；80-2离心沉淀器（

4、上海分析器械厂）；旋转蒸发器（上海申生科技公司）；KDM型控温电热套（耶城华鲁电热仪器有限公司）。1.2材料益母草（经鉴定为唇形科益母草植物LeonurusjaponicusHoutt.的干燥地上部分）。95%乙醇AR;亚硝酸钠CP;硝酸铝CP;正丁醇CP;氢氧化钠CP;芦丁标准品（中国生物制品检定所）。2实验方法和结果2.1工艺的设计根据预试验的考察结果，我们对水提取益母草药材中冇效成分的影响因素进行了评估，从而确定以提取溶剂水和益母草的重量倍数比，提取煎煮吋间和提取煎煮的次数作为正交实验设计的三个考察因素，以益母草提取物中的总黄酮含量为考察指标，每个因素选用三个水平（见表1），

5、按照正交实验设计表L9（34）的安排进行实验。表1因素水平表ABCD水平料液比（倍）煎煮吋间（h）煎煮次数空白161128231032.2操作步骤2.2.1样品的制备依据正交设计实验安排表，取益母草药材适当粉碎，取益母草粗粉约10g,称定，放人已编号的圆底烧瓶中，加水适量，冋流，再冷却、过滤，滤液旋转真空浓缩(80°C，68.0rpm)至一定体积。待滤液冷却后，加入等体积95%乙醇，再放入冰箱内冷藏，过滤得滤液，弃去滤渣。滤液旋转真空浓缩(80°C，68.0rpm)至乙醇蒸发完全，将流浸膏置于真空干燥箱中干燥成疏松固体，粉碎得终产物。2.2.2总黄酮的含量测定对照品溶液的制备精密称

6、取芦丁对照品200mg，置于100ml容量瓶中，加入95%乙醇溶液并稀释至刻度，摇匀。精密称取10ml置于100ml容量瓶中，加入95%乙醇使成100ml,摇匀即得(每lml含有无水芦丁0.2mg)。标准曲线的制备精密吸取对照品溶液0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0ml分置于50ml容量瓶中，各加95%乙醇12ml,加10%亚硝酸钠溶液2.0ml，混匀，放置6分钟，加10%硝酸铝2.0ml,放置6分钟加5%氢氧化钠试液20ml,最后用95%乙醇稀释至刻度，摇匀，以第一瓶为空白溶液，用紫外分光光度计，在500nm处测定吸光度。得一回归方程:A=10.33C-0.0

7、116,r=0.9996(n=6)。2.2.3提取物中总黄酮含量的测定精密称定提取物，置索氏提取器中，加95%乙醇冋流至无色，将提取液置于烧杯中，沸水浴加热浓缩至干,再用热水洗涤3次。将洗液滤至分液漏斗中，并加入饱和正丁醇液萃取3次。合并萃取液于小烧杯中，沸水浴蒸干，再加95%乙醇至使之溶解，并移于50ml容量瓶中，再加95%乙醇至刻度，摇匀。精密取10ml于50ml容量瓶中加95%乙醇至刻度摇匀，按标准曲线的制备操作测定吸光度，计算样品中总黄酮的含量。2.3结果试验